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鸡血—脾屏障及其淋巴细胞归巢的机制研究

摘要第10-14页
ABSTRACT第14-18页
缩略符号第19-20页
前言第20-22页
第一篇 文献综述第22-58页
    第一章 脾脏结构及血-脾屏障的研究进展第22-44页
        第一节 脾脏结构进化的研究进展第22-27页
            1 鱼类脾脏组织结构第22-23页
            2 两栖类脾脏组织结构第23页
            3 爬行类脾脏组织结构第23-24页
            4 禽类脾脏组织结构第24-25页
            5 哺乳类脾脏组织结构第25-27页
        第二节 禽类脾脏结构的发育研究进展第27-30页
            1 鸡脾脏组织结构的发育进展第27-28页
            2 鸡脾脏中T、B淋巴细胞发育的研究进展第28-30页
                2.1 鸡脾脏中T淋巴细胞的发育第28页
                2.2 鸡脾脏中B淋巴细胞的发育第28-30页
        第三节 脾脏循环模式的概述第30-32页
            1 开放式循环第30-31页
            2 闭合式循环第31页
            3 混合式循环第31-32页
        第四节 脾脏功能的研究进展第32-34页
            1 造血、储血和滤血功能第32页
            2 内分泌功能第32页
            3 免疫功能第32-34页
                3.1 非特异性免疫第33页
                3.2 特异性免疫第33-34页
        第五节 血-脾屏障的研究进展第34-37页
            1 血-脾屏障的发现与结构组成第34-35页
            2 血-脾屏障的功能第35-36页
                2.1 机械屏障作用第35页
                2.2 生物屏障作用第35-36页
                2.3 传递抗原信息第36页
            3 血-脾屏障的调节第36-37页
        参考文献第37-44页
    第二章 淋巴细胞归巢的研究进展第44-58页
        第一节 高内皮后微静脉的研究进展第44-47页
        第二节 淋巴细胞归巢的分子基础第47-53页
            1 淋巴细胞归巢受体整合素的研究进展第47-49页
                1.1 整合素的结构第47-48页
                1.2 整合素的生物学功能第48页
                1.3 参与淋巴细胞归巢的整合素第48-49页
            2 整合素连接激酶的研究进展第49-50页
            3 淋巴细胞归巢地址素第50-51页
            4 LPS刺激对淋巴细胞归巢的影响第51-53页
        参考文献第53-58页
第二篇 试验研究第58-156页
    第三章 鸡-血脾屏障的发现与结构组成第58-76页
        1 材料与方法第59-60页
            1.1 实验动物第59页
            1.2 主要仪器和试剂第59页
            1.3 光镜样品的制备第59-60页
            1.4 透射电镜的制样和观察第60页
            1.5 网状纤维染色步骤第60页
            1.6 酸性磷酸酶反应步骤第60页
            1.7 免疫组织化学反应步骤第60页
        2 结果第60-69页
            2.1 鸡脾脏组织结构特征第60-62页
            2.2 鸡血-脾屏障的位置以及对外源碳粒的屏障作用第62-69页
        3 讨论第69-72页
        参考文献第72-76页
    第四章 不同日龄鸡血-脾屏障的胚后发育研究第76-96页
        1 材料与方法第77-81页
            1.1 实验动物第77页
            1.2 主要仪器和试剂第77-78页
            1.3 光镜样品制备第78页
            1.4 透射电镜的制样和观察第78页
            1.5 冰冻切片免疫组织化学实验步骤第78页
            1.6 荧光定量qPCR检测不同日龄鸡脾脏中免疫相关因子的基因表达第78-81页
        2 结果第81-90页
            2.1 不同日龄鸡血-脾屏障的胚后发育第81-82页
            2.2 不同日龄鸡脾脏胚后发育的形态学观察第82-84页
            2.3 不同日龄鸡脾脏鞘毛细血管高内皮的超微结构第84页
            2.4 不同日龄鸡血-脾屏障中T、B淋巴细胞和抗原递呈细胞的分布第84-89页
            2.5 不同日龄鸡脾脏内免疫相关因子的mRNA表达变化第89-90页
        3 讨论第90-93页
        参考文献第93-96页
    第五章 鸡脾脏椭球高内皮的细微结构及归巢地址素的表达第96-108页
        1 材料与方法第97-98页
            1.1 实验动物第97页
            1.2 主要仪器和试剂第97页
            1.3 光镜样品制备第97页
            1.4 透射电镜的制样和观察第97页
            1.5 免疫组织化学实验步骤第97-98页
        2 结果第98-102页
            2.1 鸡椭球高内皮的形态结构特征第98-101页
            2.2 VCAM-1在鸡脾脏血管内皮的表达第101页
            2.3 MADCAM-1在鸡脾脏血管内皮的表达第101-102页
        3 讨论第102-104页
        参考文献第104-108页
    第六章 脾脏淋巴细胞归巢的比较研究第108-122页
        1 材料与方法第109页
            1.1 实验动物第109页
            1.2 主要仪器和试剂第109页
            1.3 光镜样品的制备第109页
            1.4 透射电镜的制样和观察第109页
        2 结果第109-116页
            2.1 鸡脾脏鞘毛细血管的形态结构第109-111页
            2.2 中华鳖脾脏鞘毛细血管的形态结构第111-113页
            2.3 鞘毛细血管微通道结构特征第113-114页
            2.4 淋巴细胞迁移至脾脏椭球的超微结构第114-116页
        3 讨论第116-118页
        4 结论第118-119页
        参考文献第119-122页
    第七章 LPS炎症刺激下鸡脾脏淋巴细胞归巢的机制研究第122-156页
        第一节 整合素连接激酶的原核表达与多抗制备第122-135页
            1 材料和方法第123-129页
                1.1 材料第123-124页
                1.2 方法第124-126页
                1.3 鸡ILK原核表达载体的构建第126-127页
                1.4 ILK抗原区基因在大肠杆菌中的表达条件优化第127页
                1.5 蛋白的表达、纯化与复性第127-128页
                1.6 多抗的制备第128-129页
                1.7 纯化蛋白的抗原性分析第129页
            2 结果第129-133页
                2.1 鸡ILK基因CDS区克隆及抗原区分析第129-130页
                2.2 ILK抗原区扩增及重组质粒酶切鉴定第130-131页
                2.3 ILK抗原区的表达纯化第131-132页
                2.4 纯化蛋白的抗原性分析第132-133页
            3 讨论第133-134页
            4 结论第134-135页
        第二节 LPS炎症刺激下鸡脾脏淋巴细胞归巢的机制研究第135-152页
            1 材料与方法第136-142页
                1.1 实验动物第136页
                1.2 试剂与仪器第136-137页
                1.3 脾脏淋巴细胞归巢示踪方法第137-138页
                1.4 冰冻切片免疫组织化学实验步骤第138-139页
                1.5 脾脏和血清中细胞因子IL-6和TNF-a检测第139页
                1.6 荧光定量qPCR检测归巢因子在鸡脾脏中的基因表达第139-141页
                1.7 Western blot检测归巢相关因子的蛋白表达第141-142页
                1.8 数据处理与分析第142页
            2 结果第142-149页
                2.1 CFSE活细胞标记示踪鸡脾脏淋巴细胞归巢的动态第142-144页
                2.2 LPS诱导的鸡脾脏内淋巴细胞归巢的分布变化第144页
                2.3 LPS刺激下淋巴细胞跨高内皮细胞的迁移第144-145页
                2.4 LPS刺激下鸡脾脏T、B淋巴细胞的分布变化第145-147页
                2.5 LPS上调血液和脾脏中IL-6和TNF-α第147-148页
                2.6 LPS诱导调节淋巴细胞归巢相关因子的基因表达变化第148页
                2.7 LPS上调整合素β1、VCAM-1、ILK和AKTps473蛋白表达第148-149页
            3 讨论第149-151页
            4 结论第151-152页
        参考文献第152-156页
全文总结第156-158页
创新点第158-160页
论文发表情况第160-162页
致谢第162页

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