| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1. 引言 | 第9-14页 |
| 1.1 肝硬化门静脉高压性脾功能亢进概述 | 第9页 |
| 1.2 肝硬化门脉高压脾肿大并发外周血细胞减少的原因 | 第9-11页 |
| 1.2.1 脾内阻留 | 第9页 |
| 1.2.2 细胞吞噬 | 第9-10页 |
| 1.2.3 骨髓抑制 | 第10页 |
| 1.2.4 免疫缺陷 | 第10页 |
| 1.2.5 肝硬化 | 第10页 |
| 1.2.6 肝功能障碍 | 第10-11页 |
| 1.2.7 药物的毒性作用 | 第11页 |
| 1.2.8 营养障碍 | 第11页 |
| 1.2.9 血液循环中的血小板破坏 | 第11页 |
| 1.2.10 失血 | 第11页 |
| 1.3 本研究中四种细胞因子介绍 | 第11-13页 |
| 1.3.1 巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF) | 第12页 |
| 1.3.2 肿瘤坏死因子β(TNF-β) | 第12页 |
| 1.3.3 干扰素γ(IFN-γ) | 第12页 |
| 1.3.4 白介素10(IL-10) | 第12-13页 |
| 1.4 研究意义 | 第13页 |
| 1.5 技术路线 | 第13-14页 |
| 2. 大鼠肝硬化脾亢模型的建立 | 第14-18页 |
| 2.1 材料和方法 | 第14页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第14页 |
| 2.1.2 主要实验试剂及仪器设备 | 第14页 |
| 2.1.3 解剖器械 | 第14页 |
| 2.2 大鼠肝硬化脾亢模型制备 | 第14-15页 |
| 2.2.1 大鼠肝硬化脾亢模型制备的常见方案 | 第14-15页 |
| 2.2.2 大鼠肝硬化脾亢模型制备的方法和过程 | 第15页 |
| 2.2.3 肝硬化脾亢模型成功判定标准 | 第15页 |
| 2.3 统计学方法 | 第15页 |
| 2.4 结果 | 第15-18页 |
| 2.4.1 一般状态 | 第15-16页 |
| 2.4.2 肝组织病理变化 | 第16页 |
| 2.4.3 脾组织病理变化 | 第16页 |
| 2.4.4 脾脏指数的变化 | 第16-17页 |
| 2.4.5 血常规比较 | 第17页 |
| 2.4.6 肝功能比较 | 第17-18页 |
| 3. 免疫组化法检测大鼠肝硬化脾亢脾组织中M-CSF、TNF-β、IFN-γ和IL-10的表达 | 第18-25页 |
| 3.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 3.1.1 标本 | 第18页 |
| 3.1.2 主要试剂和仪器 | 第18页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第18-19页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第19-21页 |
| 3.2.1 蜡块的制作 | 第19页 |
| 3.2.2 切片制作 | 第19页 |
| 3.2.3 HE常规染色方法 | 第19-20页 |
| 3.2.4 免疫组化染色步骤 | 第20页 |
| 3.2.5 免疫组化结果判定方法 | 第20-21页 |
| 3.3 数据分析和统计学处理 | 第21页 |
| 3.4 结果 | 第21-25页 |
| 4. 蛋白印迹法检测大鼠肝硬化脾亢脾组织中M-CSF、TNF-β、IFN-γ和IL-10的表达 | 第25-33页 |
| 4.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 4.1.1 标本 | 第25页 |
| 4.1.2 主要试剂和仪器 | 第25页 |
| 4.1.3 主要试剂的配制 | 第25-28页 |
| 4.2 实验方法与步骤 | 第28-30页 |
| 4.2.1 蛋白样品制备 | 第28页 |
| 4.2.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第28-29页 |
| 4.2.3 SDS-PAGE电泳 | 第29页 |
| 4.2.4 转膜 | 第29页 |
| 4.2.5 免疫反应 | 第29-30页 |
| 4.2.6 化学发光、显影、定影 | 第30页 |
| 4.2.7 凝胶图像分析 | 第30页 |
| 4.3 统计学分析 | 第30页 |
| 4.4 结果 | 第30-33页 |
| 5. RT-PCR法检测大鼠肝硬化脾亢脾组织中M-CSF、TNF-β、IFN-γ和IL-10的表达 | 第33-37页 |
| 5.1 实验材料 | 第33页 |
| 5.1.1 标本 | 第33页 |
| 5.2 试验方法与步骤 | 第33-35页 |
| 5.2.1 总RNA提取 | 第33-34页 |
| 5.2.2 测定RNA的纯度 | 第34页 |
| 5.2.3 合成cDNA | 第34页 |
| 5.2.4 引物设计与合成 | 第34-35页 |
| 5.2.5 荧光定量PCR检测 | 第35页 |
| 5.3 数据处理 | 第35页 |
| 5.4 统计学分析 | 第35页 |
| 5.5 结果 | 第35-37页 |
| 6. 讨论 | 第37-41页 |
| 6.1 大鼠肝硬化脾亢模型的建立 | 第37-38页 |
| 6.2 大鼠肝硬化脾亢中M-CSF、TNF-β、IFN-γ和IL-10的表达与意义 | 第38-41页 |
| 7. 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 缩略语表 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
