| 项目资助 | 第6-7页 |
| ACKNOWLEDGEMENTS | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词 | 第12-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-35页 |
| 1.1 D.radiodurans与D geothermalis的特征比较 | 第15-20页 |
| 1.1.1 Deinococcus属菌形态特征 | 第15-17页 |
| 1.1.2 D.radiodurans与D.geothermalis的基因组结构 | 第17-19页 |
| 1.1.3 D.radiodurans与D.geothermalis的辐射抗性 | 第19-20页 |
| 1.2 耐辐射球菌的抗辐射机制 | 第20-27页 |
| 1.2.1 特定的染色体结构,多基因组拷贝 | 第21页 |
| 1.2.2 耐辐射异常球菌的抗氧化保护机制 | 第21-24页 |
| 1.2.3 耐辐射球菌的损伤修复机制 | 第24-27页 |
| 1.3 耐辐射奇球菌PprI蛋白的研究进展 | 第27-35页 |
| 1.3.0 PprI蛋白的发现和功能分析 | 第27-30页 |
| 1.3.1 PprI蛋白的结构和同源性分析 | 第30-33页 |
| 1.3.3 PprI酶活性的发现及对其他生物抗逆性的影响 | 第33-35页 |
| 第2章 dg0395基因的克隆和DG0395蛋白的纯化 | 第35-55页 |
| 2.1 引言 | 第35-37页 |
| 2.2 设备与材料 | 第37-38页 |
| 2.3 试验方法 | 第38-43页 |
| 2.3.1 D.geothermalis基因组的提取 | 第38-39页 |
| 2.3.2 dg0395基因的体外克隆 | 第39页 |
| 2.3.3 质粒的酶切与测序鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.4 DG0395表达质粒的构建 | 第40-41页 |
| 2.3.5 DG0395蛋白表达时IPTG浓度的筛选 | 第41页 |
| 2.3.6 DG0395蛋白的首次提取和纯化 | 第41-42页 |
| 2.3.7 pET28a(HMT)-DG0395表达质粒的构建 | 第42页 |
| 2.3.8 DG0395蛋白的再次提取和纯化 | 第42-43页 |
| 2.4 结果与分析 | 第43-53页 |
| 2.4.1 PCR结果验证 | 第43-44页 |
| 2.4.2 酶切验证 | 第44页 |
| 2.4.3 测序验证 | 第44-46页 |
| 2.4.4 dg0395基因连pET-28a后酶切验证 | 第46-47页 |
| 2.4.5 不同浓度IPTG诱导DG0395蛋白表达结果分析 | 第47-48页 |
| 2.4.6 DG0395蛋白首次纯化结果分析 | 第48-49页 |
| 2.4.7 DG0395-MBP融合蛋白镍柱和麦芽柱纯化结果分析 | 第49-51页 |
| 2.4.8 DG0395蛋白过镍柱纯化结果分析 | 第51-52页 |
| 2.4.9 DG0395蛋白过离子交换柱纯化结果分析 | 第52-53页 |
| 2.5 讨论 | 第53-55页 |
| 第3章 DG0395蛋白与PprI的体外活性研究与比较 | 第55-64页 |
| 3.1 引言 | 第55-56页 |
| 3.2 设备与材料 | 第56页 |
| 3.3 实验方法 | 第56-58页 |
| 3.3.1 PprI与DG0395蛋白的定量 | 第56-57页 |
| 3.3.2 DG0395蛋白酶切DdrO | 第57页 |
| 3.3.3 PprI与DG0395酶切最适温度比较 | 第57页 |
| 3.3.4 PprI与DG0395酶切最适PH比较 | 第57-58页 |
| 3.3.5 微型透析装置的制备 | 第58页 |
| 3.3.6 不同金属离子对PprI与DG0395的酶活性影响 | 第58页 |
| 3.4 结果与分析 | 第58-63页 |
| 3.4.1 蛋白浓度定量结果分析 | 第58-59页 |
| 3.4.2 PprI与DG0395酶切最适温度比较结果分析 | 第59-61页 |
| 3.4.3 PprI与DG0395酶切最适pH比较结果分析 | 第61-62页 |
| 3.4.4 不同金属离子对PprI与DG0395的酶活性影响结果分析 | 第62-63页 |
| 3.5 讨论 | 第63-64页 |
| 第4章 dg0395基因的体内功能研究 | 第64-71页 |
| 4.1 引言 | 第64页 |
| 4.2 设备和材料 | 第64-65页 |
| 4.3 方法 | 第65-66页 |
| 4.3.1 补偿株的构建 | 第65页 |
| 4.3.2 R1与pprI缺失突变株YR1及两补偿株的表型实验 | 第65-66页 |
| 4.3.3 R1,YR1,YR1-DG0395,YR1-pprI菌株生长曲线测定和温度敏感实验 | 第66页 |
| 4.4 结果分析 | 第66-69页 |
| 4.4.1 R1与PprI缺失突变株YR1及两补偿株的表型实验结果分析 | 第66-68页 |
| 4.4.2 R1,YR1,YR1-DG0395,YR1-PprI菌株生长速度和温度敏感实验结果分析 | 第68-69页 |
| 4.5 讨论 | 第69-71页 |
| 第5章 总结与展望 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
