| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| ·单股正链 RNA 病毒 5’/3’非编码区的结构与功能研究进展 | 第11-19页 |
| ·5’/3’NCR 含有的特征性序列/结构元件 | 第11-13页 |
| ·5’NCR 内高级结构与功能的关系 | 第13-15页 |
| ·3’NCR 内高级结构与功能的关系 | 第15-18页 |
| ·结语 | 第18-19页 |
| ·单股正链 RNA 病毒复制子的研究进展及应用现状 | 第19-24页 |
| ·单股正链 RNA 病毒复制子的构建和优化方法 | 第19-20页 |
| ·单股正链 RNA 病毒复制子的优势与不足 | 第20页 |
| ·单股正链 RNA 病毒复制子的应用 | 第20-23页 |
| ·结语 | 第23-24页 |
| 第二章 RHDV 基因组 5’/3’末端序列对报告基因表达的影响 | 第24-41页 |
| ·材料与方法 | 第24-33页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-33页 |
| ·结果 | 第33-40页 |
| ·目的片段的 PCR 扩增 | 第33-35页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第35-36页 |
| ·萤光发光计测定单顺反子体外翻译产物 | 第36-37页 |
| ·SDS-PAGE 电泳分析重组质粒体外翻译产物 | 第37-38页 |
| ·转染 BSR 细胞 | 第38-40页 |
| ·讨论 | 第40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第三章 携带萤火虫萤光素酶报告基因的 RHDV 复制子的构建与鉴定 | 第41-54页 |
| ·材料与方法 | 第41-47页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-47页 |
| ·结果 | 第47-53页 |
| ·pTVT-RHDV 的点突变 PCR 扩增 | 第47页 |
| ·pTVT-RHDV（ClaⅠ）的酶切鉴定 | 第47-48页 |
| ·分别扩增 LUC 以及 RHD 3D 目的片段 | 第48页 |
| ·融合 PCR 扩增 RHD 3D+LUC 目的片段 | 第48-49页 |
| ·pTVT-RHDV-LUC 复制子酶切鉴定 | 第49-50页 |
| ·pTVT-RHDV-LUC 复制子的萤火虫萤光素酶活性检测 | 第50页 |
| ·RHDV 复制子萤火虫萤光素酶活性的实时检测 | 第50-51页 |
| ·RT-PCR 检测 RHDV 复制子萤光素酶表达 | 第51页 |
| ·SDS-PAGE 方法检测 RHDV 复制子萤光素酶表达 | 第51-52页 |
| ·Western-blot 检测 RHDV 复制子萤光素酶表达 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| 第四章 RHDV 复制子突变体的构建与鉴定 | 第54-64页 |
| ·材料与方法 | 第54-58页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·方法 | 第55-58页 |
| ·结果 | 第58-63页 |
| ·pRHDV 点突变 PCR 扩增 | 第58页 |
| ·pRHDV(ClaⅠ ) 的酶切鉴定 | 第58-59页 |
| ·pRHDV-LUC 复制子的酶切鉴定 | 第59页 |
| ·扩增 5’末端序列的目的片段 | 第59-61页 |
| ·缺失 5’末端序列的突变体的酶切鉴定 | 第61-62页 |
| ·RHDV 复制子及其突变体萤火虫萤光素酶活性的实时检测 | 第62-63页 |
| ·讨论 | 第63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 作者简介 | 第72页 |
