| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩写词表 | 第6-11页 |
| 1 前言 | 第11-17页 |
| 1.1 香蕉果实采后冷害研究概况 | 第11-12页 |
| 1.2 JA的生物合成及其调控 | 第12-13页 |
| 1.3 JAZ蛋白 | 第13-14页 |
| 1.4 ERF转录因子的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.4.1 ERF转录因子的结构特征 | 第14-15页 |
| 1.4.2 ERF转录因子结合的顺式作用元件 | 第15-16页 |
| 1.4.3 ERF转录因子在植物逆境胁迫应答中的功能 | 第16-17页 |
| 1.5 研究的目的及意义 | 第17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-38页 |
| 2.1 供试材料 | 第17-18页 |
| 2.2 果实处理及取样方法 | 第18页 |
| 2.3 香蕉果实总RNA的提取及检测 | 第18-20页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第18-19页 |
| 2.3.2 总RNA浓度的测定及完整性检测 | 第19-20页 |
| 2.4 cDNA的合成 | 第20页 |
| 2.5 MaJAZs基因全长cDNA的克隆及检测 | 第20-22页 |
| 2.5.1 目的基因片段的获取与回收 | 第20-22页 |
| 2.5.2 与载体连接 | 第22页 |
| 2.5.3 转化 | 第22页 |
| 2.5.4 阳性克隆的鉴定 | 第22页 |
| 2.5.5 阳性克隆的测序 | 第22页 |
| 2.6 MaJAZ1-8 的氨基酸序列分析 | 第22页 |
| 2.7 实时荧光定量PCR (RT-qPCR) | 第22-23页 |
| 2.8 香蕉MaJAZ1-8 转录活性分析 | 第23-25页 |
| 2.8.1 酵母菌株 | 第23页 |
| 2.8.2 载体构建 | 第23-24页 |
| 2.8.3 酵母感受态细胞的制备及PEG\LiAc介导的质粒转化 | 第24-25页 |
| 2.8.4 a-半乳糖苷酶（a-galactosidase）活性检测 | 第25页 |
| 2.9 酵母双杂交 | 第25-26页 |
| 2.10 双分子荧光互补实验 | 第26-27页 |
| 2.11 亚细胞定位 | 第27-29页 |
| 2.12 MaERF10在香蕉果实冷害和MeJA诱导耐冷性过程中的表达特性 | 第29页 |
| 2.13 MaERF10启动子的活性分析 | 第29页 |
| 2.14 MaERF10与JA合成相关基因启动子的结合 | 第29-37页 |
| 2.14.1 JA合成相关基因的启动子克隆 | 第29-31页 |
| 2.14.2 MaERF10-GST融合蛋白的表达纯化 | 第31-32页 |
| 2.14.3 凝胶阻滞迁移实验 | 第32-36页 |
| 2.14.4 化学发光法检测生物素标记的探针 | 第36-37页 |
| 2.15 Dual-LUC瞬时表达分析 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-56页 |
| 3.1 MaJAZs序列分析 | 第38-40页 |
| 3.1.1 MaJAZ1-8 氨基酸序列基本特征 | 第38页 |
| 3.1.2 MaJAZ1-8 氨基酸序列的同源性分析 | 第38-39页 |
| 3.1.3 MaJAZ1-8 的氨基酸序列比对 | 第39-40页 |
| 3.2 香蕉果实MaJAZ1-8 基因的表达特性 | 第40-42页 |
| 3.2.1 MaJAZ1-8 基因荧光引物的筛选。 | 第40-41页 |
| 3.2.2 MeJA诱导香蕉果实耐冷性过程中MaJAZ1-8 基因的表达 | 第41-42页 |
| 3.3 MaJAZ1-8 在酵母体内的转录活性分析 | 第42-43页 |
| 3.4 MaJAZ1-8 与MaERF10的蛋白互作 | 第43-45页 |
| 3.4.1 酵母双杂交分析MaJAZ1-8 与MaERF10的蛋白互作 | 第43-44页 |
| 3.4.2 BiFC验证MaJAZ3与MaERF10的蛋白互作 | 第44-45页 |
| 3.5 亚细胞定位 | 第45-46页 |
| 3.6 MaERF10的表达特性 | 第46-48页 |
| 3.6.1 MaERF10基因荧光引物的筛选 | 第46-47页 |
| 3.6.2 MeJA诱导耐冷性过程中MaERF10基因的表达分析 | 第47-48页 |
| 3.7 MaEFF10启动子的活性分析 | 第48-49页 |
| 3.8 JA合成相关基因MaLOX7/8，MaAOC3和MaOPR4在MeJA诱导耐冷性过程中的表达特性 | 第49-51页 |
| 3.8.1 MaLOX7/LOX8，MaAOC3和MaOPR4基因荧光引物的筛选 | 第49-50页 |
| 3.8.2 MaLOX7/LOX8，MaAOC3和MaOPR4基因的表达 | 第50-51页 |
| 3.9 MaLOX7/8、MaAOC3和MaOPR4启动子的克隆及序列分析 | 第51-53页 |
| 3.9.1 MaLOX7/8、MaAOC3和MaOPR4启动子克隆 | 第51-52页 |
| 3.9.2 MaLOX7/8、MaAOC3和MaOPR4启动子序列的分析 | 第52-53页 |
| 3.10 凝胶阻滞迁移实验（EMSA）分析MaERF10与MaLOX7/8、MaAOC3和MaOPR4启动子的结合 | 第53-54页 |
| 3.11 Dual-LUC分析MaERF10对MaLOX7/LOX8及MaAOC3和MaOPR4启动子的结合 | 第54-55页 |
| 3.12 MaJAZ3蛋白对MaERF10抑制MaLOX7/LOX8及MaAOC3和MaOPR4启动子的影响 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 JA生物合成基因的表达与植物响应冷胁迫相关 | 第56-57页 |
| 4.2 MaERF10在调控香蕉冷害过程可能起到的作用 | 第57-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
