摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 前言 | 第12-22页 |
1.1 抗菌肽常见种类与生物学功能 | 第12-17页 |
1.1.1 Oncorhyncin II | 第13-14页 |
1.1.2 Buforins | 第14-15页 |
1.1.3 Abhisin | 第15-16页 |
1.1.4 Parasin I | 第16页 |
1.1.5 HLP-1 | 第16-17页 |
1.2 抗菌肽作用机制 | 第17-18页 |
1.3 抗菌肽的研究意义及在渔业上的应用 | 第18-19页 |
1.4 本研究目的和意义 | 第19-22页 |
第二章 淇河鲫组蛋白H2B基因克隆 | 第22-32页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2 试剂 | 第22页 |
2.3 引物 | 第22-23页 |
2.4 实验步骤 | 第23-26页 |
2.4.1 淇河鲫总RNA提取 | 第23页 |
2.4.2 琼脂糖凝胶电泳检测RNA | 第23-24页 |
2.4.3 淇河鲫组蛋白H2B基因全长克隆 | 第24-25页 |
2.4.4 淇河鲫组蛋白H2B基因 3¢UTR扩增和 5¢UTR扩增 | 第25-26页 |
2.5 实验结果 | 第26-30页 |
2.5.1 淇河鲫组织RNA提取 | 第26-27页 |
2.5.2 淇河鲫组蛋白H2B中间片段序列的扩增 | 第27页 |
2.5.3 淇河鲫组蛋白 3¢UTR和 5¢UTR序列扩增 | 第27-28页 |
2.5.4 淇河鲫组蛋白H2B序列特征分析 | 第28页 |
2.5.5 淇河鲫组蛋白H2B基因结构预测 | 第28-29页 |
2.5.6 组蛋白H2B ORF同源性分析及系统进化树构建 | 第29-30页 |
2.6 讨论 | 第30-32页 |
2.6.1 淇河鲫组蛋白H2B的结构特征及同源性分析 | 第30-32页 |
第三章 淇河鲫组蛋白H2B衍生肽HLP 1 的克隆、表达及活性分析 | 第32-42页 |
3.1 实验材料 | 第32页 |
3.2 引物 | 第32页 |
3.3 实验方法 | 第32-36页 |
3.3.1 重组表达质粒构建 | 第33页 |
3.3.2 连接产物转化大肠杆菌感受态BL21(DE3) | 第33-34页 |
3.3.3 阳性重组表达质粒筛选 | 第34页 |
3.3.4 重组表达载体的原核表达 | 第34-35页 |
3.3.5 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第35-36页 |
3.3.6 HLP 1 抑菌圈实验 | 第36页 |
3.4 结果分析 | 第36-39页 |
3.4.1 HLP 1 基因克隆及序列分析 | 第36-37页 |
3.4.2 HLP 1 多肽分析 | 第37-38页 |
3.4.3 PET-32a-HLP 1 重组载体在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第38-39页 |
3.4.4 HLP 1 的抑菌活性 | 第39页 |
3.5 讨论 | 第39-42页 |
第四章 嗜水气单胞菌刺激下组蛋白H2B及HLP 1 在不同器官组织中的表达变化 | 第42-50页 |
4.1 实验材料 | 第42页 |
4.2 实验方法 | 第42-43页 |
4.2.1 实施荧光定量PCR扩增效率测定 | 第42-43页 |
4.2.2 实时荧光定量PCR数据的处理与统计方法 | 第43页 |
4.3 实验结果 | 第43-47页 |
4.3.1 淇河鲫不同器官组织总RNA提取结果 | 第43-44页 |
4.3.2 淇河鲫组蛋白H2B及HLP 1 基因在不同器官组织中的表达 | 第44页 |
4.3.3 嗜水气单胞菌注射后淇河鲫H2B及HLP 1 基因的表达变化 | 第44-47页 |
4.4 讨论 | 第47-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
附录 | 第54-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
论文发表 | 第59-60页 |