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淇河鲫组蛋白H2B和HLP1的克隆、表达及抑菌分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略词表第11-12页
第一章 前言第12-22页
    1.1 抗菌肽常见种类与生物学功能第12-17页
        1.1.1 Oncorhyncin II第13-14页
        1.1.2 Buforins第14-15页
        1.1.3 Abhisin第15-16页
        1.1.4 Parasin I第16页
        1.1.5 HLP-1第16-17页
    1.2 抗菌肽作用机制第17-18页
    1.3 抗菌肽的研究意义及在渔业上的应用第18-19页
    1.4 本研究目的和意义第19-22页
第二章 淇河鲫组蛋白H2B基因克隆第22-32页
    2.1 实验材料第22页
    2.2 试剂第22页
    2.3 引物第22-23页
    2.4 实验步骤第23-26页
        2.4.1 淇河鲫总RNA提取第23页
        2.4.2 琼脂糖凝胶电泳检测RNA第23-24页
        2.4.3 淇河鲫组蛋白H2B基因全长克隆第24-25页
        2.4.4 淇河鲫组蛋白H2B基因 3¢UTR扩增和 5¢UTR扩增第25-26页
    2.5 实验结果第26-30页
        2.5.1 淇河鲫组织RNA提取第26-27页
        2.5.2 淇河鲫组蛋白H2B中间片段序列的扩增第27页
        2.5.3 淇河鲫组蛋白 3¢UTR和 5¢UTR序列扩增第27-28页
        2.5.4 淇河鲫组蛋白H2B序列特征分析第28页
        2.5.5 淇河鲫组蛋白H2B基因结构预测第28-29页
        2.5.6 组蛋白H2B ORF同源性分析及系统进化树构建第29-30页
    2.6 讨论第30-32页
        2.6.1 淇河鲫组蛋白H2B的结构特征及同源性分析第30-32页
第三章 淇河鲫组蛋白H2B衍生肽HLP 1 的克隆、表达及活性分析第32-42页
    3.1 实验材料第32页
    3.2 引物第32页
    3.3 实验方法第32-36页
        3.3.1 重组表达质粒构建第33页
        3.3.2 连接产物转化大肠杆菌感受态BL21(DE3)第33-34页
        3.3.3 阳性重组表达质粒筛选第34页
        3.3.4 重组表达载体的原核表达第34-35页
        3.3.5 SDS-PAGE凝胶电泳第35-36页
        3.3.6 HLP 1 抑菌圈实验第36页
    3.4 结果分析第36-39页
        3.4.1 HLP 1 基因克隆及序列分析第36-37页
        3.4.2 HLP 1 多肽分析第37-38页
        3.4.3 PET-32a-HLP 1 重组载体在BL21(DE3)中的诱导表达第38-39页
        3.4.4 HLP 1 的抑菌活性第39页
    3.5 讨论第39-42页
第四章 嗜水气单胞菌刺激下组蛋白H2B及HLP 1 在不同器官组织中的表达变化第42-50页
    4.1 实验材料第42页
    4.2 实验方法第42-43页
        4.2.1 实施荧光定量PCR扩增效率测定第42-43页
        4.2.2 实时荧光定量PCR数据的处理与统计方法第43页
    4.3 实验结果第43-47页
        4.3.1 淇河鲫不同器官组织总RNA提取结果第43-44页
        4.3.2 淇河鲫组蛋白H2B及HLP 1 基因在不同器官组织中的表达第44页
        4.3.3 嗜水气单胞菌注射后淇河鲫H2B及HLP 1 基因的表达变化第44-47页
    4.4 讨论第47-50页
参考文献第50-54页
附录第54-58页
致谢第58-59页
论文发表第59-60页

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