| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 降钙素原概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 降钙素原来源 | 第12页 |
| 1.1.2 降钙素原生物学功能 | 第12-13页 |
| 1.2 降钙素原检测的临床意义 | 第13-16页 |
| 1.2.1 败血症的辅助诊断、疗效监测 | 第13-14页 |
| 1.2.2 脓毒症的辅助诊断、疗效监测 | 第14页 |
| 1.2.3 细菌性和非细菌性炎症鉴别 | 第14-15页 |
| 1.2.4 其他相关疾病的辅助诊断、疗效评估 | 第15-16页 |
| 1.3 降钙素原检测方法 | 第16-18页 |
| 1.3.1 免疫比浊法 | 第16页 |
| 1.3.2 化学发光 | 第16-17页 |
| 1.3.3 胶体金 | 第17页 |
| 1.3.4 荧光层析 | 第17页 |
| 1.3.5 酶联免疫吸附实验 | 第17-18页 |
| 1.4 单克隆抗体制备技术发展 | 第18-20页 |
| 1.4.1 鼠源性单抗制备技术发展 | 第18-19页 |
| 1.4.2 嵌合抗体单抗制备技术发展 | 第19-20页 |
| 1.4.3 噬菌体抗体库单抗制备技术 | 第20页 |
| 1.4.4 转基因小鼠制备全人抗体 | 第20页 |
| 1.5 课题研究的意义及内容 | 第20-22页 |
| 1.5.1 课题研究意义 | 第20-21页 |
| 1.5.2 课题研究的主要内容 | 第21-22页 |
| 第二章 材料和方法 | 第22-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-30页 |
| 2.1.1 主要生物化学试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.2 主要缓冲液 | 第24-27页 |
| 2.1.3 主要实验设备 | 第27-28页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第28页 |
| 2.1.5 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.6 其他材料 | 第29-30页 |
| 2.2 试验方法 | 第30-35页 |
| 2.2.1 降钙素原单克隆抗体的制备 | 第30-35页 |
| 2.3 单克隆抗体标记及配对 | 第35页 |
| 2.3.1 抗体标记 | 第35页 |
| 2.3.2 抗体配对 | 第35页 |
| 2.4 降钙素原定量检测方法的建立 | 第35-37页 |
| 2.4.1 初步反应模式的确定 | 第35-36页 |
| 2.4.2 包被液及包被条件选择 | 第36页 |
| 2.4.3 封闭液及封闭条件的选择 | 第36页 |
| 2.4.4 包被抗体和酶标抗体最佳工作浓度的确定 | 第36页 |
| 2.4.5 反应模式的确定 | 第36-37页 |
| 2.4.6 线性范围初步研究 | 第37页 |
| 2.4.7 批内精密性实验 | 第37页 |
| 2.4.8 回收率考察 | 第37页 |
| 2.4.9 稳定性实验 | 第37页 |
| 2.5 实验室临床标本检测 | 第37-39页 |
| 2.5.1 灵敏度及特异性检测实验 | 第37-38页 |
| 2.5.2 干扰因素检测实验 | 第38页 |
| 2.5.3 临床标本检测实验 | 第38-39页 |
| 第三章 结果和分析 | 第39-50页 |
| 3.1 单抗制备 | 第39-42页 |
| 3.1.1 抗原免疫结果 | 第39页 |
| 3.1.2 间接ELISA检测方法的建立 | 第39页 |
| 3.1.3 细胞融合结果 | 第39-40页 |
| 3.1.4 染色体鉴定结果 | 第40页 |
| 3.1.5 单抗亚型测定结果 | 第40页 |
| 3.1.6 细胞株稳定性测定 | 第40-41页 |
| 3.1.7 腹水制备结果效价测定 | 第41页 |
| 3.1.8 腹水蛋白浓度及SDS-PAGE电泳鉴定结果 | 第41-42页 |
| 3.2 降钙素原单抗的配对实验结果 | 第42页 |
| 3.3 降钙素原定量检测方法的建立 | 第42-47页 |
| 3.3.1 包被液及包被条件选择 | 第42-43页 |
| 3.3.2 封闭液及封闭条件选择 | 第43-44页 |
| 3.3.3 最佳抗体包被浓度和酶标浓度的确定 | 第44-45页 |
| 3.3.4 反应时间的确定 | 第45页 |
| 3.3.5 线性范围的初步确定 | 第45页 |
| 3.3.6 批内精密性 | 第45-46页 |
| 3.3.7 回收率 | 第46页 |
| 3.3.8 稳定性 | 第46-47页 |
| 3.4 实验室临床标本检测 | 第47-50页 |
| 3.4.1 灵敏度及特异性 | 第47页 |
| 3.4.2 干扰因素检测 | 第47-49页 |
| 3.4.3 临床实验 | 第49-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-52页 |
| 4.1 单抗制备方法的选择 | 第50页 |
| 4.2 试剂盒研究 | 第50-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |