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肌氨酸氧化酶高效表达、亲和纯化及酶稳定性研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
中英文缩略词第10-11页
第一章 绪论第11-23页
    1.1 肌氨酸氧化酶概述第11-13页
        1.1.1 SOX的结构第11-12页
        1.1.2 SOX的催化机制第12-13页
    1.2 SOX产生菌及工程菌概况第13-15页
        1.2.1 SOX产生菌种的筛选第13-14页
        1.2.2 SOX基因工程菌的构建第14页
        1.2.3 生物合成法构建工程菌第14-15页
    1.3 酶蛋白稳定性主要关联因素第15-17页
        1.3.1 酶分子内部结构的影响第15-16页
        1.3.2 外界干扰因子的影响第16页
        1.3.3 SOX的稳定性第16-17页
    1.4 提升酶稳定性的相关方法第17-19页
        1.4.1 基因工程改造第17页
        1.4.2 固定化技术第17-18页
        1.4.3 添加保护剂第18页
        1.4.4 酶的化学修饰第18-19页
    1.5 立题依据及主要研究内容第19-23页
        1.5.1 立题依据第19-20页
        1.5.2 主要研究内容第20-23页
第二章 Bacillus sp. SOX基因序列优化、表达与发酵调控提高产酶的研究第23-39页
    2.1 引言第23页
    2.2 材料与方法第23-28页
        2.2.1 实验材料第23-24页
        2.2.2 培养基第24-25页
        2.2.3 实验方法第25-28页
    2.3 结果与讨论第28-37页
        2.3.1 Bacillus sp. SOX基因序列的优化设计第28-31页
        2.3.2 BsSOX合成序列在E. coli中表达验证第31-33页
        2.3.3 诱导条件对BsSOX表达的影响第33-34页
        2.3.4 不同pH控制下BsSOX的发酵过程变化及动力学分析第34-36页
        2.3.5 双阶段温度-pH调控技术提高SOX产率技术的建立第36-37页
    2.4 本章小结第37-39页
第三章 SOX亲和介质合成、亲和纯化及酶学性质研究第39-51页
    3.1 引言第39页
    3.2 材料与方法第39-42页
        3.2.1 实验材料第39-40页
        3.2.2 培养基第40页
        3.2.3 实验方法第40-42页
    3.3 结果与讨论第42-49页
        3.3.1 亲和介质的合成、筛选及鉴定第42-45页
        3.3.2 亲和介质与SOX的静态吸附及SOX简易纯化方法的建立第45-46页
        3.3.3 BsSOX酶学性质分析第46-49页
    3.4 本章小结第49-51页
第四章 表面修饰提高Bacillus sp. SOX稳定性研究第51-65页
    4.1 引言第51页
    4.2 材料与方法第51-54页
        4.2.1 实验材料第51-52页
        4.2.2 培养基第52页
        4.2.3 实验方法第52-54页
    4.3 结果与讨论第54-63页
        4.3.1 BsSOX热不稳定机理研究第54-56页
        4.3.2 poly-Lysine表面修饰BsSOX反应条件的研究第56-59页
        4.3.3 修饰酶的理化性质与热力学参数分析第59-61页
        4.3.4 修饰酶与游离酶的稳定性比较第61-63页
    4.4 本章小结第63-65页
第五章 Thermomicrobium roseum SOX序列优化、伴侣蛋白共表达及其耐热机制诠第65-81页
    5.1 引言第65页
    5.2 材料与方法第65-67页
        5.2.1 实验材料第65-66页
        5.2.2 培养基第66页
        5.2.3 实验方法第66-67页
    5.3 结果与讨论第67-78页
        5.3.1 Thermomicrobium roseum SOX基因序列的设计优化第67-71页
        5.3.2 TrSOX合成序列在E. coli中表达的验证第71-72页
        5.3.3 伴侣蛋白共表达增强TrSOX可溶性表达第72-75页
        5.3.4 TrSOX热稳定性机制的诠释第75-78页
    5.4 本章小结第78-81页
主要结论与展望第81-83页
论文创新点第83-84页
致谢第84-85页
参考文献第85-93页
附录 1:论文中所用氨基酸序列及标准曲线第93-96页
附录 2:作者攻读博士学位期间发表的论文第96页

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