摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
中英文缩略词 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-23页 |
1.1 肌氨酸氧化酶概述 | 第11-13页 |
1.1.1 SOX的结构 | 第11-12页 |
1.1.2 SOX的催化机制 | 第12-13页 |
1.2 SOX产生菌及工程菌概况 | 第13-15页 |
1.2.1 SOX产生菌种的筛选 | 第13-14页 |
1.2.2 SOX基因工程菌的构建 | 第14页 |
1.2.3 生物合成法构建工程菌 | 第14-15页 |
1.3 酶蛋白稳定性主要关联因素 | 第15-17页 |
1.3.1 酶分子内部结构的影响 | 第15-16页 |
1.3.2 外界干扰因子的影响 | 第16页 |
1.3.3 SOX的稳定性 | 第16-17页 |
1.4 提升酶稳定性的相关方法 | 第17-19页 |
1.4.1 基因工程改造 | 第17页 |
1.4.2 固定化技术 | 第17-18页 |
1.4.3 添加保护剂 | 第18页 |
1.4.4 酶的化学修饰 | 第18-19页 |
1.5 立题依据及主要研究内容 | 第19-23页 |
1.5.1 立题依据 | 第19-20页 |
1.5.2 主要研究内容 | 第20-23页 |
第二章 Bacillus sp. SOX基因序列优化、表达与发酵调控提高产酶的研究 | 第23-39页 |
2.1 引言 | 第23页 |
2.2 材料与方法 | 第23-28页 |
2.2.1 实验材料 | 第23-24页 |
2.2.2 培养基 | 第24-25页 |
2.2.3 实验方法 | 第25-28页 |
2.3 结果与讨论 | 第28-37页 |
2.3.1 Bacillus sp. SOX基因序列的优化设计 | 第28-31页 |
2.3.2 BsSOX合成序列在E. coli中表达验证 | 第31-33页 |
2.3.3 诱导条件对BsSOX表达的影响 | 第33-34页 |
2.3.4 不同pH控制下BsSOX的发酵过程变化及动力学分析 | 第34-36页 |
2.3.5 双阶段温度-pH调控技术提高SOX产率技术的建立 | 第36-37页 |
2.4 本章小结 | 第37-39页 |
第三章 SOX亲和介质合成、亲和纯化及酶学性质研究 | 第39-51页 |
3.1 引言 | 第39页 |
3.2 材料与方法 | 第39-42页 |
3.2.1 实验材料 | 第39-40页 |
3.2.2 培养基 | 第40页 |
3.2.3 实验方法 | 第40-42页 |
3.3 结果与讨论 | 第42-49页 |
3.3.1 亲和介质的合成、筛选及鉴定 | 第42-45页 |
3.3.2 亲和介质与SOX的静态吸附及SOX简易纯化方法的建立 | 第45-46页 |
3.3.3 BsSOX酶学性质分析 | 第46-49页 |
3.4 本章小结 | 第49-51页 |
第四章 表面修饰提高Bacillus sp. SOX稳定性研究 | 第51-65页 |
4.1 引言 | 第51页 |
4.2 材料与方法 | 第51-54页 |
4.2.1 实验材料 | 第51-52页 |
4.2.2 培养基 | 第52页 |
4.2.3 实验方法 | 第52-54页 |
4.3 结果与讨论 | 第54-63页 |
4.3.1 BsSOX热不稳定机理研究 | 第54-56页 |
4.3.2 poly-Lysine表面修饰BsSOX反应条件的研究 | 第56-59页 |
4.3.3 修饰酶的理化性质与热力学参数分析 | 第59-61页 |
4.3.4 修饰酶与游离酶的稳定性比较 | 第61-63页 |
4.4 本章小结 | 第63-65页 |
第五章 Thermomicrobium roseum SOX序列优化、伴侣蛋白共表达及其耐热机制诠 | 第65-81页 |
5.1 引言 | 第65页 |
5.2 材料与方法 | 第65-67页 |
5.2.1 实验材料 | 第65-66页 |
5.2.2 培养基 | 第66页 |
5.2.3 实验方法 | 第66-67页 |
5.3 结果与讨论 | 第67-78页 |
5.3.1 Thermomicrobium roseum SOX基因序列的设计优化 | 第67-71页 |
5.3.2 TrSOX合成序列在E. coli中表达的验证 | 第71-72页 |
5.3.3 伴侣蛋白共表达增强TrSOX可溶性表达 | 第72-75页 |
5.3.4 TrSOX热稳定性机制的诠释 | 第75-78页 |
5.4 本章小结 | 第78-81页 |
主要结论与展望 | 第81-83页 |
论文创新点 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-93页 |
附录 1:论文中所用氨基酸序列及标准曲线 | 第93-96页 |
附录 2:作者攻读博士学位期间发表的论文 | 第96页 |