| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第１章 引言 | 第11-13页 |
| 1.1 4E-BP1国内外研究进展 | 第11页 |
| 1.2 立项依据 | 第11-13页 |
| 第２章 4E-BP1在电离辐射所致细胞DNA损伤反应中的作用研究 | 第13-57页 |
| 2.1 材料与方法 | 第13-35页 |
| 2.1.1 材料 | 第13-16页 |
| 2.1.1.1 细胞 | 第13-14页 |
| 2.1.1.2 抗体 | 第14页 |
| 2.1.1.3 试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.1.4 质粒与菌株 | 第15页 |
| 2.1.1.5 仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.2 方法 | 第16-35页 |
| 2.1.2.1 ~(60)Coγ 射线照射 | 第16页 |
| 2.1.2.2 流式细胞术检测细胞周期 | 第16-17页 |
| 2.1.2.3 TdR（Thymidine）双阻断同步化细胞周期于G1/S期边界 | 第17页 |
| 2.1.2.4 Nocodazole同步化细胞于有丝分裂前中期 | 第17-18页 |
| 2.1.2.5 pH3 Ser10（间接免疫荧光法）测定有丝分裂指数 | 第18页 |
| 2.1.2.6 单细胞凝胶电泳实验(彗星实验) | 第18-20页 |
| 2.1.2.7 脉冲电场凝胶电泳 | 第20-21页 |
| 2.1.2.8 总RNA的提取 | 第21页 |
| 2.1.2.9 cDNA的逆转录合成 | 第21-22页 |
| 2.1.2.10 实时定量PCR | 第22-23页 |
| 2.1.2.11 Western blotting检测蛋白含量表达水平 | 第23-28页 |
| 2.1.2.12 细胞接种克隆形成实验 | 第28-29页 |
| 2.1.2.13 4E-BP1 shRNA干扰质pSicoR-Pruo-4E-BP1的构建 | 第29-31页 |
| 2.1.2.14 保菌和质粒的提取 | 第31-32页 |
| 2.1.2.15 慢病毒表达系统-脂质体转染法构建 4E-BP1稳定敲低细胞系 | 第32-34页 |
| 2.1.2.16 使用放线菌酮CHX来检测 4E-BP1蛋白的降解速率（蛋白稳定性） | 第34页 |
| 2.1.2.17 统计学分析 | 第34-35页 |
| 2.2 结果 | 第35-55页 |
| 2.2.1.~(60)Co γ 射线照射诱导T37/46位点 4E-BP1磷酸化蛋白的表达 | 第35-36页 |
| 2.2.2.T37/46位点 4E-BP1磷酸化蛋白受到~(60)Co γ 射线的诱导表达与细胞周期相关性 | 第36-38页 |
| 2.2.3.4E-BP1稳定敲低细胞系的构建 | 第38-39页 |
| 2.2.4. 敲低 4E-BP1对细胞生长的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.5. 敲低 4E-BP1后对细胞辐射敏感性的影响 | 第40-41页 |
| 2.2.6.4E-BP1的低表达会引起细胞更快的退出~(60)Co γ 射线诱发细胞发生G2/M期阻滞 | 第41-47页 |
| 2.2.7. 敲低 4E-BP1后对纺锤体结构检查点的影响 | 第47-48页 |
| 2.2.8. 敲低 4E-BP1对DNA损伤反应修复的影响 | 第48-51页 |
| 2.2.9.PI3K家族信号通路抑制剂对放射损伤诱发HepG2细胞中4E-BP1蛋白表达的影响 | 第51-55页 |
| 2.3 讨论 | 第55-57页 |
| 第3章 结论 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 附录 | 第61-65页 |
| 附录1 质粒列表 | 第61页 |
| 附录2 实时定量PCR引物列表 | 第61-62页 |
| 附录3 载体图谱 | 第62-63页 |
| 附录4 主要中英文缩略表 | 第63-65页 |
| 综述：4E-BP1的研究进展 | 第65-77页 |
| 参考文献 | 第73-77页 |
| 在学期间文章发表情况 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
