产肠毒素大肠杆菌菌影疫苗的制备及其免疫效果的评价
| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-17页 |
| 1.1 犊牛腹泻概述 | 第11页 |
| 1.2 产肠毒素大肠杆菌研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2.1 产肠毒素大肠杆菌概述 | 第11-12页 |
| 1.2.2 ETEC的致病机制 | 第12页 |
| 1.2.3 ETEC疫苗的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 细菌菌影的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 细菌菌影的形成机理及制备技术 | 第13-15页 |
| 1.3.2 菌影作为疫苗候选株 | 第15页 |
| 1.3.3 菌影作为载体的研究 | 第15-16页 |
| 1.3.4 菌影作为佐剂的研究 | 第16页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 菌种及质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-26页 |
| 2.2.1 大肠杆菌的分离鉴定 | 第18页 |
| 2.2.2 大肠杆菌毒力因子的检测 | 第18-19页 |
| 2.2.3 溶菌质粒p BV220-E的构建 | 第19-22页 |
| 2.2.4 产肠毒素大肠杆菌菌影的制备 | 第22-24页 |
| 2.2.5 免疫及攻毒 | 第24-26页 |
| 3 实验结果 | 第26-37页 |
| 3.1 大肠杆菌的鉴定结果 | 第26页 |
| 3.2 大肠杆菌毒力因子的检测结果 | 第26-31页 |
| 3.3 目的基因的克隆及鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3.1 裂解基因E的鉴定 | 第31页 |
| 3.3.2 克隆质粒p MD18T-E的鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3.3 溶菌质粒p BV220-E的鉴定 | 第32页 |
| 3.4 电转化重组菌株的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.5 诱导后细菌的生长曲线 | 第33页 |
| 3.6 裂解率的计算结果 | 第33-34页 |
| 3.7 疫苗的安全性检验结果 | 第34页 |
| 3.8 LD50的确定 | 第34-35页 |
| 3.9 血清特异性抗体的动态变化 | 第35-36页 |
| 3.10 攻毒后的保护情况 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 4.1 ETEC菌影疫苗预防犊牛腹泻的前景 | 第37页 |
| 4.2 菌影疫苗候选菌株的筛选 | 第37-38页 |
| 4.3 溶菌质粒的溶菌效果 | 第38页 |
| 4.4 ETEC菌影疫苗的免疫效果评价 | 第38-40页 |
| 5 结论 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 附录 英文缩略表 | 第50-51页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第51页 |
