附件 | 第3-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-28页 |
1.1 热应激对肉鸡的影响 | 第14-17页 |
1.1.1 热应激对肉鸡生产性能的影响 | 第14-15页 |
1.1.2 热应激对肉鸡神经内分泌机能的影响 | 第15页 |
1.1.3 热应激对肉鸡免疫机能的影响 | 第15-16页 |
1.1.4 热应激对肉鸡血液生化指标的影响 | 第16页 |
1.1.5 热应激对肉鸡物质代谢的影响 | 第16-17页 |
1.1.6 热应激对肉鸡氧化应激、细胞增殖和细胞调亡的影响 | 第17页 |
1.2 热应激分子机制研究进展 | 第17-20页 |
1.2.1 热休克蛋白研究进展 | 第17页 |
1.2.2 热应激系统生物学研究进展 | 第17-20页 |
1.3 蛋白质组学研究进展 | 第20-25页 |
1.3.1 蛋白质组学的概论 | 第20-21页 |
1.3.2 蛋白质组学的工作流程 | 第21页 |
1.3.3 蛋白质组学中多肽鉴定及谱库解析研究进展 | 第21-22页 |
1.3.4 定量蛋白质组学研究进展 | 第22-25页 |
1.4 代谢组学研究进展 | 第25-26页 |
1.4.1 代谢组学的概论 | 第25-26页 |
1.4.2 代谢组学研究方法 | 第26页 |
1.5 本研究目的和意义 | 第26-28页 |
第二章 肉鸡热应激模型构建 | 第28-36页 |
2.1 材料与方法 | 第28-31页 |
2.1.1 试验设计及操作 | 第28页 |
2.1.2 试验日粮 | 第28-29页 |
2.1.3 饲养管理 | 第29-30页 |
2.1.4 取样方法及指标测定 | 第30-31页 |
2.1.5 数据处理与统计分析 | 第31页 |
2.2 结果与分析 | 第31-33页 |
2.2.1 热应激对肉鸡体核温度及健康状况的影响 | 第31-32页 |
2.2.2 热应激对肉鸡生产性能的影响 | 第32页 |
2.2.3 热应激对肉鸡血液生化指标的影响 | 第32-33页 |
2.3 讨论 | 第33-34页 |
2.3.1 体温及健康状况 | 第33页 |
2.3.2 生产性能 | 第33-34页 |
2.3.3 血液生化指标 | 第34页 |
2.4 小结 | 第34-36页 |
第三章 基于质谱的肉鸡肝脏蛋白质组鉴定方法研究 | 第36-51页 |
3.1 材料与方法 | 第36-39页 |
3.1.1 试验材料 | 第36-37页 |
3.1.2 蛋白质提取和酶切方法 | 第37-38页 |
3.1.3 鸡肝蛋白质组分析 | 第38页 |
3.1.4 数据处理与统计分析 | 第38-39页 |
3.2 结果与分析 | 第39-49页 |
3.2.1 鸡肝蛋白提取效果 | 第39-40页 |
3.2.2 鸡肝蛋白质的质谱分析 | 第40-43页 |
3.2.3 液相条件的优化 | 第43-46页 |
3.2.4 质谱方法的优化 | 第46-48页 |
3.2.5 鸡肝蛋白的通路分析 | 第48-49页 |
3.2.6 鸡肝蛋白的翻译后修饰分析 | 第49页 |
3.3 讨论 | 第49-50页 |
3.4 小结 | 第50-51页 |
第四章 非标定量技术解析肉鸡肝蛋白的热应激响应机制 | 第51-72页 |
4.1 材料与方法 | 第52-55页 |
4.1.1 试验材料与试验设计 | 第52-53页 |
4.1.2 蛋白质提取和消化 | 第53页 |
4.1.3 SWATH-MS分析和目标数据提取 | 第53-54页 |
4.1.4 MRM验证试验 | 第54页 |
4.1.5 Western Blotting验证试验 | 第54-55页 |
4.1.6 数据统计和GO分析 | 第55页 |
4.2 结果与分析 | 第55-65页 |
4.2.1 样品和实验流程具有较好的生物可重复性 | 第55页 |
4.2.2 SWATH策略蛋白质定量通量高、可重复性高 | 第55-56页 |
4.2.3 肉鸡肝脏热应激差异表达蛋白鉴定结果 | 第56-59页 |
4.2.4 肉鸡热应激差异表达蛋白差异蛋白的GO功能分析 | 第59-62页 |
4.2.5 肉鸡热应激差异表达蛋白的KEGG代谢通路分析 | 第62-63页 |
4.2.6 MRM部分差异蛋白质的表达水平 | 第63页 |
4.2.7 Western Blotting验证部份差异蛋白质的表达水平 | 第63-65页 |
4.3 讨论 | 第65-70页 |
4.3.1 肉鸡热应激肝蛋白质组数据的重复性和可靠性分析 | 第65页 |
4.3.2 肉鸡肝脏差异表达蛋白质的生物学功能鉴定 | 第65-66页 |
4.3.3 热应激通过抑制的ERK1/2 信号路径调节细胞存活 | 第66-68页 |
4.3.4 热应激影响肉鸡肝脏脂类代谢和氨基酸代谢 | 第68-70页 |
4.3.5 热应激诱导肝细胞炎症反应和免疫应答 | 第70页 |
4.4 小结 | 第70-72页 |
第五章 基于代谢组学的肉仔鸡热应激分子机制研究 | 第72-79页 |
5.1 材料与方法 | 第72-73页 |
5.1.1 试验材料与试验设计 | 第72-73页 |
5.1.2 样品制备方法 | 第73页 |
5.1.3 LC-MS/MS代谢组学分析与数据采集 | 第73页 |
5.1.4 数据处理与统计分析 | 第73页 |
5.2 结果与分析 | 第73-77页 |
5.2.1 热应激组与对照组离子流图 | 第73-75页 |
5.2.2 多维统计分析 | 第75-76页 |
5.2.3 潜在生物标记物 | 第76-77页 |
5.3 讨论 | 第77-78页 |
5.3.1 粪便上清代谢组学可能成为环境应激早期预警非损伤性评价手段 | 第77-78页 |
5.3.2 肉鸡热应激差异代谢物分析 | 第78页 |
5.4 小结 | 第78-79页 |
第六章 全文结论 | 第79-81页 |
6.1 主要结论 | 第79页 |
6.2 主要创新点 | 第79-80页 |
6.3 待进一步研究的问题 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-98页 |
附录 | 第98-130页 |
附表1 MRM分析中所用的肽段和离子对列表 | 第98-102页 |
附表2 热应激下257个鸡肝差异蛋白GO分析列表 | 第102-130页 |
致谢 | 第130-131页 |
作者简历 | 第131页 |
博士阶段的相关论文及成果 | 第131-132页 |