| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 前言 | 第9-30页 |
| 一 流感病毒简介 | 第9-10页 |
| 二 流感病毒基因组结构与功能 | 第10-11页 |
| 三 流感病毒蛋白结构与功能 | 第11-14页 |
| 四 流感病毒的复制周期 | 第14-16页 |
| 五 流感病毒的遗传变异 | 第16-17页 |
| 六 流感病毒的危害 | 第17-18页 |
| 七 流感的治疗 | 第18-21页 |
| 八 反向遗传学技术在流感研究中的应用 | 第21-24页 |
| 九 针对HA茎部的广谱疫苗、中和抗体的制备及筛选 | 第24-27页 |
| 十 流感病毒中和抗体检测方法研究进展 | 第27-29页 |
| 十一 小结 | 第29-30页 |
| 论文实验技术路线 | 第30-31页 |
| 第一章 头茎互换荧光流感病毒拯救 | 第31-68页 |
| 1.1 实验材料 | 第31-34页 |
| 1.2 实验方法 | 第34-53页 |
| 1.2.1 pM-HA重组质粒构建策略 | 第34-38页 |
| 1.2.2 "7+1"策略拯救野生型HA重组流感病毒 | 第38-42页 |
| 1.2.3 pM-HA头茎互换重组质粒构建策略 | 第42-48页 |
| 1.2.4 "7+1"策略拯救携带荧光素酶报告基因的头茎互换流感病毒 | 第48页 |
| 1.2.5 病毒滴定 | 第48-50页 |
| 1.2.6 Western Blot实验验证HA蛋白表达情况 | 第50-53页 |
| 1.3 实验结果 | 第53-65页 |
| 1.3.1 不同亚型野生型HA质粒构建 | 第53-56页 |
| 1.3.2 不同亚型野生型HA流感病毒拯救 | 第56-57页 |
| 1.3.3 不同亚型头茎互换HA质粒构建 | 第57-60页 |
| 1.3.4 不同亚型头茎互换HA荧光流感病毒拯救 | 第60-63页 |
| 1.3.5 病毒扩增与纯化 | 第63-64页 |
| 1.3.6 头茎互换荧光病毒毒力 | 第64-65页 |
| 1.4 小结 | 第65-66页 |
| 1.5 讨论 | 第66-68页 |
| 第二章 不同亚型HA头茎互换荧光流感病毒在广谱抗流感中和抗体检测中的应用 | 第68-85页 |
| 2.1 实验材料 | 第68-70页 |
| 2.2 实验方法 | 第70-75页 |
| 2.2.1 小鼠标准血清制备 | 第71-73页 |
| 2.2.2 荧光病毒TCID50测定 | 第73-74页 |
| 2.2.3 头茎互换荧光流感病毒微量中和实验 | 第74-75页 |
| 2.3 实验结果 | 第75-83页 |
| 2.3.1 小鼠标准血清制备 | 第75-76页 |
| 2.3.2 荧光病毒微量中和实验方法探索与改进 | 第76页 |
| 2.3.3 荧光病毒TCID50测定 | 第76-77页 |
| 2.3.4 基于荧光素酶的荧光流感病毒检测HA茎部中和抗体 | 第77-79页 |
| 2.3.5 利用头茎互换荧光流感病毒检测血清茎部抗体的存在 | 第79-83页 |
| 2.4 小结 | 第83-84页 |
| 2.5 讨论 | 第84-85页 |
| 第三章 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-98页 |
| 附录 | 第98-112页 |
| 附录1 材料及试剂溶液配制 | 第98-99页 |
| 附录2 高效TOP10大肠杆菌感受态制备 | 第99页 |
| 附录3 分子克隆常用技术 | 第99-102页 |
| 附录4 获得的不同亚型头茎互换HA基因序列 | 第102-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 待发表的学术论文 | 第113页 |
