| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 前言 | 第10-19页 |
| 参考文献 | 第14-19页 |
| 第一部分 PLAC8在肾透明细胞癌组织中的表达 | 第19-33页 |
| 1 材料与方法 | 第19-25页 |
| 1.1 材料 | 第19-21页 |
| 1.2 方法 | 第21-25页 |
| 2 实验结果 | 第25-28页 |
| 2.1 Real-Time PCR结果显示PLAC8 mRNA在肾透明细胞癌组织中表达明显升高 | 第25-26页 |
| 2.2 TCGA数据库分析 | 第26-27页 |
| 2.3 免疫组化分析PLAC8蛋白在肾透明细胞癌中的表达 | 第27-28页 |
| 3 讨论 | 第28-30页 |
| 4 结论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-33页 |
| 第二部分 肾透明细胞癌患者癌组织中PLAC8高表达在临床中的意义 | 第33-43页 |
| 1 实验材料 | 第33-34页 |
| 2 统计学方法 | 第34页 |
| 3 实验结果 | 第34-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 第三部分 PLAC8在肾透明细胞癌细胞生物学行为中的作用 | 第43-69页 |
| 1 实验材料 | 第44-48页 |
| 1.1 一般材料 | 第44页 |
| 1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 1.3 主要仪器 | 第45-46页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第46-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-55页 |
| 2.1 细胞培养方法 | 第48页 |
| 2.2 siRNA序列的设计与合成 | 第48-49页 |
| 2.3 引物的设计与合成 | 第49页 |
| 2.4 siRNA转染主要步骤 | 第49-50页 |
| 2.5 细胞RNA提取主要步骤 | 第50-51页 |
| 2.6 RNA逆转录为cDNA步骤 | 第51页 |
| 2.7 实时定量聚合酶链反应（Real-Time PCR） | 第51-52页 |
| 2.8 蛋白免疫印迹（Western blotting） | 第52-54页 |
| 2.9 CCK-8 实验 | 第54页 |
| 2.10 transwell法检测细胞迁移、侵袭能力 | 第54页 |
| 2.11 EDU法检测细胞增殖能力 | 第54-55页 |
| 2.12 RNA-seq分析PLAC8生物信息学通路及调控靶基因 | 第55页 |
| 2.13 化疗药物顺铂对肾透明细胞癌的治疗效果 | 第55页 |
| 2.14 统计学方法 | 第55页 |
| 3 结果 | 第55-64页 |
| 3.1 PLAC8在五钟肾细胞癌细胞株中呈高表达水平 | 第55-56页 |
| 3.2 肾癌细胞株siRNA转染模型建立 | 第56-58页 |
| 3.3 引物序列和PLAC8 siRNA序列 | 第58-59页 |
| 3.4 PLAC8沉默抑制肾癌细胞体外的增殖和生长 | 第59-62页 |
| 3.5 减少PLAC8表达后抑制肾透明细胞癌细胞体外的侵袭性 | 第62-63页 |
| 3.6 PLAC8沉默增强肾透明细胞癌细胞体外的对化疗药的疗效 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 5 结论 | 第66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 第四部分 PLAC8对肾透明细胞癌细胞生物学行为作用的可能机制研究 | 第69-91页 |
| 1 实验材料 | 第69页 |
| 2 实验方法 | 第69-76页 |
| 2.1 siRNA转染主要步骤 | 第69-70页 |
| 2.2 细胞RNA提取主要步骤 | 第70-71页 |
| 2.3 委托深圳华大行RNA-seq | 第71-72页 |
| 2.4 信息分析流程 | 第72-73页 |
| 2.5 数据过滤 | 第73页 |
| 2.6 数据比对 | 第73-74页 |
| 2.7 基因定量 | 第74页 |
| 2.8 差异基因筛选：泊松分布方法 | 第74-75页 |
| 2.9 GO分析 | 第75-76页 |
| 2.10 Pathway分析 | 第76页 |
| 3 结果 | 第76-86页 |
| 3.1 通过RNA seq分析我们得出多种基因可能参调控PLAC8的表达。 | 第76-81页 |
| 3.2 Gene Ontology (GO) 和KEGG通路富集分析 | 第81-86页 |
| 4 讨论 | 第86-88页 |
| 5 结论 | 第88页 |
| 参考文献 | 第88-91页 |
| 全文小结 | 第91-93页 |
| 综述 | 第93-97页 |
| 参考文献 | 第95-97页 |
| 英文缩略词 | 第97-98页 |
| 博士期间科研活动和成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
