| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第9-24页 |
| 1.1 IDO1的一般生物学特征 | 第9-14页 |
| 1.1.1 IDO1蛋白 | 第9页 |
| 1.1.2 IDO1与犬尿氨酸途径（KP） | 第9-10页 |
| 1.1.3 其他催化色氨酸分解代谢的双加氧酶 | 第10-11页 |
| 1.1.4 表达IDO1的组织和细胞 | 第11-12页 |
| 1.1.5 影响IDO1基因表达的因素 | 第12页 |
| 1.1.6 IDO1蛋白的结构特征及催化反应机制 | 第12-14页 |
| 1.2 IDO1与免疫调控 | 第14-20页 |
| 1.3 IDO1与肿瘤免疫治疗 | 第20页 |
| 1.4 IDO1抑制剂 | 第20-22页 |
| 1.5 课题研究意义 | 第22-24页 |
| 第二章 实验设计与材料 | 第24-25页 |
| 2.1 实验设计 | 第24页 |
| 2.2 实验材料 | 第24-25页 |
| 第三章 实验方法 | 第25-36页 |
| 3.1 人源IDO1表达质粒的构建 | 第25-29页 |
| 3.1.1 引物设计 | 第25页 |
| 3.1.2 点突变和目的基因的扩增 | 第25-26页 |
| 3.1.3 IDO1基因和载体的双酶切反应 | 第26-27页 |
| 3.1.4 目的基因与载体的连接与连接产物的转化 | 第27页 |
| 3.1.5 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第27-29页 |
| 3.2 目的蛋白表达与纯化 | 第29-32页 |
| 3.2.1 小量表达检测最适IPTG浓度和最适诱导温度 | 第29页 |
| 3.2.2 小量表达检测最适血红素前体物ALA浓度和最适pH值 | 第29-31页 |
| 3.2.3 目的蛋白大量表达 | 第31页 |
| 3.2.4 蛋白纯化 | 第31-32页 |
| 3.3 蛋白与小分子亲和性分析 | 第32-33页 |
| 3.3.1 小分子滴定蛋白 | 第33页 |
| 3.3.2 蛋白滴定小分子 | 第33页 |
| 3.4 晶体高通量筛选 | 第33-34页 |
| 3.4.1 蛋白与小分子的孵育 | 第33-34页 |
| 3.4.2 结晶条件的初筛 | 第34页 |
| 3.4.3 结晶条件的优化 | 第34页 |
| 3.5 衍射数据的收集、处理与解析 | 第34-36页 |
| 3.5.1 防冻剂的筛选 | 第34-35页 |
| 3.5.2 数据的收集 | 第35页 |
| 3.5.3 数据的分析 | 第35-36页 |
| 第四章 实验结果 | 第36-44页 |
| 4.1 表达质粒的构建 | 第36-37页 |
| 4.2 蛋白的表达 | 第37-39页 |
| 4.2.1 蛋白小量表达检测最适IPTG诱导浓度以及最适诱导温度 | 第37-38页 |
| 4.2.2 蛋白小量表达检测最适血红素前体物ALA浓度和最适pH值 | 第38-39页 |
| 4.3 蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| 4.4 蛋白与小分子的亲和性分析 | 第40页 |
| 4.5 晶体学研究 | 第40-44页 |
| 4.5.1 晶体初筛和优化 | 第40-41页 |
| 4.5.2 晶体衍射数据的收集、处理及解析 | 第41-42页 |
| 4.5.3 IDO1蛋白与小分子INCB14943的结构分析 | 第42-44页 |
| 第五章 总结 | 第44-45页 |
| 5.1 总结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-56页 |
| 附录1 试剂和仪器 | 第56-58页 |
| 附录2 具体实验操作与方法 | 第58-61页 |
| 附录3 SDS-PAGE和其他缓冲液的配制 | 第61-63页 |
| 附录4 培养基配制 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 在读期间发表的学术论文和参加的学术会议 | 第65页 |
