| 缩略词 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一部分 14岁下儿童垂体泌IL素腺瘤相关研究 | 第12-26页 |
| 前言 | 第12页 |
| 材料与方法 | 第12-13页 |
| 1. 患者一般资料及研究方法 | 第12-13页 |
| 2. 基本标准及定义 | 第13页 |
| 3. 随诊标准 | 第13页 |
| 4. 统计学分析 | 第13页 |
| 实验结果 | 第13-18页 |
| 1. 临床表现 | 第13-15页 |
| 2. 内分泌检查和影像学检查结果 | 第15页 |
| 3. 治疗和随诊 | 第15-18页 |
| 讨论 | 第18-22页 |
| 参考文献 | 第22-26页 |
| 第二部分 通过激活AMPK信号通路对漠隐亭耐药的垂体泌乳素腺瘤治疗的研究 | 第26-65页 |
| 前言 | 第26-27页 |
| 材料和方法 | 第27-40页 |
| 1. 实验材料 | 第27-29页 |
| 1.1 化学药品、试剂和仪器 | 第27-28页 |
| ①药品 | 第27页 |
| ②试剂盒 | 第27页 |
| ③抗体 | 第27-28页 |
| ④引物合成 | 第28页 |
| ⑤其他主要试剂和材料 | 第28页 |
| ⑥主要仪器及设备 | 第28页 |
| 1.2 细胞系 | 第28页 |
| 1.3 实验动物 | 第28-29页 |
| 1.4 人垂体泌乳素腺瘤肿瘤 | 第29页 |
| 2. 实验方法 | 第29-40页 |
| 2.1 细胞培养,传代及冻存 | 第29-30页 |
| 2.2 RNA提取,转录及real-time PCR | 第30-32页 |
| 2.2.1 RNA提取 | 第30页 |
| 2.2.2 逆转录 | 第30页 |
| 2.2.3 Real-Time PCR | 第30-31页 |
| 2.2.4 Real-Time PCR反应体系如下 | 第31页 |
| 2.2.5 Real-Time PCR反应条件如下 | 第31-32页 |
| 2.2.6 Real-Time PCR数据分析 | 第32页 |
| 2.3 Western blotting | 第32-34页 |
| 2.3.1 细胞总蛋白提取及蛋白浓度测定 | 第32-33页 |
| 2.3.2 Western blotting实验所用试剂 | 第33页 |
| 2.3.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33-34页 |
| 2.3.4 抗原抗体反应及化学发光法检测蛋白含量 | 第34页 |
| 2.4 Elisa方法检测细胞样品和小鼠血浆样品PRL水平 | 第34-35页 |
| 2.5. 免疫组化(二步法) | 第35-36页 |
| 2.5.1 脱蜡 | 第35页 |
| 2.5.2 消除内源性过氧化物酶 | 第35页 |
| 2.5.3 高压法热抗原修复 | 第35-36页 |
| 2.5.4 抗体杂交 | 第36页 |
| 2.5.5 DAB显色,复染 | 第36页 |
| 2.5.6 封片 | 第36页 |
| 2.5.7 统计 | 第36页 |
| 2.6 Annexin V-FITC法检测细胞凋亡 | 第36-37页 |
| 2.6.1 对于MMQ细胞系(悬浮细胞) | 第36-37页 |
| 2.6.2. 对于GH3细胞系(贴壁细胞) | 第37页 |
| 2.7 CCK-8实验 | 第37-38页 |
| 2.7.1 MMQ细胞系和GH3细胞系标准曲线制作 | 第37-38页 |
| 2.7.2 MMQ细胞和GH3细胞加药后增殖改变检测 | 第38页 |
| 2.8 EdU细胞增殖实验 | 第38-39页 |
| 2.9 裸鼠体内抗肿瘤实验 | 第39-40页 |
| 2.10 统计分析 | 第40页 |
| 实验结果 | 第40-56页 |
| 1. 溴隐亭治疗垂体泌乳素腺瘤的过程中需要AMPK通路的介导 | 第40-42页 |
| 1.1 验证人泌乳素腺瘤肿瘤标本中D2R、ER表达和AMPK激活程度分析 | 第40-42页 |
| 2. AMPK信号通路的激活可以通过下调ER的表达抑制肿瘤增殖、促进凋亡,并通过上调D2R表达增加溴隐亭敏感性 | 第42-51页 |
| 2.1 溴隐亭治疗过程中MMQ细胞和GH3细胞AMPK信号通路的改变 | 第42-43页 |
| 2.2 AICAR和Metformin可激活MMQ和GH3细胞系AMPK信号通路 | 第43-44页 |
| 2.3 AMPK信号通路的激活可以下调ERa和ERβ的表达 | 第44-46页 |
| 2.4 AMPK信号通路激活抑制MMQ和GH3细胞的增殖 | 第46-48页 |
| 2.5 AMPK信号通路的激活可以促进MMQ、GH3细胞的凋亡 | 第48-49页 |
| 2.6 AMPK信号通路的激活可以上调MMQ、GH3细胞D2R的表达 | 第49-50页 |
| 2.7 AMPK信号通路激活药物可协同溴隐亭抑制垂体泌乳素腺瘤细胞PRL水平 | 第50-51页 |
| 3. 动物水平实验 | 第51-56页 |
| 3.1 动物移植瘤模型的建立 | 第51-52页 |
| 3.2 Metformin可以降低小鼠ERα和ERβ的表达,可能会增加D2R的表达 | 第52-56页 |
| 讨论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 文献综述一 | 第65-73页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 文献综述二 | 第73-79页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-82页 |
| 个人简历 | 第82-83页 |
