摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第12-18页 |
1. 固有免疫和获得性免疫共同组成人体的完整免疫系统 | 第12页 |
2. 树突状细胞是协调固有免疫和获得性免疫的重要桥梁 | 第12-13页 |
3. 树突状细胞功能的失调将引起严重的自身免疫疾病 | 第13-14页 |
4. 树突状细胞的调节及相关信号通路 | 第14-16页 |
5. 嘌呤受体家族及P2Y_6在免疫细胞中的重要作用 | 第16-17页 |
6. 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
第二章 UDP/P2Y_6对树突状细胞功能的影响 | 第18-42页 |
1. 前言 | 第18页 |
2. 实验材料 | 第18-23页 |
2.1 实验相关试剂与耗材 | 第18-19页 |
2.2 主要器材和仪器 | 第19页 |
2.3 试剂配方 | 第19-23页 |
3. 实验方法 | 第23-30页 |
3.1 体外取小鼠骨髓细胞 | 第23页 |
3.2 荧光抗体标记细胞表面标记 | 第23-24页 |
3.3 体外检测树突状细胞胞外核苷酸UDP的释放 | 第24页 |
3.4 流式细胞仪分选细胞步骤 | 第24-25页 |
3.5 Western-Blotting蛋白免疫印迹实验 | 第25-26页 |
3.6 RNA提取步骤 | 第26-27页 |
3.7 RNA反转录 | 第27页 |
3.8 RT-PCR | 第27-28页 |
3.9 荧光定量PCR(Real-time PCR) | 第28-29页 |
3.10 荧光葡聚糖吞噬实验(也可以选用荧光标记的大肠杆菌代替荧光葡聚糖颗粒) | 第29页 |
3.11 小鼠脾脏细胞提取 | 第29-30页 |
4. 实验结果与讨论 | 第30-41页 |
4.1 P2Y_6受体在DC分化发育过程中表达量逐渐升高 | 第30-31页 |
4.2 随着DC分化发育细胞释放的UDP呈逐渐增高的趋势 | 第31-34页 |
4.4 P2Y_6受体抑制剂会阻断DC细胞的发育成熟 | 第34-36页 |
4.5 P2Y_6受体的抑制剂MRS2578影响了成熟DC的重要细胞因子的分泌 | 第36页 |
4.6 P2Y_6受体的缺失并未影响骨髓来源淋巴细胞中DC的含量 | 第36-37页 |
4.7 UDP对P2Y_6敲除骨髓细胞的激活显著降低 | 第37-38页 |
4.8 P2Y_6受体的缺失并未显著影响未成熟的树突状细胞的吞噬功能 | 第38-40页 |
4.9 UDP明显提高ERK信号通路的激活 | 第40-41页 |
5. 本章总结 | 第41-42页 |
第三章 UDP/P2Y_6对小鼠迟发型超敏反应(CHS)的调控研究 | 第42-55页 |
1. 前言 | 第42页 |
2. 实验材料 | 第42-44页 |
2.1 实验相关试剂与耗材 | 第42-43页 |
2.2 主要器材和仪器 | 第43页 |
2.3 试剂配方 | 第43-44页 |
3. 实验方法 | 第44-47页 |
3.1 石蜡切片的制作 | 第44-45页 |
3.2 HE染色过程 | 第45-46页 |
3.3 体外建立小鼠迟发型超敏反应动物模型(CHS模型) | 第46-47页 |
3.4 体外建立皮下注射细胞的小鼠迟发型超敏反应动物模型 | 第47页 |
3.5 体外建立腹腔注射UDP的迟发型超敏反应动物模型 | 第47页 |
4. 实验结果与讨论 | 第47-54页 |
4.1 建立小鼠单纯迟发型超敏反应模型 | 第47-49页 |
4.2 建立敲除型小鼠腹腔注射UDP的迟发型超敏反应小鼠模型 | 第49-51页 |
4.3 建立皮下注射细胞的迟发型超敏反应小鼠模型 | 第51-54页 |
5. 小结 | 第54-55页 |
第四章 讨论 | 第55-59页 |
1. P2Y_6/UDP可以促进树突状细胞分化和发育成熟 | 第55-56页 |
2. 树突状细胞在迟发型超敏反应中起了非常重要的抗原递呈作用 | 第56-57页 |
3. P2Y_6/UDP可以影响迟发型超敏反应模型中小鼠的炎症反应 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-64页 |
附录Ⅰ 缩略词 | 第64-66页 |
附录Ⅱ 攻读硕士学位期间科研工作成果 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |