摘要 | 第9-10页 |
ABSTRACT | 第10页 |
第一章 文献综述 | 第11-17页 |
1.1 氟与氟中毒 | 第11-12页 |
1.1.1 氟中毒对动物的危害 | 第11页 |
1.1.2 氟中毒引起机体损伤的可能机制 | 第11-12页 |
1.2 家蚕氟中毒及耐氟性的研究 | 第12-17页 |
1.2.1 桑叶与氟污染 | 第12-13页 |
1.2.2 家蚕氟中毒 | 第13-14页 |
1.2.3 家蚕耐氟研究进展 | 第14-17页 |
第二章 引言 | 第17-19页 |
2.1 研究目的和意义 | 第17页 |
2.2 主要研究内容 | 第17-18页 |
2.3 研究路线 | 第18-19页 |
第三章 氟中毒家蚕生理指标的测定 | 第19-25页 |
3.1 实验试剂和材料 | 第19页 |
3.2 方法 | 第19-20页 |
3.2.1 家蚕饲养与添氟处理 | 第19页 |
3.2.2 家蚕生理变化 | 第19-20页 |
3.2.2.1 家蚕体重与死亡率的测量 | 第19页 |
3.2.2.2 家蚕体重增长的统计学分析 | 第19-20页 |
3.3 结果与分析 | 第20-23页 |
3.3.1 家蚕生理变化 | 第20-21页 |
3.3.2 家蚕体重增长指数的统计分析 | 第21-23页 |
3.4 讨论 | 第23-25页 |
第四章 氟化物在家蚕脂肪体代谢研究 | 第25-29页 |
4.1 材料和方法 | 第25-27页 |
4.1.1 家蚕品种 | 第25页 |
4.1.2 实验试剂与配制 | 第25页 |
4.1.3 实验仪器 | 第25页 |
4.1.4 实验方法 | 第25-27页 |
4.1.4.1 氟离子检测方法 | 第26页 |
4.1.4.2 氟离子选择电极法的原理 | 第26页 |
4.1.4.3 绘制标准曲线 | 第26页 |
4.1.4.4 脂肪体样品处理 | 第26页 |
4.1.4.5 脂肪体样品氟含量检测 | 第26-27页 |
4.2 结果与分析 | 第27-28页 |
4.2.1 绘制氟浓度标准曲线 | 第27-28页 |
4.2.2 脂肪体氟含量检测 | 第28页 |
4.3 讨论 | 第28-29页 |
第五章 家蚕ptp基因的鉴定与分析 | 第29-49页 |
5.1 材料和试剂 | 第29-40页 |
5.1.1 实验材料 | 第29页 |
5.1.2 载体与菌株 | 第29页 |
5.1.3 主要试剂 | 第29-32页 |
5.1.3.1 主要实验药品 | 第29-30页 |
5.1.3.2 实验试剂配置 | 第30-32页 |
5.1.3.3 实验仪器 | 第32页 |
5.1.4 实验方法 | 第32-40页 |
5.1.4.0 家蚕添氟饲养 | 第32页 |
5.1.4.1 家蚕组织RNA的提取 | 第32-33页 |
5.1.4.2 cDNA第一链的合成与检测 | 第33-34页 |
5.1.4.3 mRNA差异显示的引物及PCR扩增 | 第34-35页 |
5.1.4.4 6%聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第35页 |
5.1.4.5 PAGE胶核酸银染 | 第35-36页 |
5.1.4.6 cDNA 目的片段的回收 | 第36页 |
5.1.4.7 胶回收的 DNA 片段与载体连接 | 第36-37页 |
5.1.4.8 感受态细胞的制备 | 第37页 |
5.1.4.9 转化 | 第37页 |
5.1.4.10 筛选阳性克隆 | 第37-38页 |
5.1.4.11 提取重组质粒 | 第38页 |
5.1.4.12 阳性克隆测序 | 第38页 |
5.1.4.13 生物信息学分析时所用的数据库 | 第38-39页 |
5.1.4.14 RT-PCR检测 | 第39-40页 |
5.2 结果与分析 | 第40-48页 |
5.2.1 总RNA质量的检测 | 第40页 |
5.2.2 734 和T6品种A3检测 | 第40-41页 |
5.2.3 734 和T6品种mRNA差异显示 | 第41-42页 |
5.2.4 差异片段A5的克隆鉴定 | 第42-43页 |
5.2.5 Bmptp在脂肪体中的半定量PCR分析 | 第43页 |
5.2.6 Bmptp生物信息学分析 | 第43-47页 |
5.2.6.1 Bmptp序列分析 | 第43-44页 |
5.2.6.2 Bmptp序蛋白同源性 | 第44-47页 |
5.2.7 Bmptp基因的组织表达模式 | 第47-48页 |
5.2.7.1 基于基因芯片数据的组织表达分析 | 第47页 |
5.2.7.2 半定量RT-PCR分析家蚕幼虫组织表达 | 第47-48页 |
5.3 讨论 | 第48-49页 |
第六章 家蚕cyp333a2基因的鉴定与分析 | 第49-55页 |
6.1 材料和试剂 | 第49-50页 |
6.1.1 实验材料 | 第49页 |
6.1.2 载体与菌株 | 第49页 |
6.1.3 主要试剂 | 第49页 |
6.1.3.1 主要实验药品 | 第49页 |
6.1.3.2 实验试剂配置 | 第49页 |
6.1.3.3 实验仪器 | 第49页 |
6.1.4 实验方法 | 第49-50页 |
6.1.4.0 家蚕添氟饲养 | 第49页 |
6.1.4.1 家蚕组织RNA的提取 | 第49页 |
6.1.4.2 cDNA第一链的合成与检测 | 第49页 |
6.1.4.3 差异显示的引物及PCR扩增 | 第49页 |
6.1.4.4 6%聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第49页 |
6.1.4.5 核酸银染法 | 第49页 |
6.1.4.6 cDNA目的片段的回收 | 第49页 |
6.1.4.7 胶回收的DNA片段与载体连接 | 第49-50页 |
6.1.4.8 感受态细胞的制备 | 第50页 |
6.1.4.9 转化 | 第50页 |
6.1.4.10 筛选阳性克隆 | 第50页 |
6.1.4.11 提取重组质粒 | 第50页 |
6.1.4.12 阳性克隆测序 | 第50页 |
6.1.4.13 生物信息学分析时所用数据库和软件 | 第50页 |
6.1.4.14 RT-PCR检测 | 第50页 |
6.2 结果与分析 | 第50-54页 |
6.2.1 差异显示结果 | 第50页 |
6.2.2 差异片段序列鉴定与RT-PCR检测 | 第50-51页 |
6.2.3 Bmcyp333a2生物信息学分析 | 第51-54页 |
6.2.3.1 Bmcyp333a2序列分析 | 第51页 |
6.2.3.2 Bmcyp333a2蛋白同源性分析 | 第51-53页 |
6.2.3.3 Bmcyp333a2基因基于基因芯片数据的组织表达分析 | 第53页 |
6.2.3.4 Bmcyp333a2基因半定量组织表达分析 | 第53-54页 |
6.3 讨论 | 第54-55页 |
第七章 综合与讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
硕士期间发表论文 | 第61-63页 |
致谢 | 第63页 |