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家蚕ptp和cyp333a2基因的鉴定及其耐氟性功能研究

摘要第9-10页
ABSTRACT第10页
第一章 文献综述第11-17页
    1.1 氟与氟中毒第11-12页
        1.1.1 氟中毒对动物的危害第11页
        1.1.2 氟中毒引起机体损伤的可能机制第11-12页
    1.2 家蚕氟中毒及耐氟性的研究第12-17页
        1.2.1 桑叶与氟污染第12-13页
        1.2.2 家蚕氟中毒第13-14页
        1.2.3 家蚕耐氟研究进展第14-17页
第二章 引言第17-19页
    2.1 研究目的和意义第17页
    2.2 主要研究内容第17-18页
    2.3 研究路线第18-19页
第三章 氟中毒家蚕生理指标的测定第19-25页
    3.1 实验试剂和材料第19页
    3.2 方法第19-20页
        3.2.1 家蚕饲养与添氟处理第19页
        3.2.2 家蚕生理变化第19-20页
            3.2.2.1 家蚕体重与死亡率的测量第19页
            3.2.2.2 家蚕体重增长的统计学分析第19-20页
    3.3 结果与分析第20-23页
        3.3.1 家蚕生理变化第20-21页
        3.3.2 家蚕体重增长指数的统计分析第21-23页
    3.4 讨论第23-25页
第四章 氟化物在家蚕脂肪体代谢研究第25-29页
    4.1 材料和方法第25-27页
        4.1.1 家蚕品种第25页
        4.1.2 实验试剂与配制第25页
        4.1.3 实验仪器第25页
        4.1.4 实验方法第25-27页
            4.1.4.1 氟离子检测方法第26页
            4.1.4.2 氟离子选择电极法的原理第26页
            4.1.4.3 绘制标准曲线第26页
            4.1.4.4 脂肪体样品处理第26页
            4.1.4.5 脂肪体样品氟含量检测第26-27页
    4.2 结果与分析第27-28页
        4.2.1 绘制氟浓度标准曲线第27-28页
        4.2.2 脂肪体氟含量检测第28页
    4.3 讨论第28-29页
第五章 家蚕ptp基因的鉴定与分析第29-49页
    5.1 材料和试剂第29-40页
        5.1.1 实验材料第29页
        5.1.2 载体与菌株第29页
        5.1.3 主要试剂第29-32页
            5.1.3.1 主要实验药品第29-30页
            5.1.3.2 实验试剂配置第30-32页
            5.1.3.3 实验仪器第32页
        5.1.4 实验方法第32-40页
            5.1.4.0 家蚕添氟饲养第32页
            5.1.4.1 家蚕组织RNA的提取第32-33页
            5.1.4.2 cDNA第一链的合成与检测第33-34页
            5.1.4.3 mRNA差异显示的引物及PCR扩增第34-35页
            5.1.4.4 6%聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第35页
            5.1.4.5 PAGE胶核酸银染第35-36页
            5.1.4.6 cDNA 目的片段的回收第36页
            5.1.4.7 胶回收的 DNA 片段与载体连接第36-37页
            5.1.4.8 感受态细胞的制备第37页
            5.1.4.9 转化第37页
            5.1.4.10 筛选阳性克隆第37-38页
            5.1.4.11 提取重组质粒第38页
            5.1.4.12 阳性克隆测序第38页
            5.1.4.13 生物信息学分析时所用的数据库第38-39页
            5.1.4.14 RT-PCR检测第39-40页
    5.2 结果与分析第40-48页
        5.2.1 总RNA质量的检测第40页
        5.2.2 734 和T6品种A3检测第40-41页
        5.2.3 734 和T6品种mRNA差异显示第41-42页
        5.2.4 差异片段A5的克隆鉴定第42-43页
        5.2.5 Bmptp在脂肪体中的半定量PCR分析第43页
        5.2.6 Bmptp生物信息学分析第43-47页
            5.2.6.1 Bmptp序列分析第43-44页
            5.2.6.2 Bmptp序蛋白同源性第44-47页
        5.2.7 Bmptp基因的组织表达模式第47-48页
            5.2.7.1 基于基因芯片数据的组织表达分析第47页
            5.2.7.2 半定量RT-PCR分析家蚕幼虫组织表达第47-48页
    5.3 讨论第48-49页
第六章 家蚕cyp333a2基因的鉴定与分析第49-55页
    6.1 材料和试剂第49-50页
        6.1.1 实验材料第49页
        6.1.2 载体与菌株第49页
        6.1.3 主要试剂第49页
            6.1.3.1 主要实验药品第49页
            6.1.3.2 实验试剂配置第49页
            6.1.3.3 实验仪器第49页
        6.1.4 实验方法第49-50页
            6.1.4.0 家蚕添氟饲养第49页
            6.1.4.1 家蚕组织RNA的提取第49页
            6.1.4.2 cDNA第一链的合成与检测第49页
            6.1.4.3 差异显示的引物及PCR扩增第49页
            6.1.4.4 6%聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第49页
            6.1.4.5 核酸银染法第49页
            6.1.4.6 cDNA目的片段的回收第49页
            6.1.4.7 胶回收的DNA片段与载体连接第49-50页
            6.1.4.8 感受态细胞的制备第50页
            6.1.4.9 转化第50页
            6.1.4.10 筛选阳性克隆第50页
            6.1.4.11 提取重组质粒第50页
            6.1.4.12 阳性克隆测序第50页
            6.1.4.13 生物信息学分析时所用数据库和软件第50页
            6.1.4.14 RT-PCR检测第50页
    6.2 结果与分析第50-54页
        6.2.1 差异显示结果第50页
        6.2.2 差异片段序列鉴定与RT-PCR检测第50-51页
        6.2.3 Bmcyp333a2生物信息学分析第51-54页
            6.2.3.1 Bmcyp333a2序列分析第51页
            6.2.3.2 Bmcyp333a2蛋白同源性分析第51-53页
            6.2.3.3 Bmcyp333a2基因基于基因芯片数据的组织表达分析第53页
            6.2.3.4 Bmcyp333a2基因半定量组织表达分析第53-54页
    6.3 讨论第54-55页
第七章 综合与讨论第55-57页
参考文献第57-61页
硕士期间发表论文第61-63页
致谢第63页

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