| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第10-17页 |
| 1.1 琥珀酸 | 第10页 |
| 1.2 CO_2在琥珀酸积累过程中的关键作用 | 第10-11页 |
| 1.3 CO_2从胞外到胞内的转运过程 | 第11-14页 |
| 1.3.1 蓝藻中的CO_2和HCO_(3-)转运子 | 第12-14页 |
| 1.4 CO_2进入胞内代谢的固定过程 | 第14-15页 |
| 1.5 CO_2转运与固定过程的协同代谢调控 | 第15页 |
| 1.6 本研究的意义及主要内容 | 第15-17页 |
| 第2章 CO_2转运方式由被动扩散变为主动运输 | 第17-36页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 材料与方法 | 第17-25页 |
| 2.2.1 引物 | 第17-18页 |
| 2.2.2 菌株与质粒 | 第18页 |
| 2.2.3 试剂 | 第18页 |
| 2.2.4 培养基和培养条件 | 第18-19页 |
| 2.2.5 分子克隆操作 | 第19-21页 |
| 2.2.6 膜蛋白的提取以及检测 | 第21-23页 |
| 2.2.7 大肠杆菌菌体密度的检测 | 第23页 |
| 2.2.8 残糖的检测 | 第23页 |
| 2.2.9 有机酸的检测 | 第23-24页 |
| 2.2.10 细胞粗酶液的制备 | 第24页 |
| 2.2.11 PPC以及PCK酶活的测定 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第25-35页 |
| 2.3.1 构建质粒p Trc-sbtA | 第25-26页 |
| 2.3.2 构建质粒p Trc-bicA | 第26-27页 |
| 2.3.3 构建质粒p Trc-bicA-sbtA | 第27页 |
| 2.3.4 诱导表达SbtA以及BicA | 第27-29页 |
| 2.3.5 SbtA以及BicA的表达对细胞量的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.6 SbtA以及BicA的表达对残糖浓度的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.7 SbtA以及BicA的表达对琥珀酸产量的影响 | 第31-32页 |
| 2.3.8 SbtA以及BicA的表达对PPC酶活的影响 | 第32-34页 |
| 2.3.9 SbtA以及BicA的表达对PCK酶活的影响 | 第34-35页 |
| 2.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第3章 CO_2固定能力的增强 | 第36-42页 |
| 3.1 前言 | 第36页 |
| 3.2 材料与方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第36页 |
| 3.2.2 试剂与仪器 | 第36-37页 |
| 3.2.3 培养基与培养条件 | 第37页 |
| 3.2.4 代谢产物的分析方法 | 第37页 |
| 3.2.5 引物 | 第37页 |
| 3.2.6 分子克隆操作 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第38-41页 |
| 3.3.1 质粒p Trc-ppc的构建 | 第38-39页 |
| 3.3.2 PPC的表达对琥珀酸生产的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.3 PPC的表达对PPC以及PCK酶活的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 CO_2转运与固定的协同代谢调控 | 第42-51页 |
| 4.1 前言 | 第42页 |
| 4.2 材料与方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 引物 | 第42-43页 |
| 4.2.2 菌株与质粒 | 第43页 |
| 4.2.3 试剂与仪器 | 第43页 |
| 4.2.4 培养基与培养条件 | 第43页 |
| 4.2.5 代谢产物的分析方法 | 第43页 |
| 4.2.6 分子克隆操作 | 第43-45页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第45-50页 |
| 4.3.1 质粒p Trc-ppc-sbtA, pTrc-ppc-bicA和pTrc-ppc-bicA-sbtA的构建 | 第45页 |
| 4.3.2 质粒p Trc-ppc，pTrc-ppc-sbtA, pTrc-ppc-bicA和pTrc-ppc-bic-sbtA的表达 | 第45-46页 |
| 4.3.3 PPC与SbtA和BicA的串联表达对细胞量的影响 | 第46-47页 |
| 4.3.4 PPC与SbtA和BicA的串联表达对残糖浓度的影响 | 第47-48页 |
| 4.3.5 PPC与SbtA和BicA的串联表达对琥珀酸产量的影响 | 第48-49页 |
| 4.3.6 PPC与SbtA和BicA的串联表达对PPC以及PCK酶活的影响 | 第49-50页 |
| 4.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第5章 总结与展望 | 第51-55页 |
| 5.1 总结 | 第51页 |
| 5.2 展望 | 第51-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
