致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1.1 邻位连接技术概述 | 第11-14页 |
1.2 邻位连接技术的分类 | 第14-18页 |
1.3 邻位连接技术的应用 | 第18-21页 |
1.4 糖代谢标记技术 | 第21-23页 |
第二章 METPLA技术用于特定蛋白质糖基化修饰的检测 | 第23-46页 |
2.1 引言 | 第23-24页 |
2.2 材料 | 第24-26页 |
2.2.1 细胞系 | 第24页 |
2.2.2 核酸序列 | 第24页 |
2.2.3 主要试剂和仪器 | 第24-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-37页 |
2.3.1 邻位连接探针的制备 | 第26-27页 |
2.3.2 探针的检测 | 第27-28页 |
2.3.3 细胞培养和传代 | 第28-29页 |
2.3.4 细胞的冻存 | 第29页 |
2.3.5 冻存细胞的复苏 | 第29页 |
2.3.6 检测一抗浓度 | 第29-30页 |
2.3.7 利用METPLA技术检测蛋白糖基化的实验流程 | 第30-32页 |
2.3.8 GLUT4表达载体的构建 | 第32-36页 |
2.3.9 诱导EGFR二聚化实验 | 第36页 |
2.3.10 免疫荧光检测细胞标记物 | 第36-37页 |
2.3.11 EGFR唾液酸化分析 | 第37页 |
2.4 结果 | 第37-44页 |
2.4.1 探针连接情况的检测 | 第37-38页 |
2.4.2 METPLA检测A549细胞中唾液酸化修饰的EGFR | 第38-39页 |
2.4.3 METPLA检测GLUT4及其突变体N57Q的唾液酸化修饰 | 第39-40页 |
2.4.4 METPLA检测唾液酸化EGFR的亚细胞定位 | 第40-41页 |
2.4.5 METPLA检测唾液酸化EGFR的二聚化现象 | 第41-43页 |
2.4.6 METPLA检测膜蛋白上的其他糖基化修饰 | 第43-44页 |
2.5 讨论与展望 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-54页 |
附录 | 第54-55页 |
作者简历 | 第55页 |