| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 主要符号列表 | 第12-13页 |
| 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 猪链球菌的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.1 病原学 | 第13页 |
| 1.1.2 血清学分型 | 第13-14页 |
| 1.1.3 毒力因子 | 第14-15页 |
| 1.2 猪胸膜肺炎放线杆菌 | 第15-18页 |
| 1.2.1 血清型 | 第16页 |
| 1.2.2 毒力因子 | 第16-18页 |
| 1.3 副猪嗜血杆菌 | 第18-19页 |
| 1.3.1 病原 | 第18-19页 |
| 1.3.2 副猪嗜血杆菌假设毒力相关因子 | 第19页 |
| 1.4 多重PCR | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 引言 | 第21-22页 |
| 1 材料与方法 | 第22-27页 |
| 1.1 主要试剂 | 第22页 |
| 1.2 参考菌株 | 第22页 |
| 1.3 病料采集 | 第22页 |
| 1.4 细菌培养 | 第22页 |
| 1.5 细菌纯检 | 第22-23页 |
| 1.6 细菌计数 | 第23页 |
| 1.7 引物的设计与合成 | 第23页 |
| 1.8 细菌模板提取 | 第23-24页 |
| 1.8.1 细菌培养物模板的提取 | 第23页 |
| 1.8.2 病料肺组织及扁桃体组织细菌基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| 1.9 PCR扩增及其条件的优化 | 第24-25页 |
| 1.9.1 单一PCR扩增 | 第24-25页 |
| 1.9.2 多重PCR扩增 | 第25页 |
| 1.9.3 PCR产物的鉴定 | 第25页 |
| 1.10 多重PCR重复性实验 | 第25页 |
| 1.11 多重PCR特异性实验 | 第25页 |
| 1.12 多重PCR的敏感性实验 | 第25页 |
| 1.12.1 对细菌纯培养物的敏感性实验 | 第25页 |
| 1.12.2 对人工模拟感染样品的敏感性实验 | 第25页 |
| 1.13 多重PCR法与细菌分离检测结果的比较 | 第25-26页 |
| 1.14 对猪鼻拭子的检测 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-46页 |
| 2.1 SS、APP、HPS三重PCR方法的建立 | 第27-30页 |
| 2.1.1 SS、APP、HPS单一PCR扩增 | 第27页 |
| 2.1.2 SS、APP、HPS三重PCR扩增 | 第27页 |
| 2.1.3 SS、APP、HPS三重PCR产物的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.1.4 SS、APP、HPS三重PCR的特异性实验 | 第28页 |
| 2.1.5 SS、APP、HPS三重PCR对细菌纯培养物的敏感性 | 第28页 |
| 2.1.6 SS、APP、HPS三重PCR对人工模拟感染样品的敏感性 | 第28-29页 |
| 2.1.7 SS、APP、HPS三重PCR方法的重复性检测 | 第29-30页 |
| 2.1.8 SS、APP、HPS三重PCR方法的临床检测 | 第30页 |
| 2.2 SS血清1、2、7、9型四重PCR方法的建立 | 第30-34页 |
| 2.2.1 SS血清1、2、7、9型单一PCR扩增 | 第30-31页 |
| 2.2.2 SS血清1、2、7、9型四重PCR扩增 | 第31页 |
| 2.2.3 SS血清1、2、7、9型四重PCR产物的鉴定 | 第31页 |
| 2.2.4 SS血清1、2、7、9型四重PCR的特异性实验 | 第31-32页 |
| 2.2.5 SS血清1、2、7、9型四重PCR对细菌纯培养物的敏感性 | 第32页 |
| 2.2.6 SS血清1、2、7、9型四重PCR对人工模拟感染样品的敏感性 | 第32页 |
| 2.2.7 SS血清1、2、7、9型四重PCR方法的重复性检测 | 第32页 |
| 2.2.8 SS血清1、2、7、9型四重PCR检测方法的临床应用 | 第32-34页 |
| 2.3 APP血清1、3、5、7型及APXⅣ五重PCR方法的建立 | 第34-39页 |
| 2.3.1 APP血清1、3、5、7型及APXⅣ单一PCR扩增 | 第34页 |
| 2.3.2 APP血清1、3、5、7型及APXⅣ五重PCR扩增 | 第34-35页 |
| 2.3.3 APP血清1、3、5、7型及APXⅣ五重PCR产物的鉴定 | 第35页 |
| 2.3.4 APP血清1、3、5、7型及APXⅣ五重PCR的特异性实验 | 第35-36页 |
| 2.3.5 APP血清1、3、5、7型及APXⅣ五重PCR对细菌纯培养物的敏感性 | 第36页 |
| 2.3.6 APP血清1、3、5、7型及APXⅣ五重PCR对人工模拟感染样品的敏感性 | 第36-37页 |
| 2.3.7 APP血清1、3、5、7型及APXⅣ五重PCR方法的重复性实验 | 第37页 |
| 2.3.8 APP血清1、3、5、7型及APX Ⅳ五重PCR检测方法的临床应用 | 第37-39页 |
| 2.4 APP血清2、6、8、12型四重PCR方法的建立 | 第39-44页 |
| 2.4.1 APP血清2、6、8、12型单一PCR扩增 | 第39页 |
| 2.4.2 APP血清2、6、8、12型四重PCR扩增 | 第39-40页 |
| 2.4.3 APP血清2、6、8、12型四重PCR产物的鉴定 | 第40页 |
| 2.4.4 APP血清2、6、8、12型四重PCR的特异性实验 | 第40-41页 |
| 2.4.5 APP血清2、6、8、12型四重PCR对细菌纯培养物的敏感性 | 第41-42页 |
| 2.4.6 APP血清2、6、8、12型四重PCR对人工模拟感染样品的敏感性 | 第42页 |
| 2.4.7 APP血清2、6、8、12型四重PCR方法的重复性检测 | 第42页 |
| 2.4.8 APP血清2、6、8、12型四重PCR检测方法的临床应用 | 第42-44页 |
| 2.5 对猪鼻拭子的检测 | 第44-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
