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基于家系构建及转录组与蛋白质组联合分析青虾生长特性及其调控机制

符号说明第6-12页
中文摘要第12-15页
ABSTRACT第15-18页
1. 文献综述第19-35页
    1.1 青虾的生长发育主要过程及其研究进展第20-21页
        1.1.1 青虾的胚胎发育过程第20-21页
        1.1.2 虾类肌肉发育模式的差异第21页
    1.2 虾类家系构建研究现状第21-24页
        1.2.1 对虾的家系构建研究进展第22-23页
        1.2.2 淡水虾类的家系构建研究进展第23-24页
    1.3 甲壳动物生长相关基因的调控研究进展第24-28页
        1.3.1 甲壳类水产动物生长的重要基因第24-25页
        1.3.2 已经研究的甲壳动物生长相关候选基因第25-28页
    1.4 转录组学第28-30页
        1.4.1 转录组学与基因组学概述第28页
        1.4.2 转录组技术在水产动物中的应用第28-30页
    1.5 小RNA测序第30-32页
        1.5.1 小RNA概述第30页
        1.5.2 小RNA测序在水产动物中的应用第30-32页
    1.6 蛋白质组学第32-33页
        1.6.1 蛋白质组学与蛋白质组概述第32页
        1.6.2 蛋白质组研究技术方法第32-33页
        1.6.3 蛋白质组在水产中的应用第33页
    1.7 本研究的目的与意义第33-35页
2. 青虾的家系构建第35-50页
    2.1 试验材料第35页
        2.1.1 青虾亲本的选取第35页
        2.1.2 主要试验仪器第35页
    2.2 试验方法第35-38页
        2.2.1 青虾亲虾的选择和培育第35-37页
        2.2.2 青虾家系的构建方法第37-38页
    2.3 实验结果与分析第38-43页
    2.4 讨论第43-47页
    2.5 长臂虾科新种的发现及其家系的初步构建第47-50页
3. 青虾生长差异的组织学研究第50-60页
    3.1 材料与方法第50-52页
        3.1.1 实验材料第50-51页
        3.1.2 主要仪器设备第51页
        3.1.3 试验方法第51-52页
    3.2 试验结果与分析第52-56页
    3.3 讨论第56-60页
4. 青虾的无参考基因组转录组测序第60-96页
    4.1 材料与方法第60-62页
        4.1.1 实验动物与样品采集第60-61页
        4.1.2 主要实验仪器第61页
        4.1.3 主要试剂及耗材第61-62页
        4.1.4 生物信息分析主要软件第62页
    4.2 总RNA的提取第62页
    4.3 RNA质量检测第62-63页
    4.4 无参考基因组的转录组测序第63-68页
        4.4.1 建库及测序流程第63页
        4.4.2 文库构建及文库质量检测第63-64页
        4.4.3 文库上机测序第64页
        4.4.4 无参转录组生物信息分析流程第64-65页
        4.4.5 无参转录组测序的数据质量评估第65-66页
        4.4.6 无参转录本拼接第66-67页
        4.4.7 无参转录本基因功能注释第67-68页
    4.5 无参转录本基因表达水平分析第68-69页
        4.5.1 参考序列比对第68页
        4.5.2 无参转录组基因表达水平的统计第68-69页
        4.5.3 无参转录组基因FPKM密度分布图第69页
        4.5.4 无参转录组不同实验条件下基因表达水平对比图第69页
        4.5.5 无参转录组RNA-seq整体质量评估第69页
    4.6 无参转录组差异表达分析第69-71页
        4.6.1 无参转录组差异基因筛选第69页
        4.6.2 无参转录组 基因表达维恩图第69页
        4.6.3 无参转录组 差异基因表达水平聚类分析第69-70页
        4.6.4 无参转录组差异基因GO富集分析第70-71页
        4.6.5 差异基因蛋白互作网络分析第71页
    4.7 转录组测序试验结果与分析第71-96页
        4.7.1 总RNA质量检测结果第71-73页
        4.7.2 原始序列数据质量控制第73-75页
        4.7.3 测序原始数据组成第75-76页
        4.7.4 拼接转录本长度分布第76-79页
        4.7.5 KOG分类第79-80页
        4.7.6 GO分类第80-81页
        4.7.7 KEGG分类第81-83页
        4.7.8 差异基因筛选第83-84页
        4.7.9 差异基因表达水平聚类分析第84-86页
        4.7.10 差异基因的GO富集第86-89页
        4.7.11 差异基因蛋白互作网络分析第89-91页
        4.7.12 差异表达mRNA的qRT-PCR验证第91-96页
5. 相关小RNA的高通量测序第96-132页
    5.1 小RNA测序第96-122页
        5.1.1 试验材料第96页
        5.1.2 Small RNA文库构建与测序第96-97页
        5.1.3 Small RNA测序结果第97-106页
        5.1.4 miRNA表达差异分析第106-107页
        5.1.5 样品间相关性检查第107-108页
        5.1.6 miRNA差异表达结果的分析第108-112页
        5.1.7 差异miRNA靶基因富集分析第112页
        5.1.8 候选靶基因GO富集分析第112-114页
        5.1.9 候选靶基因KEGG富集分析第114-119页
        5.1.10 差异表达miRNA的荧光定量qRT-PCR验证第119-122页
    5.2 差异表达MIRNA与MRNA的关联分析第122-132页
        5.2.1 差异表达miRNA与差异表达mRNA的比较第123-124页
        5.2.2 靶基因GO富集分析第124-125页
        5.2.3 靶基因的KEGG富集分析第125-129页
        5.2.4 解析miRNA与mRNA的互作调控网络第129-132页
6. 生长差异的蛋白质组学分析第132-148页
    6.1 试验材料与样品处理第132-133页
    6.2 主要试验仪器和试剂第133页
    6.3 试验方法第133-136页
        6.3.1 总蛋白的提取第133-134页
        6.3.2 BCA法测蛋白浓度第134页
        6.3.3 样品的酶解第134-135页
        6.3.4 样品的脱盐实验步骤第135-136页
        6.3.5 Orbitrap Elite组合式质谱仪的上样第136页
    6.4 试验结果与分析第136-146页
        6.4.1 BCA法测蛋白浓度标准曲线的绘制第136-137页
        6.4.2 质谱分析的实验结果第137-146页
    6.5 讨论第146-148页
7. 青虾生长差异的高通量测序与蛋白质组联合分析第148-153页
    7.1 高通量测序与蛋白质组关联的Venn图分析第148-150页
    7.2 三条生长调控网络之间的联合分析第150页
    7.3 关于联合分析的讨论第150-153页
8. 全文结论第153-155页
    8.1 成功建立青虾全同胞家系第153页
    8.2 青虾的生长差异在肝胰腺与肌纤维结构上均有体现第153页
    8.3 无参考基因组转录组与小RNA测序获得新的小RNA第153页
    8.4 转录组与蛋白质质谱的联合分析获得生长相关调控网络第153页
    8.5 全同胞家系的差异生长主要是由代谢的差异造成第153-155页
展望第155-156页
参考文献第156-170页
论文主要创新点第170-171页
附录第171-174页
致谢第174-175页
攻读学位期间发表论文情况第175页

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