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施有机肥对土壤及生菜中耐药非致病菌及耐药基因的影响研究

摘要第6-9页
ABSTRACT第9-12页
第一章 绪论第19-32页
    1.1 研究背景与研究意义第19-21页
        1.1.1 研究背景第19-21页
        1.1.2 研究意义第21页
    1.2 国内外研究进展第21-29页
        1.2.1 土壤—蔬菜系统中耐药菌及耐药基因的来源第21-22页
        1.2.2 环境中耐药菌及耐药基因的传播途径及扩散机制第22-24页
        1.2.3 土壤及蔬菜中耐药菌污染的研究现状第24-25页
        1.2.4 土壤及蔬菜中耐药基因污染的研究现状第25-27页
        1.2.5 施肥对土壤及蔬菜中耐药菌及耐药基因的影响第27-28页
        1.2.6 非致病耐药菌的研究现状第28-29页
    1.3 研究的总体思路和框架第29-31页
        1.3.1 研究目标第29页
        1.3.2 研究内容第29-30页
        1.3.3 技术路线第30-31页
    1.4 本论文的特色与创新之处第31-32页
第二章 实验方法第32-45页
    2.1 盆栽实验的设计第32页
    2.2 可培养耐药细菌的分离培养第32-34页
        2.2.1 试剂与设备第32-34页
        2.2.2 可培养耐药细菌的分离培养第34页
    2.3 基因克隆第34-40页
        2.3.1 材料与设备第34-35页
        2.3.2 实验方法第35-40页
    2.4 细菌耐药基因的筛查及菌种测序分析第40-42页
        2.4.1 试剂与仪器第40页
        2.4.2 保菌与粗提细菌DNA第40-41页
        2.4.3 耐药基因及第一类整合子intI的PCR筛查第41页
        2.4.4 测序及序列分析第41-42页
    2.5 多重耐药细菌的抗生素最小浓度(MIC)测定第42-43页
        2.5.1 试剂与设备第42页
        2.5.2 实验方法第42-43页
    2.6 质粒提取第43-44页
        2.6.1 试剂与设备第43-44页
        2.6.2 质粒分离提取实验方法第44页
    2.7 耐药基因定位第44页
    2.8 数据处理方法第44-45页
第三章 施有机肥对土壤及生菜中耐药非致病菌分布及多重耐药表型的影响分析第45-53页
    3.1 施有机肥对土壤中耐药非致病菌数目及多重耐药表型的影响第45-48页
        3.1.1 施有机肥对土壤中耐药非致病菌数目的影响第45-47页
        3.1.2 施有机肥对土壤中多重耐药表型的影响第47-48页
    3.2 施有机肥对生菜中耐药非致病菌数目及多重耐药表型的影响第48-51页
        3.2.1 施有机肥对生菜中耐药非致病菌数目的影响第48-50页
        3.2.2 施有机肥对生菜中多重耐药表型的影响第50-51页
    3.3 本章小结第51-53页
第四章 耐药基因库的构建分析第53-57页
    4.1 耐药基因片段的PCR扩增第53-54页
    4.2 PCR产物回收第54-55页
    4.3 重组质粒的构建第55页
    4.4 重组质粒的PCR验证及测序验证第55-56页
    4.5 本章小结第56-57页
第五章 施有机肥对土壤及生菜中耐药基因型及菌种类型的影响分析第57-80页
    5.1 施有机肥对土壤中耐药基因的影响第57-69页
        5.1.1 施有机肥对土壤中整合酶intI基因的影响第57-58页
        5.1.2 施有机肥对土壤中单一耐药基因的影响第58-62页
        5.1.3 施有机肥对土壤中多重耐药基因及菌种类型的影响第62-69页
    5.2 施有机肥对生菜中耐药基因的影响第69-78页
        5.2.1 施有机肥对生菜中整合酶intI基因的影响第69-70页
        5.2.2 施有机肥对生菜中单一耐药基因的影响第70-74页
        5.2.3 施有机肥对生菜多重耐药基因及菌种类型的影响第74-78页
    5.3 本章小结第78-80页
第六章 耐药基因传播风险评价第80-84页
    6.1 耐药菌质粒提取第80-81页
    6.2 质粒上INTI基因的检出情况分析第81页
    6.3 质粒上SUL基因的检出情况分析第81-82页
    6.4 质粒上TET基因的检出情况分析第82-83页
    6.5 本章小结第83-84页
第七章 结论与展望第84-87页
    7.1 研究结论第84-86页
    7.2 不足与展望第86-87页
参考文献第87-96页
附录第96-97页
后记第97-98页

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