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COP9信号亚基5在日本囊对虾中的抗病毒功能研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
符号说明第11-13页
第一章 综述第13-19页
    二、白斑综合征病毒第14-15页
    三、CSN研究进展第15-17页
        1. CSN的结构特点第15页
        2. CSN的功能研究第15-17页
    四、本论文的研究目的、意义和技术路线第17-19页
第二章 COP9信号复合体不同亚基的克隆与组织分布与表达模式分析第19-33页
    一、前言第19页
    二、实验材料和方法第19-24页
        1. 材料第19-21页
            1.1 实验材料第19-20页
            1.2 组织分离第20页
            1.3 白斑综合征病毒的制备第20页
            1.4 试剂和仪器第20-21页
        2. 实验方法第21-24页
            2.1 总RNA的提取第21页
            2.2 第一链cDNA的合成第21-22页
            2.3 序列分析和系统进化分析基因克隆第22页
            2.4 实时荧光定量PCR第22-23页
            2.5 半定量PCR第23-24页
    三、结果第24-31页
        1. CSN序列比对和进化树分析第24-29页
        2. CSNs的组织分布分析第29页
        3. CSNs的表达模式分析第29-31页
    四、讨论第31-33页
第三章 CSN5在日本囊对虾中表达和抗病毒功能研究第33-52页
    一、前言第33-34页
    二、实验材料和方法第34-42页
        1. 材料第34-35页
            1.1 实验材料第34页
            1.2 组织分离第34-35页
        2. 实验方法第35-42页
            2.1 CSN5的cDNA基因克隆第35页
            2.2 重组质粒表达第35-37页
            2.3 重组蛋白表达和纯化第37-38页
            2.4 CSN5抗体制备和检測第38页
            2.5 实时荧光定量PCR第38-39页
            2.6 半定量 PCR(RT-PCR)第39-40页
            2.7 蛋白免疫印记法第40页
            2.8 CSN5的干扰检测第40-41页
            2.9 过表达第41页
            2.10 细胞免疫化学实验第41页
            2.11 死亡率检验第41-42页
    三、实验结果第42-50页
        1. MjCSN5在对虾组织中分布第42页
        2. MjCSN5在病毒感染之后上调表达第42-44页
        3. 干扰敲降MjCSN5的表达后,病毒复制水平增加第44-46页
        4. CSN5重组蛋白过表达检测第46-48页
        5. CSN5提高了日本囊对虾的存活率第48-49页
        6. RNA干扰敲降MjCSN5后,Dorsal调控的抗菌肽的表达量下降第49-50页
    四、讨论第50-52页
总结与创新第52-53页
附录1 7种CSN亚基的cDNA序列和编码的氨基酸序列第53-60页
附录2 7个CSN亚基的氨基酸序列和其他物种的氨基酸序列比对第60-63页
附录3 CSN的7个亚基序列比对第63-65页
参考文献第65-71页
致谢第71-72页
学位论文评阅及答辩情况表第72页

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