| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| 1 猪繁殖与呼吸综合征 | 第13-16页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征的病原学 | 第13页 |
| 1.2 PRRSV的分子生物学特征 | 第13-16页 |
| 2 LGALS1的研究进展 | 第16-18页 |
| 2.1 猪源LGALS1 | 第16-17页 |
| 2.2 LGALS1的合成与分泌 | 第17页 |
| 2.3 LGALS1在肿瘤细胞的概述 | 第17页 |
| 2.4 细胞内与细胞外的LGALS1 | 第17-18页 |
| 3 试验研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 酵母回返试验验证LGALS1与PRRSV 2b蛋白相互作用 | 第19-29页 |
| 1 试验材料 | 第19-22页 |
| 1.1 菌种和载体 | 第19页 |
| 1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 1.3 仪器 | 第20-21页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第21-22页 |
| 2 试验方法 | 第22-27页 |
| 2.1 引物设计与合成 | 第22页 |
| 2.2 pGBKT7-LGALS1质粒的构建 | 第22-25页 |
| 2.3 重组质粒pGADT7-LGALS1的鉴定 | 第25-26页 |
| 2.4 酵母回返试验 | 第26-27页 |
| 3 试验结果 | 第27-29页 |
| 3.1 LGALS1基因PCR扩增结果 | 第27页 |
| 3.2 重组质粒pGADT7-LGALS1双酶切鉴定结果 | 第27-28页 |
| 3.3 酵母回返试验结果 | 第28-29页 |
| 第三章 GST-pull down试验验证LGALS1与PRRSV 2b蛋白相互作用 | 第29-43页 |
| 1 试验材料 | 第29-30页 |
| 1.1 菌种和表达载体 | 第29页 |
| 1.2 试剂 | 第29-30页 |
| 1.3 主要试剂配制 | 第30页 |
| 2 试验方法 | 第30-37页 |
| 2.1 pEGX-KG-2b原核表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.2 pET-28a-LGALS1原核表达载体的构建 | 第32-34页 |
| 2.3 pEGX-KG-2b的诱导表达融合蛋白的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.4 pET-28a-LGALS1的诱导表达融合蛋白的鉴定 | 第35页 |
| 2.5 GST-2b融合蛋白的纯化 | 第35页 |
| 2.6 His-LGALS1融合蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| 2.7 GST-pull down试验 | 第36页 |
| 2.8 Western blotting | 第36-37页 |
| 3 试验结果 | 第37-43页 |
| 3.1 2b基因PCR扩增结果 | 第37页 |
| 3.2 重组表达质粒pEGX-KG-2b双酶切鉴定结果 | 第37-38页 |
| 3.3 pEGX-KG-2b原核表达产物SDS-PAGE检验结果 | 第38-39页 |
| 3.4 GST-2b融合蛋白纯化SDS-PAGE检测结果 | 第39页 |
| 3.5 LGALS1基因PCR扩增结果 | 第39-40页 |
| 3.6 重组表达质粒pET-28a-LGALS1双酶切鉴定结果 | 第40页 |
| 3.7 pET-28a-LGALS1原核表达产物SDS-PAGE检验结果 | 第40-41页 |
| 3.8 His-LGALS1融合蛋白纯化SDS-PAGE检测结果 | 第41-42页 |
| 3.9 GST-pull down试验Western blot检测 | 第42-43页 |
| 第四章 免疫共沉淀验证LGALS1与PRRSV 2b蛋白相互作用 | 第43-50页 |
| 1 试验材料 | 第43-44页 |
| 1.1 菌种和载体 | 第43页 |
| 1.2 试剂 | 第43-44页 |
| 2 试验方法 | 第44-47页 |
| 2.1 pCMV-HA-2b载体的构建 | 第44-45页 |
| 2.2 pCMV-Myc-LGALS1载体构建 | 第45-46页 |
| 2.3 真核细胞转染 | 第46页 |
| 2.4 免疫共沉淀 | 第46-47页 |
| 2.5 Western bloting | 第47页 |
| 3 试验结果 | 第47-50页 |
| 3.1 2b基因PCR扩增结果 | 第47-48页 |
| 3.2 重组表达质粒pCMV-HA-2b双酶切鉴定结果 | 第48页 |
| 3.3 LGALS1基因PCR扩增结果 | 第48-49页 |
| 3.4 重组表达质粒pCMV-Myc-LGALS1双酶切鉴定结果 | 第49页 |
| 3.5 免疫共沉淀Western blot检测结果 | 第49-50页 |
| 第五章 讨论 | 第50-54页 |
| 第六章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
