| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| 1 PXR | 第9-14页 |
| 1.1 PXR的分子生物学特性 | 第9-10页 |
| 1.2 PXR的生物学功能 | 第10-14页 |
| 2 pgPXR | 第14-17页 |
| 2.1 pgPXR的分子生物学特性 | 第14-16页 |
| 2.2 pgPXR的生物学功能 | 第16-17页 |
| 3 CYP3A | 第17-20页 |
| 3.1 CYP3A的生物学特性 | 第17-18页 |
| 3.2 CYP3A的生物学功能 | 第18-19页 |
| 3.3 CYP3A4 | 第19-20页 |
| 3.4 猪细胞色素的研究进展 | 第20页 |
| 4 构建pCI-pgPXR及其转染HepG2细胞的意义 | 第20-22页 |
| 第二章 pgPXR重组质粒的构建 | 第22-36页 |
| 1 实验材料 | 第22-23页 |
| 1.1 实验样本 | 第22页 |
| 1.2 实验试剂 | 第22-23页 |
| 1.3 主要设备 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.1 引物设计 | 第23页 |
| 2.2 一步法提取总RNA | 第23-24页 |
| 2.3 RNA逆转录为cDNA | 第24页 |
| 2.4 PCR扩增pgPXR CDS区 | 第24-25页 |
| 2.5 PCR产物的回收与纯化 | 第25页 |
| 2.6 双酶切基因片段和载体 | 第25-26页 |
| 2.7 酶切产物的回收 | 第26页 |
| 2.8 连接及转化 | 第26-27页 |
| 2.9 重组质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-35页 |
| 3.1 RNA的质量 | 第28页 |
| 3.2 PCR扩增pgPXR CDS区 | 第28-29页 |
| 3.3 载体的连接与转化 | 第29-30页 |
| 3.4 pCI-pgPXR重组质粒酶切鉴定 | 第30页 |
| 3.5 pCI-pgPXR重组质粒基因测序鉴定 | 第30-35页 |
| 4 讨论 | 第35页 |
| 5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 重组质粒在人肝癌HepG2细胞中的表达 | 第36-49页 |
| 1 实验材料 | 第36-37页 |
| 1.1 实验样本 | 第36页 |
| 1.2 实验试剂 | 第36-37页 |
| 1.3 主要设备 | 第37页 |
| 2 实验方法 | 第37-42页 |
| 2.1 细胞培养和准备 | 第37页 |
| 2.2 脂质体Lipofectamine~(TM)2000介导质粒转染HepG2细胞 | 第37页 |
| 2.3 荧光素酶报告基因活性检测 | 第37-38页 |
| 2.4 pgPXR表达鉴定 | 第38-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-46页 |
| 3.1 脂质体Lipofectamine~(TM)2000介导质粒转染HepG2细胞 | 第42-43页 |
| 3.2 PCR检测pgPXR mRNA表达 | 第43-45页 |
| 3.3 Western blotting检测pgPXR蛋白表达 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 5 小结 | 第48-49页 |
| 第四章 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
