| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 一 文献综述 | 第11-24页 |
| 1 基因组编辑技术研究进展 | 第11-22页 |
| ·锌指核酸酶(ZFN)技术 | 第12-13页 |
| ·TALENs基因组编辑技术 | 第13-15页 |
| ·CRISPR/Cas基因组编辑技术 | 第15-22页 |
| 2 水稻抽穗基因Hd1的研究进展 | 第22-23页 |
| 3 论文研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 二 材料与方法 | 第24-36页 |
| 1 实验材料 | 第24-26页 |
| ·水稻材料 | 第24页 |
| ·质粒载体和菌株种类 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·培养基配制 | 第25-26页 |
| 2 实验方法 | 第26-36页 |
| ·生物信息学查询及分析 | 第26页 |
| ·Hd1的CRISPR/Cas9载体构建 | 第26-31页 |
| ·农杆菌介导水稻pCAMBIA1300表达载体的转化 | 第31-33页 |
| ·转基因植株的潮霉素检测 | 第33-34页 |
| ·CRISPR/Cas9的检测 | 第34-36页 |
| 三 结果与分析 | 第36-48页 |
| 1 Hd1生物信息学分析及CRISPR引物设计 | 第36-38页 |
| ·Hd1序列分析 | 第36-37页 |
| ·Hd1中CRISPR位点(sgRNA)的设计 | 第37-38页 |
| 2 表达载体pCAMBIA1300::Hd1sgRNA::Cas9的构建 | 第38-42页 |
| ·Hd1sgRNA::Cas9载体构建 | 第38-40页 |
| ·pCAMBIA1300::Hd1sgRNA::Cas9表达载体的构建与检测 | 第40-42页 |
| 3 农杆菌介导水稻表达载体pCAMBIA1300的转化 | 第42-48页 |
| ·农杆菌的转化及鉴定 | 第42页 |
| ·水稻转基因植株的获得 | 第42-43页 |
| ·转基因植株T0代的潮霉素阳性检测 | 第43-44页 |
| ·CRIPSR/Cas9效果检测 | 第44-46页 |
| ·突变体植株的表型鉴定 | 第46-48页 |
| 四 小结与讨论 | 第48-52页 |
| 1 农杆菌介导珍汕97的遗传转化 | 第48-49页 |
| 2 CRISPR/Cas系统在水稻中产生突变的特点、效率、特异性 | 第49页 |
| 3 CRISPR/Cas9系统潜在的脱靶效应 | 第49-50页 |
| 4 突变体植株的表型分析 | 第50-51页 |
| 5 实验展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
