以Neprilysin为靶点的药物筛选模型的建立及应用
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 主要符号表 | 第8-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·NEP蛋白酶的概述 | 第10-13页 |
| ·NEP蛋白的结构 | 第10-11页 |
| ·NEP蛋白的组织分布及作用 | 第11-12页 |
| ·NEP与利钠肽家族 | 第12-13页 |
| ·以NEP蛋白为靶点的高通量药物筛选 | 第13-17页 |
| ·高通量药物筛选 | 第13-14页 |
| ·NEP抑制剂的研究进展 | 第14-17页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第17-18页 |
| ·课题研究方案设计 | 第18-20页 |
| ·研究目的和意义 | 第18-19页 |
| ·研究内容和方法 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-43页 |
| ·实验材料 | 第20-25页 |
| ·实验菌种及载体 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20-21页 |
| ·实验仪器及耗材 | 第21-22页 |
| ·实验所用工具酶 | 第22页 |
| ·常用缓冲液及培养基 | 第22-25页 |
| ·实验方法 | 第25-43页 |
| ·NEP重组质粒的构建 | 第26-31页 |
| ·pPICZα-A-NEP的毕赤酵母转化及筛选 | 第31-34页 |
| ·重组酵母的诱导表达及检测 | 第34-36页 |
| ·NEP蛋白的分离纯化 | 第36-37页 |
| ·NEP蛋白药物筛选体系的建立 | 第37-41页 |
| ·NEP蛋白的药物筛选 | 第41-43页 |
| 3 结果与讨论 | 第43-59页 |
| ·实验结果 | 第43-57页 |
| ·重组质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·毕赤酵母转化子的筛选鉴定 | 第44-45页 |
| ·NEP蛋白的表达与纯化 | 第45-47页 |
| ·以NEP蛋白为靶点的药物筛选体系建立 | 第47-53页 |
| ·NEP药物的筛选结果 | 第53-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·NEP蛋白表达系统的选择 | 第57页 |
| ·药物筛选体系的构建 | 第57-58页 |
| ·药物的筛选 | 第58-59页 |
| 4 结论 | 第59-60页 |
| 5 展望 | 第60-61页 |
| 6 参考文献 | 第61-68页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第68-69页 |
| 8 致谢 | 第69页 |
