中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
英文缩略词 | 第11-12页 |
前言 | 第12-13页 |
第一篇 文献综述 Tc1/Mariner超家族的研究进展 | 第13-26页 |
1 Tc1/Mariner转座子结构 | 第14-15页 |
2 Tc1/Mariner的转座机制 | 第15-16页 |
3 Tc1/Mariner转座子超家族的分类及分布 | 第16-18页 |
4 活性Tc1/Mariner转座子的挖掘及活性验证 | 第18-20页 |
5 Tc1/Mariner转座子应用研究现状 | 第20-26页 |
·转基因 | 第21-22页 |
·基因捕获 | 第22-25页 |
·基因治疗 | 第25-26页 |
第二篇 试验研究 | 第26-64页 |
第一章 斑马鱼Tc1转座子家族生物信息学分析 | 第26-35页 |
1 材料与方法 | 第26-27页 |
·Tc1转座子的挖掘 | 第26-27页 |
·进化树构建 | 第27页 |
·系统发育分析 | 第27页 |
2 结果 | 第27-34页 |
·斑马鱼Tc1成员及构成 | 第27-29页 |
·斑马鱼Tc1转座子活性比较 | 第29-30页 |
·斑马鱼Tc1-c转座子活性预测 | 第30-34页 |
3 讨论 | 第34-35页 |
第二章 斑马鱼ZB转座子的时空表达特性 | 第35-45页 |
1 材料与方法 | 第35-40页 |
·实验材料 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-40页 |
2 结果 | 第40-44页 |
·斑马鱼ZB转座酶mRNA的时空表达谱 | 第40-41页 |
·斑马鱼早期胚胎中表达ZB转座酶RNA原位杂交结果 | 第41-44页 |
3 讨论 | 第44-45页 |
第三章 细胞水平活性验证 | 第45-55页 |
1 材料与方法 | 第45-49页 |
·菌株及试剂 | 第45页 |
·载体构建所用引物的设计与合成 | 第45-46页 |
·转座子供体pZB-Msc的构建 | 第46-47页 |
·转座酶表达载体pCMV-ZB的构建 | 第47-48页 |
·pZB-PGK-NEO载体构建 | 第48页 |
·细胞水平验证(Hela)ZB转座活性 | 第48-49页 |
2 结果 | 第49-54页 |
·ZB转座元件的克隆与鉴定 | 第49-50页 |
·pZB-Msc载体的构建与鉴定 | 第50页 |
·ZB转座酶辅助质粒的构建与鉴定 | 第50-51页 |
·PGK-NEO-bGHpA的克隆及鉴定 | 第51-52页 |
·细胞水平验证ZB转座活性 | 第52-54页 |
3 讨论 | 第54-55页 |
第四章 胚胎水平活性验证 | 第55-64页 |
1 材料与方法 | 第55-58页 |
·菌株及试剂 | 第55页 |
·转座酶体外转录辅助质粒pTNT-ZB的构建 | 第55-56页 |
·转座子载体pZB-CAG-GFP的构建 | 第56页 |
·转座子载体pZB-FAG-GFP的构建 | 第56-57页 |
·体外转录制备转座酶mRNA | 第57页 |
·斑马鱼胚胎水平验证ZB转座活性 | 第57-58页 |
·小鼠胚胎水平验证ZB转座活性 | 第58页 |
2 结果 | 第58-62页 |
·pTNT-ZB载体的构建与鉴定 | 第58-59页 |
·pZB-CAG-GFP载体的构建与鉴定 | 第59页 |
·pZB-FAG-GFP载体的构建与鉴定 | 第59-60页 |
·ZB-mRNA制备与鉴定 | 第60页 |
·斑马鱼胚胎水平验证ZB转座活性 | 第60-62页 |
·小鼠胚胎水平验证ZB转座活性 | 第62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
全文结论 | 第64-65页 |
参考文献(References) | 第65-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读学位期间发表学术论文 | 第74-75页 |