| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第8-11页 |
| 1 绪论 | 第11-20页 |
| ·东北林蛙 | 第11页 |
| ·低温环境对两栖类动物的生存考验 | 第11-12页 |
| ·耐低温类动物的耐寒能力 | 第11-12页 |
| ·耐寒动物的相关耐寒机制 | 第12-14页 |
| ·耐低温动物机体代谢率的调节 | 第12-13页 |
| ·抗冻保护剂 | 第13页 |
| ·糖代谢相关酶的调控机制 | 第13-14页 |
| ·冰核因子和冰核蛋白 | 第14页 |
| ·抗冻蛋白 | 第14页 |
| ·耐寒动物细胞代谢的调节与保护 | 第14-16页 |
| ·分子伴侣-保护细胞大分子 | 第15页 |
| ·抗氧化损伤 | 第15-16页 |
| ·胰岛素通路 | 第16-17页 |
| ·葡萄糖转运体(GLUTs) | 第17-18页 |
| ·葡萄糖转运体4(GLUT4) | 第18页 |
| ·葡萄糖转运体1(GLUT1) | 第18-19页 |
| ·本实验前期工作 | 第19页 |
| ·研究的目及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·试验动物 | 第20页 |
| ·实验相关试剂 | 第20页 |
| ·实验相关仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-29页 |
| ·东北林蛙的低温胁迫处理 | 第20-21页 |
| ·实验器材及准备 | 第21页 |
| ·样品处理 | 第21页 |
| ·组织总RNA的提取 | 第21-22页 |
| ·反转录cDNA | 第22-23页 |
| ·GLUT4及GLUT1引物设计 | 第23页 |
| ·引物验证PCR | 第23-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
| ·东北林蛙GLUT4的3’和5’末端的扩增 | 第24-25页 |
| ·目的片段回收及验证 | 第25-26页 |
| ·GLUT4 cDNA序列的生物学信息学分析 | 第26-27页 |
| ·东北林蛙GLUT4和GLUT1实时荧光定量PCR | 第27页 |
| ·数据处理及分析 | 第27-28页 |
| ·本章小结 | 第28-29页 |
| 3 结果 | 第29-37页 |
| ·东北林蛙GLUT4的3’及5’末端扩增PCR结果 | 第29页 |
| ·东北林蛙中GLUT4 cDNA序列的生物信息学分析 | 第29-33页 |
| ·东北林蛙GLUT4同源性分析 | 第31-32页 |
| ·东北林蛙GLUT4进化树分析 | 第32-33页 |
| ·东北林蛙GLUT4表达分布 | 第33页 |
| ·荧光定量PCR中GLUT4和GLUT1溶解曲线 | 第33-34页 |
| ·东北林蛙GLUT4溶解曲线 | 第33页 |
| ·东北林蛙GLUT1溶解曲线 | 第33-34页 |
| ·GLUT4和GLUT1转录水平的动态变化 | 第34-36页 |
| ·各组织中GLUT4转录水平变化 | 第34-35页 |
| ·各组织中GLUT1转录水平变化 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-41页 |
| ·葡萄糖转运与抗冻保护剂 | 第37页 |
| ·东北林蛙GLUT4结构与功能 | 第37-38页 |
| ·东北林蛙低温胁迫下GLUT4和GLUT1表达水平变化 | 第38-39页 |
| ·GLUT4表达水平变化 | 第38页 |
| ·GLUT1表达水平变化 | 第38-39页 |
| ·GLUT4和GLUT1共同作用 | 第39页 |
| ·高葡萄糖保护剂形成机制的预测 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |