摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 绪论 | 第12-31页 |
·海藻糖的研究现状概述 | 第12-19页 |
·海藻糖的理化性质 | 第12-14页 |
·海藻糖在食品加工中的应用 | 第14-15页 |
·海藻糖的生产制备 | 第15-19页 |
·6-磷酸海藻糖合成酶研究概述 | 第19-21页 |
·6-磷酸海藻糖磷酸酯酶研究概述 | 第21-22页 |
·msTPS基因生物信息学分析 | 第22-24页 |
·msTPP基因生物信息学分析 | 第24-26页 |
·酶促反应动力学 | 第26-28页 |
·底物浓度对酶反应速度的影响 | 第26-27页 |
·米氏常数K_m | 第27-28页 |
·双倒数作图法测定K_m和V_(max)的值 | 第28页 |
·研究意义及内容 | 第28-31页 |
·研究意义 | 第28-29页 |
·研究内容 | 第29-31页 |
第二章 TPS编码基因的克隆、表达及其酶学性质研究 | 第31-63页 |
·实验材料与仪器 | 第31-33页 |
·菌株与质粒 | 第31页 |
·试剂与工具酶 | 第31-33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-51页 |
·培养基和部分溶液的配置 | 第33-35页 |
·菌株在低温、高压条件下的培养 | 第35-36页 |
·基因组DNA提取 | 第36-37页 |
·msTPS编码基因扩增 | 第37-39页 |
·PCR产物的纯化 | 第39-40页 |
·载体pET-28a(+)的线性化 | 第40-41页 |
·PCR产物与载体pET-28a(+)连接 | 第41-42页 |
·E.coli DH5α及E.coli BL21感受态细胞的制备 | 第42-43页 |
·重组质粒的转化与阳性克隆子的筛选 | 第43-44页 |
·重组菌株构建与蛋白诱导表达 | 第44页 |
·重组msTPS的分离纯化 | 第44-49页 |
·重组msTPS酶活测定方法 | 第49-50页 |
·重组msTPS酶学性质研究 | 第50-51页 |
·结果与分析 | 第51-61页 |
·基因组DNA的提取 | 第51页 |
·TPS编码基因的扩增 | 第51-52页 |
·PCR产物测序验证及纯化 | 第52页 |
·载体pET-28a(+)的线性化 | 第52-53页 |
·重组质粒TPS@pET-28a的构建 | 第53-56页 |
·重组msTPS诱导表达及纯化 | 第56-58页 |
·蛋白定量及重组菌株的酶表达量 | 第58页 |
·重组msTPS酶学性质研究 | 第58-61页 |
·本章小结 | 第61-63页 |
第三章 TPP编码基因的克隆、表达及其酶学性质研究 | 第63-83页 |
·实验材料与仪器 | 第63-66页 |
·菌株与质粒 | 第63页 |
·试剂与工具酶 | 第63-65页 |
·主要仪器 | 第65-66页 |
·实验方法 | 第66-71页 |
·培养基和部分溶液的配置 | 第66-67页 |
·菌株在低温、高压条件下的培养 | 第67页 |
·基因组DNA提取 | 第67页 |
·msTPP编码基因的扩增 | 第67-68页 |
·PCR产物的纯化 | 第68页 |
·载体pET-28a(+)的线性化 | 第68页 |
·PCR产物与载体pET-28a(+)的连接 | 第68页 |
·E.coli DH5α及E.coli BL21感受态细胞的制备 | 第68-69页 |
·重组质粒的转化与阳性克隆子的筛选 | 第69页 |
·重组菌株构建与蛋白诱导表达 | 第69页 |
·重组msTPP的分离纯化 | 第69-70页 |
·重组msTPP酶活测定 | 第70页 |
·重组msTPP酶学性质研究 | 第70-71页 |
·结果与分析 | 第71-81页 |
·基因组DNA的提取 | 第71-72页 |
·msTPP编码基因的扩增 | 第72页 |
·PCR产物验证及纯化 | 第72-73页 |
·载体pET-28a(+)的线性化 | 第73页 |
·重组质粒TPP@pET-28a的构建 | 第73-75页 |
·重组msTPP诱导表达及纯化 | 第75-77页 |
·蛋白定量及重组菌株的酶表达量 | 第77页 |
·重组msTPP酶学性质研究 | 第77-81页 |
·本章小结 | 第81-83页 |
第四章 总结与展望 | 第83-87页 |
·总结 | 第83-85页 |
·展望 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
附件 | 第96-98页 |
附件1:msTPS编码基因序列 | 第96-97页 |
附件2:msTPS氨基酸序列 | 第97-98页 |
附件3:msTPP编码基因序列 | 第98页 |
附件4:msTPP氨基酸序列 | 第98页 |