| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| ·生物固氮 | 第9页 |
| ·共生固氮基本过程 | 第9-11页 |
| ·多重耐药性和外排泵 | 第11-12页 |
| ·RND型转运系统 | 第12-14页 |
| ·Acr AB-Tol C研究进展 | 第14页 |
| ·药物外排泵的调控网络 | 第14-16页 |
| ·Tet R转录调节因子 | 第16-17页 |
| ·外排泵与喹诺酮抗性 | 第17-18页 |
| ·根瘤菌中外排泵研究现状 | 第18-20页 |
| ·目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-32页 |
| ·实验材料 | 第21-28页 |
| ·实验所用质粒和菌株 | 第21-22页 |
| ·实验作用引物 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·缓冲液 | 第24-27页 |
| ·酶及试剂盒 | 第27-28页 |
| ·抗生素 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·基本分子生物学操作方法 | 第28页 |
| ·插入失活突变体构建方法 | 第28-29页 |
| ·药物敏感性实验 | 第29页 |
| ·根瘤菌总RNA的抽提 | 第29-30页 |
| ·荧光定量PCR | 第30页 |
| ·植物盆栽实验 | 第30页 |
| ·固氮酶活的测定 | 第30页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第30-31页 |
| ·Western blot | 第31-32页 |
| 3 结果和分析 | 第32-52页 |
| ·华癸根瘤菌 7653R中RND家族基因转录组分析 | 第32-34页 |
| ·MCHK_0866、MCHK_0867 组成的药物外排泵的功能和调控 | 第34-44页 |
| ·目的基因的结构分析 | 第34-37页 |
| ·缺失MCHK_0866、MCHK_0867 对根瘤菌自生生长的影响 | 第37-38页 |
| ·抑菌物质的敏感性 | 第38-39页 |
| ·敏感性药物对基因表达的影响 | 第39-40页 |
| ·MCHK_0866、MCHK_0867 转录调控的初步检测 | 第40-42页 |
| ·EMSA验证转录调控的前期工作 | 第42-44页 |
| ·其它RND基因插入失活突变体的构建以及共生表型鉴定 | 第44-52页 |
| ·插入失活突变载体的构建 | 第44-45页 |
| ·插入失活突变体的筛选 | 第45-47页 |
| ·突变菌株共生表型 | 第47-52页 |
| 4 讨论 | 第52-56页 |
| ·RND家族基因研究在根瘤菌中的新颖性及研究价值 | 第52-53页 |
| ·对华癸中慢生根瘤 7653R中RND外排泵分析 | 第53页 |
| ·RND外排泵功能的鉴定 | 第53-54页 |
| ·RND外排泵表达调控的初步探索 | 第54页 |
| ·RND家族在共生根瘤中表达未发生显著变化基因的共生功能思考 | 第54-55页 |
| ·进一步研究设想 | 第55-56页 |
| 5 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 文章发表情况 | 第66-67页 |
| 附表 | 第67-72页 |
