| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-14页 |
| ·鱼类的免疫系统 | 第9页 |
| ·溶菌酶的研究进展 | 第9-11页 |
| ·溶菌酶作用机制 | 第9页 |
| ·溶菌酶的分类 | 第9-10页 |
| ·溶菌酶的测定方法 | 第10页 |
| ·溶菌酶基因研究现状 | 第10-11页 |
| ·含硒谷胱甘肽过氧化物酶 2 | 第11-13页 |
| ·硒元素与硒蛋白 | 第11页 |
| ·GPx家族 | 第11页 |
| ·GPx家族主要成员 | 第11-13页 |
| ·活性氧 | 第13页 |
| ·本论文研究目的和意义 | 第13-14页 |
| 2 七鳃鳗g型溶菌酶基因分子克隆 | 第14-47页 |
| ·材料 | 第14-15页 |
| ·实验材料 | 第14页 |
| ·实验药品及主要试剂 | 第14页 |
| ·实验分组 | 第14页 |
| ·主要仪器 | 第14-15页 |
| ·方法 | 第15-23页 |
| ·引物设计 | 第15页 |
| ·提取白细胞 | 第15-16页 |
| ·七鳃鳗总RNA的提取 | 第16-17页 |
| ·PT-PCR反应 | 第17页 |
| ·七鳃鳗g Lyz基因扩增 | 第17-18页 |
| ·目的片段回收 | 第18-19页 |
| ·目的片段与载体连接转化 | 第19页 |
| ·重组质粒的提取及测序 | 第19页 |
| ·5'末端扩增反应 | 第19-21页 |
| ·3'末端扩增反应 | 第21-23页 |
| ·提取 3'Race和 5'Race重组质粒测序 | 第23页 |
| ·七鳃鳗g Lyz基因生物信息学分析 | 第23-24页 |
| ·数据库和应用软件 | 第23页 |
| ·方法 | 第23-24页 |
| ·Ljg Lyz基因组织表达分析 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第24-25页 |
| ·七鳃鳗g Lyz基因蛋白表达及纯化 | 第25-29页 |
| ·方法 | 第25-28页 |
| ·诱导蛋白表达 | 第28页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第28-29页 |
| ·pH和温度对重组Ljg Lyz蛋白活性的影响 | 第29-30页 |
| ·试剂 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30页 |
| ·重组 Ljg Lyz 蛋白处理溶壁微球菌扫描电镜观察 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-45页 |
| ·七鳃鳗g型溶菌酶基因全长扩增 | 第30-32页 |
| ·Ljg Lyz基因生物信息学分析 | 第32-40页 |
| ·Ljg Lyz的组织特异性表达及免疫前后的变化 | 第40-41页 |
| ·构建Ljg Lyz原核表达载体 | 第41-42页 |
| ·Ljg Lyz重组蛋白表达和纯化 | 第42-43页 |
| ·七鳃鳗g型溶茵酶活性检测 | 第43-44页 |
| ·扫描电镜观察七鳃鳗g型溶菌酶处理后的溶壁微球菌 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 3 七鳃鳗GPx2基因分子克隆及组织表达分析 | 第47-67页 |
| ·LjGPx2分子克隆 | 第47-51页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-51页 |
| ·基因组DNA提取 | 第51-53页 |
| ·GPx2基因组DNA扩增 | 第52-53页 |
| ·七鳃鳗GPx2基因生物信息学分析 | 第53页 |
| ·七鳃鳗GPx2基因组织表达分析 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-66页 |
| ·七鳃鳗GPx2基因全长扩增 | 第54-55页 |
| ·Lj GPx2基因组结构分析 | 第55-56页 |
| ·Lj GPx2基因生物信息学分析 | 第56-64页 |
| ·分析Lj GPx2基因组结构 | 第64-65页 |
| ·Lj GPx2的组织特异性表达及免疫前后的变化 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-67页 |
| 4 全文总结 | 第67-68页 |
| 本论文创新点 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 附录A g型溶菌酶、c型溶菌酶和i型溶菌酶同源物种的氨基酸序列 | 第78-82页 |
| 附录B GPx2和GPx1同源物种的氨基酸序列 | 第82-86页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |