| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 上篇 文献综述 | 第11-26页 |
| 第一章 香蕉产业的概述 | 第11-13页 |
| 1. 香蕉的营养价值 | 第11页 |
| 2. 香蕉的经济价值 | 第11-12页 |
| 3. 香蕉产业面临的主要问题 | 第12页 |
| 4. 香蕉果实采后成熟过程对香蕉品质及货架期的影响 | 第12-13页 |
| 第二章 香蕉采后分子生物学研究 | 第13-19页 |
| 1. 乙烯与果实成熟 | 第13页 |
| 2. 乙烯是调控果实成熟的关键因子 | 第13-16页 |
| ·乙烯的生物合成及相关基因对果实成熟的调控 | 第13-15页 |
| ·乙烯信号途径相关基因对果实成熟的调控 | 第15-16页 |
| 3. 转录因子对果实成熟的调控 | 第16-19页 |
| 第三章 BTB家族蛋白研究进展 | 第19-24页 |
| 1. BTB家族蛋白的结构及其分类 | 第19页 |
| 2. BTB家族蛋白的功能 | 第19-21页 |
| 3. 植物BTB蛋白基因功能研究进展 | 第21-24页 |
| 第四章 番茄作为植物果实模式植物的特点 | 第24-25页 |
| 第五章 本研究的目的、意义和技术路线 | 第25-26页 |
| 1. 本研究的目的和意义 | 第25页 |
| 2. 技术路线 | 第25-26页 |
| 下篇 研究内容 | 第26-55页 |
| 第一章 材料、试剂与仪器 | 第26-29页 |
| 1. 材料 | 第26页 |
| 2. 实验试剂 | 第26-27页 |
| 3. 实验仪器 | 第27页 |
| 4. 培养基 | 第27-29页 |
| 第二章 方法 | 第29-38页 |
| 1. 香蕉MaBTB蛋白的亚细胞定位 | 第29页 |
| ·实验材料的准备 | 第29页 |
| ·基因枪法转化洋葱表皮 | 第29页 |
| 2. 香蕉MaBTB基因转录激活分析 | 第29-33页 |
| ·pGBKT7-MaBTB、pGBKT7-MaBTB-MATH和pGBKT7-MaBTB-BTB酵母重组质粒的构建及鉴定 | 第29-32页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第30页 |
| ·目的片段的回收 | 第30-31页 |
| ·目的片段的酶切 | 第31页 |
| ·目的片段的再次回收 | 第31页 |
| ·目的片段同pGBKT7载体的连接 | 第31页 |
| ·大肠杆菌E.coli.DH5α感受态细胞的制备和重组质粒转化E.coli.DH5α | 第31页 |
| ·pGBKT7-MaBTB、pGBKT7-MaBTB-MATH和pGBKT7-MaBTB-BTB重组质粒的小量提取 | 第31页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定,双酶切鉴定以及测序验证 | 第31-32页 |
| ·pGBKT7-MaBTB、pGBKT7-MaBTB-MATH和pGBKT7-MaBTB-BTB酵母重组质粒转化酵母菌AH109 | 第32-33页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·转化 | 第32-33页 |
| ·涂平板 | 第33页 |
| 3. 农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第33页 |
| ·番茄的预培养 | 第33页 |
| ·农杆菌介导转化番茄 | 第33页 |
| ·转化后的番茄抗性筛选 | 第33页 |
| 4. 转基因番茄的分子检测 | 第33-36页 |
| ·野生型和转基因番茄的总DNA提取 | 第33-34页 |
| ·转基因番茄的PCR检测 | 第34页 |
| ·转基因番茄Southern blot检测 | 第34页 |
| ·转基因番茄总RNA的提取及cDNA合成 | 第34-35页 |
| ·RT-PCR检测 | 第35页 |
| ·MaBTB基因在转基因番茄果实中表达分析 | 第35-36页 |
| 5. 转基因植株相关生理指标的测定 | 第36页 |
| ·转基因番茄还原糖含量测定 | 第36页 |
| ·转基因番茄维生素C含量测定 | 第36页 |
| ·转基因番茄果实乙烯释放量测定 | 第36页 |
| 6. 荧光定量PCR | 第36-38页 |
| ·荧光定量PCR引物设计 | 第36-37页 |
| ·荧光定量PCR反应体系及反应程序 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-50页 |
| 1. MaBTB蛋白的亚细胞定位 | 第38页 |
| 2. MaBTB基因转录激活分析 | 第38-41页 |
| ·pGBKT7-MaBTB、pGBKT7-MaBTB-MATH和pGBKT7-MaBTB-BTB酵母重组质粒的构建 | 第38-40页 |
| ·MaBTB基因转录激活结果 | 第40-41页 |
| 3. MaBTB基因转化番茄的结果 | 第41-42页 |
| 4. 转MaBTB基因番茄分子检测 | 第42-44页 |
| ·转基因番茄PCR检测 | 第42页 |
| ·转基因番茄Southern检测 | 第42-43页 |
| ·转基因番茄RT-PCR检测 | 第43页 |
| ·MaBTB基因在转基因番茄中的表达 | 第43-44页 |
| 5. 转基因番茄相关生理指标测定 | 第44-46页 |
| ·番茄果实还原糖含量测定 | 第44页 |
| ·番茄果实维生素C含量测定 | 第44-45页 |
| ·番茄果实乙烯释放量测定 | 第45-46页 |
| 6. 番茄果实成熟及品质相关基因的表达 | 第46-50页 |
| ·ACO1基因表达分析 | 第46页 |
| ·ACS2基因表达分析 | 第46-47页 |
| ·E8基因表达分析 | 第47-48页 |
| ·CNR基因表达分析 | 第48页 |
| ·GMP基因表达分析 | 第48-49页 |
| ·GLDH基因表达分析 | 第49-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-54页 |
| 1. MaBTB蛋白定位在细胞核 | 第50页 |
| 2. MaBTB基因转录激活分析 | 第50页 |
| 3. MaBTB基因对果实成熟过程的调控 | 第50-52页 |
| ·MaBTB基因与乙烯生物合成的关系 | 第50-51页 |
| ·MaBTB基因与其它果实成熟相关基因的关系 | 第51-52页 |
| 4. MaBTB基因对番茄果实成熟相关生理指标的影响 | 第52-54页 |
| ·乙烯的释放量 | 第52页 |
| ·还原糖和维生素C | 第52-54页 |
| 第五章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
