| 目录 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一部分 前言 | 第15-20页 |
| 参考文献 | 第17-20页 |
| 第二部分 碱基切除修复基因hMYH和hOGG1变异与结直肠癌发病易感性的关系 | 第20-51页 |
| 1. 材料和方法 | 第20-30页 |
| ·研究对象 | 第20-21页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第21页 |
| ·外周血DNA提取 | 第21-22页 |
| ·hOGG1基因和hMYH基因变异筛查 | 第22-27页 |
| ·引物设计 | 第22-23页 |
| ·hOGG1基因5’UTR突变筛查 | 第23-24页 |
| ·hOGG1基因p.Ser326Cys突变筛查 | 第24-25页 |
| ·hMYH基因p.Gln324His突变筛查 | 第25-26页 |
| ·hMYH基因AluYb8插入筛查 | 第26-27页 |
| ·hOGG1基因5’UTR杂合子测序 | 第27-29页 |
| ·琼脂糖凝胶回收PCR产物 | 第27-28页 |
| ·Bigdye反应 | 第28-29页 |
| ·沉淀步骤 | 第29页 |
| ·统计分析 | 第29-30页 |
| 2. 结果 | 第30-40页 |
| ·hOGG1基因5’UTR突变筛查结果 | 第30-32页 |
| ·hOGG1基因p.Ser326Cys基因分型 | 第32-34页 |
| ·hMYH基因p.Gln324His基因型分析 | 第34-36页 |
| ·AluYb8hMYH插入基因型分析 | 第36-37页 |
| ·AluYb8hMYH插入和hMYH基因p.Gln324His突变在结直肠癌病例对照中联合分析 | 第37-38页 |
| ·hMYH基因p.Gln324His和hOGG1基因p.Ser326Cys突变在结直肠癌病例对照中联合分析 | 第38页 |
| ·AluYb8hMYH和hOGG1基因p.Ser326Cys突变在结直肠癌病例对照中联合分析 | 第38-39页 |
| ·AluYb8hMYH,hMYH基因p.Gln324His和hOGG1基因p.Ser326Cys突变在结直肠癌病例对照中联合分析 | 第39-40页 |
| 3. 讨论 | 第40-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 第三部分 碱基切除修复基因hMYH和hOGG1变异与胃癌的易感性及其功能机制研究 | 第51-81页 |
| 1. 材料和方法 | 第51-61页 |
| ·研究对象 | 第51-52页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第52-53页 |
| ·外周血DNA提取 | 第53页 |
| ·hOGG1基因和hMYH基因突变筛查 | 第53页 |
| ·引物设计 | 第53页 |
| ·hOGG1基因5’UTR突变筛查 | 第53页 |
| ·hOGG1基因p.Ser326Cys突变筛查 | 第53页 |
| ·hMYH基因p.Gln324His突变筛查 | 第53页 |
| ·hOGG1基因5’-UTR变异对基因启动子活性的影响 | 第53-59页 |
| ·质粒构建 | 第53-54页 |
| ·PCR产物与T载体连接 | 第54-55页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 | 第55页 |
| ·大肠杆菌质粒小提 | 第55-56页 |
| ·质粒测序 | 第56页 |
| ·阳性克隆与pGL3-Basic双酶切 | 第56-57页 |
| ·连接反应及转化大肠杆菌 | 第57页 |
| ·连接产物测序鉴定 | 第57页 |
| ·细胞复苏和培养 | 第57-58页 |
| ·细胞转染 | 第58页 |
| ·荧光素酶报告基因检测 | 第58页 |
| ·荧光值计算 | 第58-59页 |
| ·HE染色 | 第59页 |
| ·免疫组织化学染色 | 第59-60页 |
| ·统计分析 | 第60-61页 |
| 2. 结果 | 第61-73页 |
| ·hOGG1基因5’-UTR突变筛查 | 第61-62页 |
| ·hOGG1基因错义突变p.Ser326Cys筛查结果 | 第62-63页 |
| ·hMYH p.Gln324His筛查结果 | 第63页 |
| ·hOGG1基因c.-53G>C和p.Ser326Cys突变联合分析 | 第63-64页 |
| ·hOGG1基因c.-53G>C和hMYH p.Gln324His突变联合分析 | 第64页 |
| ·hMYH基因p.Gln324His和hOGG1基因p.Ser326Cys突变联合分析 | 第64-65页 |
| ·hMYH基因p.Gln324His,hOGG1基因c.-53G>C和p.Ser326Cys突变联合分析 | 第65-66页 |
| ·含c.-53G/C变异hOGG1基因启动子DNA重组质粒的构建 | 第66-67页 |
| ·野生型及突变型hOGG1-pGL3质粒的构建 | 第67-68页 |
| ·c.-53 G>C突变降低hOGG1基因启动子区活性 | 第68-69页 |
| ·hOGG1基因c.-53G>C突变与患者临床病理之间的关系 | 第69-73页 |
| ·hOGG1基因c.-53G>C突变与胃癌分化程度关系 | 第69-70页 |
| ·P53免疫组化染色 | 第70-71页 |
| ·COX-2免疫组化染色 | 第71-72页 |
| ·Ki-67免疫组织化学染色 | 第72-73页 |
| 3. 讨论 | 第73-77页 |
| 参考文献 | 第77-81页 |
| 第四部分 结论 | 第81-83页 |
| 文献综述 | 第83-102页 |
| 参考文献 | 第93-102页 |
| 中英文缩略 | 第102-103页 |
| 博士期间发表论文 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
