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两亲性可降解聚阳离子核酸载体及层层组装的核酸传递系统

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
第一章 文献综述第12-42页
   ·基因治疗概述第12-13页
   ·水溶性聚合物载体第13-29页
     ·聚乙烯亚胺(PEI)第13-17页
     ·聚赖氨酸(PLL)第17-19页
     ·生物可降解聚合物第19-21页
     ·糖类聚合物第21-24页
     ·线型(Linear Poly(amido-amine), PAA)第24-25页
     ·聚甲基丙烯酸酯(Polymethacrylate)第25-27页
     ·聚酰胺胺(PAMAM)第27-29页
   ·两亲性载体第29-37页
     ·脂质体第29-31页
     ·阳离子两亲性聚合物第31-37页
   ·三元复合物载体第37-40页
   ·研究的目的和内容第40-42页
第二章 聚己内酯-接枝-聚甲基丙烯酸-N,N-二甲氨基乙酯的合成及作为基因载体的性质研究第42-72页
   ·引言第42-43页
   ·实验部分第43-51页
     ·实验原料第43-45页
     ·化学试剂的精制第45页
     ·聚己内酯-接枝-聚(甲基丙烯酸-N,N-二甲氨基乙酯) 的制备第45-46页
     ·PCL-g-PDMAEMA NPs 的制备第46页
     ·PCL-g-PDMAEMA 临界聚集浓度的测定第46页
     ·载药PCL-g-PDMAEMA NPs 的制备第46-47页
     ·载药量和包封率的测定第47页
     ·载药聚合物纳米粒的药物释放第47-48页
     ·PCL-g-PDMAEMA NPs/DNA 复合物的制备第48页
     ·聚合物、纳米粒及纳米粒/DNA 复合物的表征第48-49页
     ·PCL-g-PDMAEMA NPs/DNA 复合物的转染效率第49页
     ·PCL-g-PDMAEMA NPs/DNA 复合物的细胞毒性第49-50页
     ·PCL-g-PDMAEMA NPs/DNA 复合物在细胞内的定位第50-51页
   ·结果与讨论第51-71页
     ·PCL-g-PDMAEMA 聚合物的合成与表征第51-57页
     ·PCL-g-PDMAEMA NPs 形态表征及物化性质研究第57-60页
     ·PCL-g-PDMAEMA NPs/DNA 复合物第60-64页
     ·PCL-g-PDMAEMA NPs/DNA 复合物pH 和温度敏感性研究第64-66页
     ·体外转染效率第66-68页
     ·细胞毒性测试第68-69页
     ·细胞对PCL-g-PDMAEMA NPs/DNA 复合物的摄取第69-71页
   ·本章结论第71-72页
第三章 两亲性聚合物mPEG-(PCL-g-PDMAEMA)的合成及基因传递效果的研究第72-88页
   ·引言第72-73页
   ·实验部分第73-76页
     ·实验原料第73页
     ·聚合物的合成第73-74页
     ·聚合物的表征第74页
     ·PECD NPs 及其与DNA 复合物的制备第74页
     ·PECD NPs/DNA 复合物的表征第74页
     ·体外转染效率第74-75页
     ·细胞毒性测试第75页
     ·PECD NPs/DNA 复合物在细胞内的定位第75-76页
   ·结果与讨论第76-87页
     ·mPEG-b-(PCL-g-PDMAEMA) (PECD) 的合成及表征第76-78页
     ·PECD NPs 以及PECD NPs/DNA 复合物的表征第78-80页
     ·体外转染第80-84页
     ·细胞毒性第84-85页
     ·PECD NPs/DNA 复合物在细胞内的分布和定位第85-87页
   ·本章结论第87-88页
第四章 PCL-g-PDMAEA NPs/DNA/PGA-g-PEG 三元复合物作为基因载体的研究第88-111页
   ·引言第88-89页
   ·实验部分第89-95页
     ·实验原料第89页
     ·聚合物的合成第89-90页
     ·聚合物1H NMR 表征第90页
     ·质粒的提取第90页
     ·细胞培养第90页
     ·三元复合物的制备第90-91页
     ·三元复合物的表征第91页
     ·体外转染实验第91-92页
     ·三元复合物在细胞内的摄取第92-93页
     ·三元复合物在细胞内的定位第93页
     ·细胞毒性检测第93-94页
     ·体内转染第94页
     ·组织冰冻切片第94-95页
   ·结果与讨论第95-109页
     ·PCL-g-PDMAEMA NPs/DNA/PGA-g-PEG 三元复合物的表征第95-97页
     ·体外转染效率第97-102页
     ·细胞毒性第102-104页
     ·细胞对复合物的摄取第104-105页
     ·复合物在细胞内的分布第105-107页
     ·体内转染第107-109页
   ·本章结论第109-111页
第五章 多层自组装金纳米粒作为核酸载体的研究第111-127页
   ·引言第111-112页
   ·实验部分第112-116页
     ·实验原料第112页
     ·PAH-Cit 的合成第112页
     ·11-巯基十一烷酸-金纳米粒(MUA-Au NPs) 的制备第112-113页
     ·PEI/PAH-Cit/PEI/MUA-Au NPs 及其与核酸复合物的制备第113页
     ·金纳米粒的表征第113页
     ·金纳米粒/核酸复合物琼脂糖凝胶电泳第113-114页
     ·验证电荷翻转过程第114页
     ·金纳米粒/核酸复合物DNA 转染效率第114-115页
     ·金纳米粒/siRNA 复合物抑制HeLa 细胞Lamin A/C 实验第115页
     ·金纳米粒/核酸复合物的细胞毒性第115页
     ·金纳米粒/核酸复合物在细胞内的定位第115-116页
   ·结果与讨论第116-125页
     ·多层自组装金纳米粒的制备与表征第116-118页
     ·siRNA 和DNA/PEI/PAH-Cit/PEI/MUA-Au NPs 复合物表征第118-119页
     ·PAGE 法验证PAH-Cit 电荷翻转第119-120页
     ·体外转染第120-124页
     ·细胞毒性第124页
     ·细胞对复合物的摄取第124-125页
   ·本章结论第125-127页
第六章 全文结论第127-129页
参考文献第129-156页
发表论文和参加科研情况说明第156-159页
致谢第159页

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