| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·研究背景 | 第8-16页 |
| ·PARP 结构和功能 | 第8-9页 |
| ·PARP 激活与 PAR、NAD+代谢 | 第9-10页 |
| ·DNA 损伤、修复与癌症 | 第10-11页 |
| ·PARP-1 与 DNA 修复 | 第11-12页 |
| ·PARP 与合成致死 | 第12-13页 |
| ·PARP 抑制剂的结构 | 第13-14页 |
| ·PARP 抑制剂的临床进展 | 第14-16页 |
| ·研究意义 | 第16页 |
| ·研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 PARP-1 体外活性测定及 PARP 抑制剂的筛选 | 第17-28页 |
| ·引言 | 第17页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·细胞和待检样品 | 第17页 |
| ·试剂 | 第17-18页 |
| ·仪器设备 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-21页 |
| ·溶液配制 | 第19页 |
| ·PARP-1 制备 | 第19页 |
| ·NAD~+的转化反应 | 第19页 |
| ·PARP-1 的反应条件 | 第19-20页 |
| ·高通量筛选模型评价 | 第20页 |
| ·化合物活性测定 | 第20-21页 |
| ·数据分析 | 第21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-26页 |
| ·NAD~+反应条件 | 第21-22页 |
| ·底物 NAD~+浓度 | 第22-23页 |
| ·激活剂 DNA 浓度 | 第23页 |
| ·PARP-1 酶的稳定性 | 第23-24页 |
| ·PARP-1 酶的用量 | 第24页 |
| ·高通量技术参数评价 | 第24-25页 |
| ·已知 PARP 抑制剂的验证 | 第25页 |
| ·化合物筛选 | 第25-26页 |
| ·PARP 抑制剂的 IC50测定 | 第26页 |
| ·本章小结 | 第26-28页 |
| 第三章 PARP 抑制剂在细胞水平上的活性评价 | 第28-39页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·细胞 | 第28-29页 |
| ·试剂 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-32页 |
| ·溶液配制 | 第30-31页 |
| ·细胞消化处理 | 第31页 |
| ·细胞 ATP 含量检测 | 第31-32页 |
| ·细胞 PAR 检测 | 第32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-37页 |
| ·ATP 含量与 RLU 值的线性关系 | 第32-33页 |
| ·细胞内 ATP 含量与 MNNG 作用时间的关系 | 第33页 |
| ·化合物作用时间对其抑制效率的影响 | 第33-34页 |
| ·AZD2281 对细胞 ATP 消耗的抑制作用 | 第34-35页 |
| ·ATP 消耗法筛选 PARP 抑制剂 | 第35页 |
| ·ATP 消耗法测定化合物的 EC50 | 第35页 |
| ·细胞内 PAR 含量与 MNNG 作用时间的关系 | 第35-36页 |
| ·AZD2281 对细胞 PAR 生成的抑制作用 | 第36-37页 |
| ·化合物 25 号及 47 号对细胞 PAR 生成的抑制作用 | 第37页 |
| ·本章小结 | 第37-39页 |
| 第四章 JF-305 细胞对 AZD2281 的敏感性及化合物的抗癌活性评价 | 第39-49页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·细胞、动物 | 第39页 |
| ·试剂 | 第39-40页 |
| ·仪器 | 第40页 |
| ·原理、方法 | 第40-43页 |
| ·溶液配制 | 第40-41页 |
| ·细胞培养 | 第41页 |
| ·CCK-8 测定细胞活力 | 第41页 |
| ·克隆形成实验 | 第41页 |
| ·DNA 损伤和修复检测 | 第41-42页 |
| ·细胞周期检测 | 第42页 |
| ·细胞核分析 | 第42页 |
| ·肿瘤抑制实验 | 第42-43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-47页 |
| ·JF-305 细胞对 AZD2281 的敏感性 | 第43-44页 |
| ·AZD2281 对 JF-305 细胞的 DNA 损伤及修复功能的影响 | 第44页 |
| ·AZD2281 对 JF-305 细胞周期的影响 | 第44-45页 |
| ·AZD2281 对 JF-305 细胞核的作用 | 第45页 |
| ·AZD2281 对 JF-305 肿瘤的抑制作用 | 第45-46页 |
| ·化合物 47 号对肿瘤细胞的增殖抑制作用 | 第46-47页 |
| ·化合物 47 号对 JF-305 肿瘤的生长抑制 | 第47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 第五章 主要结论与展望 | 第49-50页 |
| ·主要结论 | 第49页 |
| ·不足与展望 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |
