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微小RNA-489通过上皮间充质转化通路调节乳腺癌化疗耐药

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 绪论第9-23页
   ·研究背景第9-21页
     ·肿瘤多药耐药机制第9-14页
     ·miRNA生成与作用机制第14-16页
     ·miRNA与肿瘤多药耐药相关性研究第16-20页
     ·肿瘤耐药逆转药物的开发第20-21页
   ·研究意义第21-22页
   ·研究内容第22-23页
第二章 miRNA与肿瘤化疗耐药关系研究第23-44页
   ·材料第23-26页
     ·细胞株第23页
     ·试剂第23-25页
     ·仪器第25-26页
   ·方法第26-36页
     ·细胞培养第26页
     ·转染miR-489 的模拟物第26页
     ·RNA提取第26-27页
     ·实时荧光定量PCR(real time PCR)检测细胞中miR-489 的表达量第27-28页
     ·检测药物敏感性第28页
     ·原位杂交实验第28-30页
     ·双荧光素酶操作步骤第30-31页
     ·蛋白制备第31页
     ·BCA法测定蛋白样品浓度第31-32页
     ·Western blot实验第32-33页
     ·免疫荧光染色第33-34页
     ·Transwell方法第34页
     ·反转录PCR第34-35页
     ·琼脂糖凝胶电泳第35-36页
     ·靶基因克隆第36页
   ·结果与讨论第36-42页
     ·乳腺癌细胞中miR-489 的表达情况第36-37页
     ·外源性的miR-489 在MCF-7/ADM细胞中的增加情况第37-38页
     ·miR-489 对乳腺癌耐阿霉素细胞株药物敏感性的影响第38页
     ·双荧光报告基因检测结果第38-39页
     ·Smad3 在乳腺癌药物敏感株和药物耐受细胞株中的表达第39页
     ·miR-489 对MCF-7/ADM细胞中Smad3 表达的影响第39-40页
     ·MCF-7/ADM细胞与上皮间充质转化关系的研究第40-41页
     ·miR-489 与MCF-7/ADM细胞上皮间充质的关系第41-42页
   ·本章小结与讨论第42-44页
第三章 miRNA及其靶点在小鼠移植瘤及临床标本上的验证第44-49页
   ·材料第44页
     ·冰冻切片第44页
     ·试剂第44页
     ·仪器第44页
   ·试验方法第44-46页
     ·小鼠移植瘤的接种第44页
     ·小鼠肿瘤及病人样本的处理方法第44-45页
     ·病人样本的收集第45页
     ·免疫组化第45页
     ·原位杂交第45-46页
   ·实验结果第46-48页
     ·上皮间充质标志物及Smad3 在乳腺癌移植瘤中的表达情况第46-47页
     ·miR-489 在乳腺癌移植瘤中的表达情况第47页
     ·上皮间充质标志物及Smad3 在化疗前后临床标本上的研究第47页
     ·miR-489 在化疗前后临床标本上的研究第47-48页
   ·本章小结第48-49页
第四章 总结与展望第49-51页
   ·结论第49页
   ·展望第49-51页
致谢第51-52页
参考文献第52-56页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第56页

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