摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 绪论 | 第9-23页 |
·研究背景 | 第9-21页 |
·肿瘤多药耐药机制 | 第9-14页 |
·miRNA生成与作用机制 | 第14-16页 |
·miRNA与肿瘤多药耐药相关性研究 | 第16-20页 |
·肿瘤耐药逆转药物的开发 | 第20-21页 |
·研究意义 | 第21-22页 |
·研究内容 | 第22-23页 |
第二章 miRNA与肿瘤化疗耐药关系研究 | 第23-44页 |
·材料 | 第23-26页 |
·细胞株 | 第23页 |
·试剂 | 第23-25页 |
·仪器 | 第25-26页 |
·方法 | 第26-36页 |
·细胞培养 | 第26页 |
·转染miR-489 的模拟物 | 第26页 |
·RNA提取 | 第26-27页 |
·实时荧光定量PCR(real time PCR)检测细胞中miR-489 的表达量 | 第27-28页 |
·检测药物敏感性 | 第28页 |
·原位杂交实验 | 第28-30页 |
·双荧光素酶操作步骤 | 第30-31页 |
·蛋白制备 | 第31页 |
·BCA法测定蛋白样品浓度 | 第31-32页 |
·Western blot实验 | 第32-33页 |
·免疫荧光染色 | 第33-34页 |
·Transwell方法 | 第34页 |
·反转录PCR | 第34-35页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第35-36页 |
·靶基因克隆 | 第36页 |
·结果与讨论 | 第36-42页 |
·乳腺癌细胞中miR-489 的表达情况 | 第36-37页 |
·外源性的miR-489 在MCF-7/ADM细胞中的增加情况 | 第37-38页 |
·miR-489 对乳腺癌耐阿霉素细胞株药物敏感性的影响 | 第38页 |
·双荧光报告基因检测结果 | 第38-39页 |
·Smad3 在乳腺癌药物敏感株和药物耐受细胞株中的表达 | 第39页 |
·miR-489 对MCF-7/ADM细胞中Smad3 表达的影响 | 第39-40页 |
·MCF-7/ADM细胞与上皮间充质转化关系的研究 | 第40-41页 |
·miR-489 与MCF-7/ADM细胞上皮间充质的关系 | 第41-42页 |
·本章小结与讨论 | 第42-44页 |
第三章 miRNA及其靶点在小鼠移植瘤及临床标本上的验证 | 第44-49页 |
·材料 | 第44页 |
·冰冻切片 | 第44页 |
·试剂 | 第44页 |
·仪器 | 第44页 |
·试验方法 | 第44-46页 |
·小鼠移植瘤的接种 | 第44页 |
·小鼠肿瘤及病人样本的处理方法 | 第44-45页 |
·病人样本的收集 | 第45页 |
·免疫组化 | 第45页 |
·原位杂交 | 第45-46页 |
·实验结果 | 第46-48页 |
·上皮间充质标志物及Smad3 在乳腺癌移植瘤中的表达情况 | 第46-47页 |
·miR-489 在乳腺癌移植瘤中的表达情况 | 第47页 |
·上皮间充质标志物及Smad3 在化疗前后临床标本上的研究 | 第47页 |
·miR-489 在化疗前后临床标本上的研究 | 第47-48页 |
·本章小结 | 第48-49页 |
第四章 总结与展望 | 第49-51页 |
·结论 | 第49页 |
·展望 | 第49-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第56页 |