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细梗香草病毒病的病原鉴定

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第12-25页
   ·细梗香草第12-14页
     ·细梗香草的生物学特性第12-13页
     ·细梗香草的种类和分布第13页
     ·细梗香草的经济价值第13页
     ·细梗香草的种植现状第13-14页
     ·侵染细梗香草的主要病害第14页
   ·植物病毒病检测与鉴定技术研究进展第14-21页
     ·生物学检测第14-15页
     ·电子显微镜技术第15-17页
       ·负染检测法第16页
       ·超薄切片检测法第16-17页
       ·免疫电镜技术(Immune electron microscopy,IEM)第17页
     ·血清学技术第17-19页
       ·酶联免疫吸附测定(ELISA)第17-18页
       ·免疫胶体金技术(Immunogold-Iabel Assay)第18-19页
     ·分子生物学技术第19-21页
       ·核酸分子杂交技术(Nucleic Acid Hybridiza-tion)第19-20页
       ·聚合酶链式反应技术第20页
       ·实时荧光定量PCR(Real-time Fluorescent Quantitative PCR)技术第20-21页
       ·双连RNA(double-stainedRNA,dsRNA)技术第21页
   ·黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)研究进展第21-24页
     ·CMV基因组结构与功能第22-23页
     ·CMV的分组第23-24页
   ·本研究的立题依据和意义第24-25页
     ·本研究的目的和意义第24页
     ·本研究的研究内容第24-25页
第二章 细梗香草病毒病的鉴定材料与方法第25-33页
   ·材料第25-26页
     ·毒源第25页
     ·生物学测定寄主第25页
     ·菌株与质粒第25页
     ·主要试剂第25-26页
     ·主要仪器第26页
   ·实验方法第26-33页
     ·接种寄主第26页
     ·电镜观察第26页
     ·血清学检测第26-27页
     ·Trizol法提取总RNA第27-28页
     ·植物总RNA的提取第28页
     ·dsRNA的微量提取第28-29页
     ·cDNA合成第29-30页
     ·PCR扩增技术第30页
     ·PCR产物纯化第30页
     ·分子克隆技术第30-31页
       ·连接第30-31页
       ·E.coLi DH5α感受态细胞的制备第31页
       ·转化第31页
       ·菌液PCR鉴定第31页
     ·序列测定及分析第31-33页
第三章 细梗香草病毒病的病原鉴定第33-44页
   ·材料和方法第33-35页
     ·毒源第33页
     ·引物第33页
     ·接种寄主第33-34页
     ·电镜观察第34页
     ·RT-PCR检测第34-35页
       ·总RNA或dsRNA提取第34页
       ·RT-PCR反应第34-35页
       ·PCR产物回收,克隆及序列测定分析第35页
     ·ELISA检测第35页
   ·结果与分析第35-42页
     ·症状观察第35页
     ·电镜观察第35-36页
     ·生物学测定第36-37页
     ·细梗香草病毒病的RT-PCR鉴定第37-41页
       ·常见线状病毒RT-PCR检测第37页
       ·dsRNA RT-PCR检测第37-41页
     ·样品血清学检测第41页
     ·CMV RT-PCR检测第41-42页
   ·小结和结论第42-44页
第四章 CMV龙岩细梗香草分离物(CMV-XC)的基因组全序列测定与分析第44-52页
   ·材料和方法第44-45页
     ·毒源与植物总RNA提取第44页
     ·CMV-XC基因组全长扩增引物和扩增策略第44-45页
     ·RT-PCR反应第45页
     ·PCR产物回收和分子克隆第45页
     ·序列测定第45页
   ·结果和分析第45-51页
     ·CMV-XC分离物基因组全序列扩增结果第45-46页
     ·序列分析第46页
     ·CMV-XC和其他CMV分离物的进化关系第46-51页
       ·CMV-XC与CMV各亚组代表株系的核苷酸序列和蛋白序列同源性比对结果第46-47页
       ·CMV-XC CP蛋白和其他CMV分离物的进化关系第47-49页
       ·CMV-XC RNA3的5'UTR和其他CMV分离物的进化关系第49-51页
   ·小结与讨论第51-52页
参考文献第52-56页
附录一:常用试剂的配制第56-59页
附录二:缩写词和英汉对照第59-60页
致谢第60页

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