摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-25页 |
·细梗香草 | 第12-14页 |
·细梗香草的生物学特性 | 第12-13页 |
·细梗香草的种类和分布 | 第13页 |
·细梗香草的经济价值 | 第13页 |
·细梗香草的种植现状 | 第13-14页 |
·侵染细梗香草的主要病害 | 第14页 |
·植物病毒病检测与鉴定技术研究进展 | 第14-21页 |
·生物学检测 | 第14-15页 |
·电子显微镜技术 | 第15-17页 |
·负染检测法 | 第16页 |
·超薄切片检测法 | 第16-17页 |
·免疫电镜技术(Immune electron microscopy,IEM) | 第17页 |
·血清学技术 | 第17-19页 |
·酶联免疫吸附测定(ELISA) | 第17-18页 |
·免疫胶体金技术(Immunogold-Iabel Assay) | 第18-19页 |
·分子生物学技术 | 第19-21页 |
·核酸分子杂交技术(Nucleic Acid Hybridiza-tion) | 第19-20页 |
·聚合酶链式反应技术 | 第20页 |
·实时荧光定量PCR(Real-time Fluorescent Quantitative PCR)技术 | 第20-21页 |
·双连RNA(double-stainedRNA,dsRNA)技术 | 第21页 |
·黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)研究进展 | 第21-24页 |
·CMV基因组结构与功能 | 第22-23页 |
·CMV的分组 | 第23-24页 |
·本研究的立题依据和意义 | 第24-25页 |
·本研究的目的和意义 | 第24页 |
·本研究的研究内容 | 第24-25页 |
第二章 细梗香草病毒病的鉴定材料与方法 | 第25-33页 |
·材料 | 第25-26页 |
·毒源 | 第25页 |
·生物学测定寄主 | 第25页 |
·菌株与质粒 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-33页 |
·接种寄主 | 第26页 |
·电镜观察 | 第26页 |
·血清学检测 | 第26-27页 |
·Trizol法提取总RNA | 第27-28页 |
·植物总RNA的提取 | 第28页 |
·dsRNA的微量提取 | 第28-29页 |
·cDNA合成 | 第29-30页 |
·PCR扩增技术 | 第30页 |
·PCR产物纯化 | 第30页 |
·分子克隆技术 | 第30-31页 |
·连接 | 第30-31页 |
·E.coLi DH5α感受态细胞的制备 | 第31页 |
·转化 | 第31页 |
·菌液PCR鉴定 | 第31页 |
·序列测定及分析 | 第31-33页 |
第三章 细梗香草病毒病的病原鉴定 | 第33-44页 |
·材料和方法 | 第33-35页 |
·毒源 | 第33页 |
·引物 | 第33页 |
·接种寄主 | 第33-34页 |
·电镜观察 | 第34页 |
·RT-PCR检测 | 第34-35页 |
·总RNA或dsRNA提取 | 第34页 |
·RT-PCR反应 | 第34-35页 |
·PCR产物回收,克隆及序列测定分析 | 第35页 |
·ELISA检测 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-42页 |
·症状观察 | 第35页 |
·电镜观察 | 第35-36页 |
·生物学测定 | 第36-37页 |
·细梗香草病毒病的RT-PCR鉴定 | 第37-41页 |
·常见线状病毒RT-PCR检测 | 第37页 |
·dsRNA RT-PCR检测 | 第37-41页 |
·样品血清学检测 | 第41页 |
·CMV RT-PCR检测 | 第41-42页 |
·小结和结论 | 第42-44页 |
第四章 CMV龙岩细梗香草分离物(CMV-XC)的基因组全序列测定与分析 | 第44-52页 |
·材料和方法 | 第44-45页 |
·毒源与植物总RNA提取 | 第44页 |
·CMV-XC基因组全长扩增引物和扩增策略 | 第44-45页 |
·RT-PCR反应 | 第45页 |
·PCR产物回收和分子克隆 | 第45页 |
·序列测定 | 第45页 |
·结果和分析 | 第45-51页 |
·CMV-XC分离物基因组全序列扩增结果 | 第45-46页 |
·序列分析 | 第46页 |
·CMV-XC和其他CMV分离物的进化关系 | 第46-51页 |
·CMV-XC与CMV各亚组代表株系的核苷酸序列和蛋白序列同源性比对结果 | 第46-47页 |
·CMV-XC CP蛋白和其他CMV分离物的进化关系 | 第47-49页 |
·CMV-XC RNA3的5'UTR和其他CMV分离物的进化关系 | 第49-51页 |
·小结与讨论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
附录一:常用试剂的配制 | 第56-59页 |
附录二:缩写词和英汉对照 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |