| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第一部分 ANGPTL4 基因在大鼠重症急性胰腺炎肺损伤中的表达 | 第16-33页 |
| （一） 前言 | 第16-17页 |
| （二） 材料和方法 | 第17-23页 |
| 1. 实验分组 | 第17页 |
| 2. 主要设备与仪器 | 第17页 |
| 3. 试剂与药品 | 第17-18页 |
| 4. 方法 | 第18-23页 |
| ·动物模型的制备 | 第18页 |
| ·标本采集方法 | 第18页 |
| ·各检测指标及方法 | 第18-23页 |
| ·统计学方法 | 第23页 |
| （三） 结果 | 第23-28页 |
| 1. SAP 大鼠模型制备后，观察大鼠一般情况和组织病理改变 | 第23-24页 |
| ·各组大鼠造模后的一般情况的观察 | 第23页 |
| ·实验动物的大体解剖观察 | 第23页 |
| ·胰腺和肺组织在光镜下的病理改变 | 第23-24页 |
| 2. 各组大鼠动脉血氧分压，血清淀粉酶，ALT 检测结果 | 第24页 |
| 3. 各组大鼠血清 TNF-α, Raf-1 的变化 | 第24-25页 |
| 4. Angptl4、PPAR-γmRNA 基因在肺组织中的表达水平 | 第25-26页 |
| 5. 肺组织中 Angptl4、PPAR-γ蛋白的检测结果 | 第26-27页 |
| 6. 免疫组化胰腺细胞 BCL-2 和肺血管壁上 VEGF表达变化 | 第27-28页 |
| （四） 讨论 | 第28-32页 |
| （五） 结论 | 第32-33页 |
| 第二部分 ANGPTL4 基因在脂多糖刺激大鼠肺微血管内皮细胞中的表达及其对细胞骨架的影响 | 第33-46页 |
| （一） 前言 | 第33-34页 |
| （二） 材料和方法 | 第34-39页 |
| 1. 实验材料 | 第34页 |
| 2. 要设备与仪器 | 第34页 |
| 3. 试剂与药品 | 第34页 |
| 4. 方法 | 第34-39页 |
| ·RPMVECs 复苏和培养 | 第34-35页 |
| ·RPMVECs 鉴定 | 第35页 |
| ·MTT 比色实验检测 LPS 干预后 RPMVEC 的存活率 | 第35页 |
| ·Realtime 定量 PCR 法测定 | 第35-37页 |
| ·Western blot 法检测 Angptl4 蛋白在 RPMVEC 的表达 | 第37-38页 |
| ·细胞培养基 TNF-α检测 | 第38页 |
| ·细胞免疫荧光染色 | 第38-39页 |
| ·统计学方法 | 第39页 |
| （三） 结果 | 第39-43页 |
| 1. RPMVEC 的复苏、培养及鉴定 | 第39页 |
| 2. LPS 对 RPMVEC 存活率和代谢活性的影响 | 第39-40页 |
| 3. RPMVEC 上 Angptl4 的表达及 LPS 对其影响的检测 | 第40-41页 |
| ·Realtime-PCR 法检测 RPMVEC 上 Angptl4 mRNA 的表达及变化 | 第40-41页 |
| ·Western blot 法检测 RPMVEC 上 Angptl4 蛋白的表达及变化 | 第41页 |
| 4. 细胞培养基中的 TNF-α变化 | 第41-42页 |
| 5. 细胞免疫荧光 RPMVEC 上 F-actin 的变化 | 第42-43页 |
| （四） 讨论 | 第43-45页 |
| （五） 结论 | 第45-46页 |
| 第三部分 转染 Angptl4 基因对大鼠肺微血管内皮细胞功能及信号转导通路的影响 | 第46-60页 |
| （一） 前言 | 第46-47页 |
| （二） 材料和方法 | 第47-49页 |
| 1. 实验材料 | 第47页 |
| 2. 主要设备与仪器 | 第47页 |
| 3. 试剂与药品 | 第47-48页 |
| 4. pcDNA3.1-Angptl4-eGFP 质粒合成及测序鉴定 | 第48页 |
| 5. RPMVECs 复苏和培养 | 第48页 |
| 6. 建立 RPMVECs 转染细胞 | 第48页 |
| 7. Realtime 定量 PCR 法测定 | 第48页 |
| 8. Western blot 法检测各项指标蛋白在 RPMVEC 的表达 | 第48-49页 |
| 9. MTT 比色实验检测 RPMVEC 的存活率 | 第49页 |
| 10. 细胞培养基 TNF-α检测 | 第49页 |
| 11. 细胞免疫荧光染色细胞骨架 | 第49页 |
| 12. 实验方案 | 第49页 |
| 13. 统计学方法 | 第49页 |
| （三） 结果 | 第49-57页 |
| 1. pcDNA-3.1-eGFP-Angptl4 质粒载体合成图 | 第49-50页 |
| 2. 细胞转染 48 小时后，RPMVECs 形态 | 第50页 |
| 3. 实时定量 PCR 检测结果 | 第50-51页 |
| ·实时定量 PCR 曲线图 | 第50-51页 |
| ·目的基因的溶解曲线 | 第51页 |
| 4. 基因转染后细胞 Angptl4 蛋白的表达 | 第51-52页 |
| 5. 细胞转染后 RPMVEC 存活率和代谢活性的影响 | 第52-53页 |
| 6. 细胞培养基 TNF-α检测结果 | 第53-54页 |
| 7. 罗丹明-鬼笔环肽染色细胞骨架 F-actin 蛋白 | 第54-55页 |
| 8. 细胞信号通路的机制研究 | 第55-57页 |
| （四） 讨论 | 第57-59页 |
| （五） 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 综述 | 第68-79页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 附录 | 第79-82页 |
| 在学期间科研成绩 | 第82-83页 |
| 个人简介 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
