摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表(ABBREVIATION) | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
·PRRSV目前研究进展 | 第11-12页 |
·SELEX技术和适配子 | 第12-24页 |
·SELEX基本原理 | 第13-14页 |
·初始随机核苷酸文库 | 第14-16页 |
·靶物质 | 第16-17页 |
·筛选过程 | 第17-18页 |
·次级文库生成 | 第18页 |
·克隆和序列分析 | 第18-19页 |
·特异性和亲和性分析 | 第19页 |
·适配子修饰 | 第19-20页 |
·SELEX技术和适配子的优缺点 | 第20-21页 |
·适配子应用及前景 | 第21-24页 |
第二章 研究目的和意义 | 第24-25页 |
第三章 材料与方法 | 第25-37页 |
·实验材料 | 第25-29页 |
·载体与质粒 | 第25-26页 |
·工具酶与主要试剂 | 第26页 |
·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第26-29页 |
·实验方法 | 第29-37页 |
·PRRSV核衣壳蛋白的表达与纯化 | 第29页 |
·初始随机文库的构建及引物合成 | 第29-30页 |
·初始文库通过PCR扩增成双链库 | 第30页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第30-31页 |
·双链文库的回收 | 第31页 |
·不对称PCR扩增ssDNA文库或生物素标记的ssDNA文库 | 第31-32页 |
·单链适配子文库的回收 | 第32页 |
·N蛋白的ssDNA适配子筛选过程 | 第32-33页 |
·ssDNA亚库亲和性测定 | 第33-34页 |
·筛选产物的克隆及鉴定 | 第34-35页 |
·测序及序列分析 | 第35页 |
·适配子亲和性和特异性 | 第35页 |
·适配子与PRRSV N蛋白的剂量依赖关系的确定 | 第35-36页 |
·适配子与PRRSV之间相互作用的鉴定 | 第36-37页 |
第四章 结果与分析 | 第37-48页 |
·PRRSV核衣壳蛋白的表达纯化 | 第37页 |
·适配子初始文库的构建及鉴定 | 第37-38页 |
·双链文库的生成及回收 | 第38-39页 |
·单链文库的生成及回收 | 第39-40页 |
·适配子亚库亲和力测定 | 第40页 |
·筛选产物的克隆 | 第40-42页 |
·测序 | 第42页 |
·序列分析 | 第42-44页 |
·序列比对及碱基组成分析 | 第42-43页 |
·二级结构分析 | 第43-44页 |
·适配子与N蛋白亲和性分析 | 第44-45页 |
·抗原依赖性 | 第45-46页 |
·特异性分析 | 第46页 |
·适配子与PRRSV亲和性鉴定 | 第46-48页 |
第五章 讨论与结论 | 第48-51页 |
·讨论 | 第48-50页 |
·PRRSV N蛋白的纯化 | 第48页 |
·初始随机寡聚核苷酸文库构建及引物设计 | 第48页 |
·次级文库的生成 | 第48-49页 |
·筛选过程 | 第49页 |
·适配子序列分析 | 第49-50页 |
·适配子亲和性和特异性分析 | 第50页 |
·适配子检测病毒分析 | 第50页 |
·结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
附录 | 第57-59页 |
致谢 | 第59页 |