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落叶松IAA受体基因分离与干细胞极性相关miR166及其目标基因功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-14页
表目录第14-15页
图目录第15-16页
第一章 绪论第16-40页
   ·引言第16-19页
     ·研究背景第17-18页
     ·研究目的和意义第18-19页
     ·项目来源与经费支持第19页
   ·国内外研究现状及评述第19-36页
     ·植物胚胎发育的形态建成第19-22页
     ·植物胚胎发育中的生长素调控机理第22-28页
     ·microRNA 在植物胚胎发育中的研究进展第28-32页
     ·miR166 及其目标基因 HD-ZIP III 在植物发育中的研究第32-36页
   ·研究目标和主要研究内容第36-39页
     ·关键的科学问题与研究目标第36-37页
     ·主要研究内容第37-39页
   ·研究技术路线第39-40页
第二章 生长素对体细胞胚发育的影响及落叶松生长素受体基因的克隆和表达分析第40-62页
   ·材料与方法第40-48页
     ·实验材料第40-41页
     ·实验方法第41-48页
   ·实验结果第48-57页
     ·不同 IAA 浓度对原胚团继代增殖的影响第48页
     ·NPA 对原胚团增殖生长的影响第48-49页
     ·NPA 对原胚团胚性胚柄结构的影响第49-50页
     ·NPA 处理对落叶松体细胞胚发育的影响第50-53页
     ·生长素受体基因的全长 cDNA 克隆和序列分析第53-54页
     ·LaAFB1 在落叶松体内的 microRNA 切割产物验证第54页
     ·miR393 介导 LaAFB1 剪切产生次级 siRNA 的预测第54-56页
     ·LaAFB1 和 LaAFB2 在落叶松各器官和体细胞胚发育中的表达模式第56-57页
   ·结果分析第57-60页
     ·生长素在落叶松体细胞胚发生过程中的作用第57-59页
     ·落叶松生长素受体第59页
     ·落叶松 LaAFB1 的转录后调控作用第59-60页
   ·小结第60-62页
第三章 落叶松 miR166 的目标基因 LaHDZ31-34 的克隆和表达分析第62-78页
   ·材料和方法第62-68页
     ·实验材料第62-63页
     ·实验方法第63-68页
   ·实验结果第68-74页
     ·落叶松 LaHDZ31-34 全长 cDNA 克隆第68-69页
     ·基因序列分析第69-71页
     ·分子进化树构建第71-72页
     ·HD-ZIP III 的 microRNA 切割位点验证第72-73页
     ·LaHDZ31-34 在落叶松体细胞胚发育中的表达模式第73-74页
   ·结果分析第74-76页
     ·针叶树中的 HD-ZIP III 基因家族第74-75页
     ·LaHDZ31-34 表达模式和落叶松体细胞胚极性建成第75-76页
     ·体细胞胚发育过程中 miR166 对 LaHDZ31-34 的转录后调控第76页
   ·小结第76-78页
第四章 miR166a 在落叶松体细胞胚发育中的功能分析第78-99页
   ·材料与方法第78-84页
     ·落叶松体细胞胚及遗传转化受体材料的培养第78页
     ·植物超表达载体构建第78-80页
     ·农杆菌介导的落叶松胚性细胞的遗传转化第80-83页
     ·转基因落叶松体细胞胚的表型及显微结构观察第83页
     ·qRT-PCR第83-84页
   ·实验结果第84-95页
     ·miR166 编码基因在落叶松器官水平及体细胞胚发生中的表达模式第84-87页
     ·植物超表达载体和转 LaMIR166a 基因抗性细胞的获得第87页
     ·转 LaMIR166a 落叶松胚性细胞系的分子检测第87-90页
     ·过表达 miR166a 落叶松体细胞胚的表型分析第90-95页
   ·结果分析第95-98页
     ·植物中的 miR165/166 基因第95-96页
     ·miR166 对其目标基因的转录后调控第96页
     ·miR166a 在落叶松体细胞胚发育中的功能第96-98页
   ·小结第98-99页
第五章 结论与讨论第99-102页
   ·结论第99页
   ·讨论第99-101页
   ·展望第101-102页
参考文献第102-117页
附录第117-120页
在读期间的学术研究第120-121页
致谢第121页

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