| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| 1 生长抑素基因疫苗研究进展与存在的主要问题 | 第14-18页 |
| ·生长抑素基因疫苗对动物的免疫效力研究 | 第14-16页 |
| ·生长抑素基因疫苗的安全性研究 | 第16-17页 |
| ·生长抑素基因疫苗存在的问题 | 第17-18页 |
| 2 原核真核双表达系统的研究进展 | 第18-19页 |
| ·原核、真核单表达系统的特点 | 第18页 |
| ·原核真核双表达系统的类型 | 第18-19页 |
| ·原核真核双表达系统作用机理推测 | 第19页 |
| ·原核真核双表达基因疫苗的研究进展 | 第19页 |
| 3 启动子的研究进展 | 第19-22页 |
| ·原核启动子类型 | 第20页 |
| ·真核启动子类型 | 第20-21页 |
| ·启动子增强外源基因的表达 | 第21-22页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 生长抑素原核真核双表达质粒的构建和筛选 | 第23-34页 |
| 1 前言 | 第23页 |
| 2 材料 | 第23-24页 |
| ·质粒、菌株与细胞 | 第23-24页 |
| ·工具酶及试剂 | 第24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·试剂的配制 | 第24页 |
| 3 方法 | 第24-29页 |
| ·原核启动子Ptrc序列的设计 | 第24-25页 |
| ·生长抑素原核真核双表达质粒的构建 | 第25-29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-32页 |
| ·启动子Ptrc检测 | 第29-30页 |
| ·含Ptrc的PCR产物检测与回收 | 第30页 |
| ·质粒χ6097(pPtrc-S/2SS-M4GFP-asd)鉴定 | 第30-31页 |
| ·质粒C500(pPtrc-S/2SS-M4GFP-asd)鉴定 | 第31-32页 |
| 5 讨论 | 第32-34页 |
| ·原核启动子结构为原核真核双表达提供理论基础 | 第32页 |
| ·以减毒猪霍乱沙门氏菌为载体构建生长抑素原核真核双表达质粒 | 第32-33页 |
| ·正确筛选质粒C500(pPtrc-S/2SS-M4GFP-asd)为评估其免疫效力奠定基础 | 第33-34页 |
| 第三章 生长抑素原核真核双表达质粒的表达与鉴定 | 第34-44页 |
| 1 前言 | 第34页 |
| 2 材料 | 第34-35页 |
| ·质粒、菌株与细胞 | 第34页 |
| ·工具酶及试剂 | 第34-35页 |
| ·仪器设备 | 第35页 |
| ·试剂的配制 | 第35页 |
| 3 方法 | 第35-38页 |
| ·质粒pPtrc-S/2SS-M4GFP-asd的真核表达能力测定 | 第35-37页 |
| ·原核蛋白表达能力测定 | 第37-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-42页 |
| ·质粒pPtrc-S/2SS-M4GFP-asd在真核细胞中的表达 | 第38-40页 |
| ·融合蛋白在沙门氏菌C500中的原核表达 | 第40-42页 |
| 5 讨论 | 第42-44页 |
| ·pPtrc-S/2SS-M4GFP-asd质粒可实现真核表达 | 第42-43页 |
| ·减毒猪霍乱沙门氏菌C500可原核表达SS融合蛋白 | 第43-44页 |
| 第四章 原核真核双表达生长抑素DNA免疫对小鼠生长及免疫应答的影响 | 第44-56页 |
| 1 前言 | 第44页 |
| 2 材料 | 第44-45页 |
| ·质粒和菌株 | 第44-45页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·实验试剂及配制 | 第45页 |
| 3 方法 | 第45-48页 |
| ·疫苗制备及其免疫方法 | 第45-46页 |
| ·小鼠的饲养管理、周称重和周耗料量记录 | 第46页 |
| ·小鼠血样的收集 | 第46-47页 |
| ·生长抑素IgG抗体效价ELISA检测 | 第47页 |
| ·生长抑素IgG1和IgG2α抗体分型效价检测 | 第47页 |
| ·生长抑素(SS)检测 | 第47页 |
| ·猪霍乱沙门氏菌C500(C500)抗体ELISA检测 | 第47-48页 |
| ·数据分析 | 第48页 |
| 4 结果与分析 | 第48-53页 |
| ·增重效果和饲料报酬 | 第48-49页 |
| ·SSIgG、IgG1和IgG2α抗体水平 | 第49-51页 |
| ·SS分泌水平 | 第51-52页 |
| ·抗C500抗体水平检测 | 第52-53页 |
| 5 讨论 | 第53-56页 |
| ·原核真核双表达质粒增强免疫应答、提高个体增重和饲料报酬 | 第53-54页 |
| ·原核真核双表达基因疫苗倾向于Th2型免疫应答 | 第54页 |
| ·减毒猪霍乱沙门氏菌C500促进免疫应答 | 第54-56页 |
| 全文总结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
