中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-10页 |
符号说明 | 第10-18页 |
第一部分 综述 | 第18-58页 |
第一章 骨骼与骨代谢 | 第18-40页 |
1 骨骼 | 第18-19页 |
2 骨骼内的细胞 | 第19-32页 |
·骨细胞 | 第19-21页 |
·成骨细胞 | 第21页 |
·破骨细胞 | 第21-29页 |
·成骨细胞与破骨细胞的联系 | 第29-31页 |
·骨骼重建及调控 | 第31-32页 |
3 OPG,RANKL,RANK与骨代谢 | 第32-40页 |
·OPG对破骨细胞活性抑制及其在骨骼疾病中的运用 | 第32-35页 |
·RANKL/RANK在破骨细胞分化及活化和凋亡中的信号转导机制 | 第35-40页 |
第二章 MAPK及Ca~(2+)信号通路与破骨细胞 | 第40-45页 |
1 MAPK信号通路与破骨细胞 | 第40-41页 |
·MAPK信号通路 | 第40页 |
·MAPK信号通路在破骨细胞分化、活化及存活的作用 | 第40-41页 |
2 Ca~(2+)信号通路与破骨细胞 | 第41-45页 |
·破骨细胞中Ca~(2+)信号通路的激活 | 第41-43页 |
·CaMKⅡ激酶在破骨细胞分化中的作用 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-58页 |
第二部分 实验研究 | 第58-112页 |
第一章 OPG对破骨细胞分化、活化及凋亡的影响 | 第58-75页 |
1 材料和方法 | 第58-59页 |
·实验动物 | 第58页 |
·主要仪器 | 第58页 |
·主要化学试剂 | 第58页 |
·破骨细胞分离及培养 | 第58-59页 |
·破骨细胞鉴定 | 第59页 |
·统计分析 | 第59页 |
2 结果 | 第59-72页 |
·OPG对体外培养鸭胚破骨细胞数量的影响 | 第59-65页 |
·OPG对鸭胚破骨细胞骨架结构与胞核的影响 | 第65-66页 |
·OPG对鸭胚破骨细胞骨吸收活性的影响 | 第66-72页 |
3 讨论 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-75页 |
第二章 OPG抑制破骨细胞分化成熟的机理 | 第75-92页 |
1 材料和方法 | 第75-79页 |
·实验细胞株 | 第75页 |
·主要仪器 | 第75页 |
·主要化学试剂 | 第75页 |
·RAW264.7细胞培养 | 第75-76页 |
·MTT法分析OPG对RAW264.7细胞活力的影响 | 第76页 |
·破骨细胞TRAP染色及计数 | 第76页 |
·破骨细胞骨架F-actin染色 | 第76页 |
·牛皮质骨片吸收陷窝的检测 | 第76-77页 |
·实时荧光定量PCR技术检测破骨细胞分化及活化相关基因表达水平 | 第77-79页 |
·统计分析 | 第79页 |
2 结果 | 第79-87页 |
·OPG对RAW264.7细胞活力的影响 | 第79页 |
·OPG对破骨细胞分化的抑制作用 | 第79-80页 |
·OPG对破骨细胞F-actin环形成的影响 | 第80-81页 |
·OPG对破骨细胞骨吸收能力的影响 | 第81-82页 |
·OPG对破骨细胞分化与活化过程中相关基因表达水平的影响 | 第82-87页 |
3 讨论 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-92页 |
第三章 OPG抑制破骨细胞分化成熟的MAPK信号转导机制 | 第92-103页 |
1 材料和方法 | 第92-93页 |
·实验细胞株 | 第92页 |
·主要仪器 | 第92页 |
·主要化学试剂 | 第92页 |
·RAW264.7细胞培养及分组 | 第92-93页 |
·Western blot法检测MAPK信号通路中关键信号蛋白的变化 | 第93页 |
2 结果 | 第93-96页 |
·OPG作用不同时间对MAPK信号通路的影响 | 第93-94页 |
·不同浓度OPG对MAPK信号通路的影响 | 第94-95页 |
·MAPK信号通路特异性抑制剂对信号蛋白磷酸化水平的影响 | 第95-96页 |
3 讨论 | 第96-100页 |
参考文献 | 第100-103页 |
第四章 OPG抑制破骨细胞分化成熟的Ca~(2+)信号转导机制 | 第103-112页 |
1 材料和方法 | 第103-104页 |
·实验细胞株 | 第103页 |
·主要仪器 | 第103页 |
·主要化学试剂 | 第103页 |
·RAW264.7细胞培养及分组 | 第103-104页 |
·流式细胞术(flow cytometry)测定破骨细胞分化过程中的[Ca~(2+)]_i | 第104页 |
·Western blot法检测破骨细胞分化过程中CaMKⅡ激酶的磷酸化水平 | 第104页 |
·统计分析 | 第104页 |
2 结果 | 第104-107页 |
·OPG与2-APB对破骨细胞分化过程中[Ca~(2+)]_i的影响 | 第104-106页 |
·OPG与KN93对破骨细胞分化过程中CaMKⅡ激酶磷酸化水平的影响 | 第106-107页 |
3 讨论 | 第107-109页 |
参考文献 | 第109-112页 |
全文结论 | 第112-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第114-115页 |