| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-19页 |
| ·副猪嗜血杆菌概述 | 第13-16页 |
| ·病原学特点 | 第13-14页 |
| ·发病机理 | 第14-15页 |
| ·流行病学特点 | 第15-16页 |
| ·H.parasuis 感染的诊断方法的研究进展 | 第16页 |
| ·H.parasuis 与毒力相关蛋白的研究进展 | 第16-18页 |
| ·研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 H.parasuis MAb 的筛选及鉴定 | 第19-26页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·细胞、菌株和实验动物 | 第19页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-22页 |
| ·动物的免疫 | 第19-20页 |
| ·间接 ELISA 检测方法的建立 | 第20页 |
| ·SP2/0 细胞的培养 | 第20页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第20页 |
| ·脾细胞的制备及细胞融合 | 第20-21页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选与克隆 | 第21页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的保种和复苏 | 第21页 |
| ·MAb 腹水的制备及效价测定 | 第21页 |
| ·MAb 亚型的鉴定 | 第21-22页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体计数 | 第22页 |
| ·MAb Western blot 鉴定 | 第22页 |
| ·实验结果 | 第22-24页 |
| ·间接 ELISA 方法最佳工作条件的建立 | 第22-23页 |
| ·杂交瘤细胞株的制备及 MAb 亚型的鉴定 | 第23页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第23页 |
| ·杂交瘤细胞染色体计数结果 | 第23-24页 |
| ·MAb Western blot 检测 | 第24页 |
| ·讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 MAb 1B3 识别蛋白的捕获及抗原表位的初步定位 | 第26-33页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-29页 |
| ·MAb 1B3 免疫沉淀实验（IP） | 第26页 |
| ·免疫印迹分析 | 第26页 |
| ·MAb 1B3 识别蛋白的质谱鉴定 | 第26页 |
| ·MAb 1B3 的纯化 | 第26-27页 |
| ·肽库的第 1 轮淘选 | 第27页 |
| ·噬菌体的扩增 | 第27页 |
| ·噬菌体的滴度测定 | 第27页 |
| ·噬菌体的第 2、3 轮淘选 | 第27-28页 |
| ·测序模板制备及其序列测定 | 第28页 |
| ·噬菌体 ELISA | 第28页 |
| ·HPS-5 的 oppA 基因的测序 | 第28-29页 |
| ·抗原表位的初步定位 | 第29页 |
| ·结果 | 第29-31页 |
| ·菌体蛋白的 IP 及 Western blot 鉴定 | 第29页 |
| ·质谱鉴定 | 第29-30页 |
| ·淘选产率 | 第30页 |
| ·噬菌体 ELISA 检测结果 | 第30-31页 |
| ·HPS-5 的 oppA 基因的测序 | 第31页 |
| ·DNA 序列测定及表位分析 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第四章 OppA 蛋白的反应原性验证 | 第33-38页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·细胞、菌株 | 第33页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-34页 |
| ·oppA 基因片段的克隆 | 第33页 |
| ·pET-oppA 重组质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·pET-oppA 重组蛋白的原核表达及 Western blot 鉴定 | 第34页 |
| ·抗原表位的精确定位及表位多肽的反应原性检测 | 第34页 |
| ·OppA 蛋白的一致性分析 | 第34页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·oppA 基因的扩增 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第35-36页 |
| ·抗原表位的精确定位及表位多肽的反应原性检测 | 第36页 |
| ·OppA 蛋白的一致性分析 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第五章 全文结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 作者简历 | 第45页 |
