| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-20页 |
| ·油菜素内酯 | 第11-12页 |
| ·TCP背景介绍 | 第12-16页 |
| ·衰老背景介绍 | 第16-20页 |
| ·与程序性死亡相关的叶片衰老 | 第16-17页 |
| ·叶片衰老的研究方法 | 第17页 |
| ·叶片衰老的分子调控机制 | 第17-20页 |
| 第二章 实验方法 | 第20-32页 |
| ·构建TCP15转基因拟南芥植株35S：TCP15-SRDX | 第20-26页 |
| ·培养拟南芥幼苗,提取RNA反转录为cDNA | 第20页 |
| ·两轮PCR克隆目的基因,电泳做胶回收 | 第20-21页 |
| ·琼脂糖电泳,观察PCR克隆结果并做胶回收 | 第21页 |
| ·BP反应 | 第21页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第21-22页 |
| ·转化大肠杆菌感受态 | 第22页 |
| ·菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第22页 |
| ·菌种的保存及质粒的提取 | 第22-23页 |
| ·LR反应 | 第23页 |
| ·LR反应产物转化感受态大肠杆菌 | 第23页 |
| ·菌落PCR鉴定阳性克隆 | 第23页 |
| ·菌种的保存及质粒的提取 | 第23-24页 |
| ·感受态农杆菌GV3.101的转化 | 第24页 |
| ·农杆菌菌落PCR鉴定阳性克隆保存菌种、扩大繁殖 | 第24页 |
| ·浸花法将外源基因导入植物基因组筛选转基因植物 | 第24页 |
| ·筛选转基因植株 | 第24页 |
| ·CTAB法提取拟南芥基因组DNA | 第24-25页 |
| ·PCR鉴定转基因是否成功 | 第25页 |
| ·分株收取转基因植株的种子 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR检测TCP15转基因植株IAMT1的变化 | 第26页 |
| ·培养拟南芥幼苗,提取RNA,反转录为cDNA | 第26页 |
| ·PCR检测IAMT1的变化 | 第26页 |
| ·叶片原生质制各及蛋白亚细胞定位观察 | 第26-27页 |
| ·叶片原生质制各 | 第26-27页 |
| ·DAPI染色 | 第27页 |
| ·荧光显微镜观察 | 第27页 |
| ·tcp15基因型及基因敲除情况的鉴定 | 第27-28页 |
| ·CTAB法提取拟南芥基因组DNA | 第27页 |
| ·PCR鉴定tcp15的纯杂合 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR验证TCP15是否完全敲除 | 第28页 |
| ·构建TCP22转基因拟南芥植株 | 第28-29页 |
| ·细胞衰老死亡检测实验 | 第29页 |
| ·DAB染色 | 第29页 |
| ·台盼蓝染色 | 第29页 |
| ·TCP22转基因植株中关于细胞死亡基因的RT-PCR | 第29页 |
| ·TCP22：GUS幼苗染色 | 第29-30页 |
| ·种子的消毒灭菌 | 第29-30页 |
| ·种种子于1/2MS培养基上 | 第30页 |
| ·GUS染色 | 第30页 |
| ·TCP22亚细胞定位观察 | 第30-31页 |
| ·35S：TCP22-GFP种子的消毒灭菌 | 第30页 |
| ·种种子于1/2MS培养基上 | 第30页 |
| ·PI染色观察 | 第30-31页 |
| ·光照处理实验 | 第31页 |
| ·种子消毒灭菌 | 第31页 |
| ·种种子于1/2MS培养基 | 第31页 |
| ·光照处理 | 第31页 |
| ·tcp22基因型及基因敲除情况的鉴定 | 第31-32页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第32-57页 |
| ·TCP15功能的研究 | 第32-39页 |
| ·TCP15转基因植株的具体表型 | 第32-37页 |
| ·TCP15的亚细胞定位 | 第37页 |
| ·TCP15单突变体表型 | 第37-39页 |
| ·TCP22基因功能的研究 | 第39-57页 |
| ·TCP22转基因植株的具体表型 | 第39-47页 |
| ·与衰老相关基因在转基因植株中表达水平的变化 | 第47-48页 |
| ·TCP22的组织表达位置 | 第48-50页 |
| ·TCP22的亚细胞定位 | 第50页 |
| ·TCP22所引起的叶片的提前衰老死亡与光的关系 | 第50-54页 |
| ·TCP22单突变体表型 | 第54-57页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第57-60页 |
| ·TCP15功能的研究 | 第57页 |
| ·TCP22功能的研究 | 第57-60页 |
| 附录 | 第60-73页 |
| ·引物序列 | 第60-63页 |
| ·克隆基因所需的引物(附带GATEWAY部分attB序列) | 第60-61页 |
| ·RT-PCR引物 | 第61-62页 |
| ·鉴定T-DNA插入的种子引物 | 第62-63页 |
| ·各种PCR体系及条件 | 第63-64页 |
| ·溶液配方 | 第64-68页 |
| ·制备感受态大肠杆菌所需溶液及培养基配方 | 第64-65页 |
| ·1/2MS固体培养基配方 | 第65页 |
| ·提质粒溶液配方 | 第65页 |
| ·叶片原生质体的制备溶液配方 | 第65-66页 |
| ·GUS染色溶液配方 | 第66-67页 |
| ·DAB染色溶液配方 | 第67页 |
| ·台盼蓝染色 | 第67页 |
| ·CTAB法提取植物基因组DNA的溶液配方 | 第67页 |
| ·各种抗生素的母液浓度及工作浓度 | 第67-68页 |
| ·利用GATEWAY方法构建转基因拟南芥的载体 | 第68-73页 |
| 参考文献 | 第73-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 个人简介 | 第80页 |
