| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-61页 |
| §1.1 传统PCR简介 | 第11-12页 |
| §1.2 荧光实时定量PCR简介 | 第12-26页 |
| §1.2.1 非特异性荧光染料 | 第13-15页 |
| §1.2.2 特异性荧光探针 | 第15-26页 |
| §1.2.2.1 水解探针(TaqMan probe) | 第15-17页 |
| §1.2.2.2 分子信标(molecular beacon) | 第17-21页 |
| §1.2.2.3 杂交探针(hybridization probe) | 第21-23页 |
| §1.2.2.4 复合探针(complex probe) | 第23-26页 |
| §1.3 微流控芯片PCR简介 | 第26-37页 |
| §1.3.1 微反应室型(micro-chamber) | 第27-30页 |
| §1.3.2 连续流型(continuous-flow) | 第30-33页 |
| §1.3.3 液滴型(droplet) | 第33-37页 |
| §1.4 MicroRNA检测方法 | 第37-47页 |
| §1.4.1 经典方法——Northern blot杂交检测法 | 第37-38页 |
| §1.4.2 基于扩增反应的检测法 | 第38-42页 |
| §1.4.2.1 实时荧光定量PCR检测 | 第38-40页 |
| §1.4.2.2 滚环扩增(rolling circle amplification,RCA) | 第40-41页 |
| §1.4.2.3 基因测序法 | 第41-42页 |
| §1.4.3 基于标记技术的直接检测法 | 第42-45页 |
| §1.4.3.1 纳米粒子标记法 | 第42-43页 |
| §1.4.3.2 荧光标记法 | 第43-45页 |
| §1.4.4. 微阵列芯片和微流控技术应用于miRNA检测 | 第45-47页 |
| §1.5 小结 | 第47-49页 |
| §1.6 参考文献 | 第49-61页 |
| 第二章 基于茎环探针连接反应与SYBR Green实时定量PCR技术的纳升级液滴阵列microRNA检测系统 | 第61-83页 |
| §2.1 引言 | 第61-62页 |
| §2.2 实验部分 | 第62-69页 |
| §2.2.1 实验材料 | 第62-63页 |
| §2.2.2 实验装置 | 第63-67页 |
| §2.2.3 实验操作 | 第67-69页 |
| §2.2.3.1 Total RNA提取 | 第67页 |
| §2.2.3.2 茎环探针连接反应 | 第67-68页 |
| §2.2.3.3 SYBR Green实时定量PCR检测 | 第68-69页 |
| §2.2.3.4 芯片清洗与保存 | 第69页 |
| §2.2.3.5 数据处理方法 | 第69页 |
| §2.3 结果与讨论 | 第69-78页 |
| §2.3.1 连接酶的选择 | 第69-72页 |
| §2.3.2 SYBR Green I用量的优化 | 第72-74页 |
| §2.3.3 液滴PCR体系的性能分析 | 第74-76页 |
| §2.3.4 对小鼠组织中mir-122表达量的测定 | 第76-78页 |
| §2.4 结论 | 第78-79页 |
| §2.5 参考文献 | 第79-83页 |
| 附录 | 第83页 |
