摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1 引言 | 第12页 |
2 钾离子在植物体内的生理功能 | 第12-13页 |
3 高等植物钾离子转运蛋白的种类 | 第13页 |
4 高等植物的KUP/HAK/KT高亲和钾离子转运体家族 | 第13-14页 |
5 水稻中的HAK家族介绍 | 第14-18页 |
6 钾离子与对糖转运蛋白的影响 | 第18页 |
7 钾离子与镁离子之间的关系 | 第18-19页 |
8 研究目的与意义 | 第19-20页 |
第二章 水稻HAK家族基因表达模式分析 | 第20-26页 |
1 引言 | 第20页 |
2 材料与方法 | 第20-23页 |
·水稻材料的获得 | 第20-21页 |
·引物设计 | 第21页 |
·植物总RNA提取工作 | 第21-22页 |
·Real-time PCR检测表达情况 | 第22-23页 |
·半定量RT-PCR检测基因表达情况 | 第23页 |
3 结果与分析 | 第23-25页 |
·荧光定量PCR检测基因缺钾诱导的表达情况 | 第23-24页 |
·半定量RT-PCR检测基因缺钾诱导不同时间的表达情况 | 第24-25页 |
4 讨论 | 第25-26页 |
第三章 水稻HAK家族基因异源体系中功能验证 | 第26-38页 |
1 引言 | 第26页 |
2 实验材料与方法 | 第26-31页 |
·酵母菌种和表达载体的获得 | 第26-27页 |
·表达载体的构建 | 第27-29页 |
·酵母感受态细胞的制备及质粒转化 | 第29页 |
·OsHAK1、OsHAK16、OsHAK11和OsHAK12在酵母突变体中的功能鉴定 | 第29-31页 |
3 实验结果 | 第31-36页 |
·以OsHAK16为例表示载体构建结果 | 第31-32页 |
·菌株R5421不同钾离子条件下的生长状况 | 第32-34页 |
·菌株AXT3不同钠离子离子条件下的生长状况 | 第34-35页 |
·不同pH条件下含有OsHAK1的菌株生长情况 | 第35-36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
第四章 OHAK1的生物信息学分析及水稻中超表达效果 | 第38-46页 |
1 引言 | 第38页 |
2 材料与方法 | 第38-42页 |
·氨基酸序列与跨膜拓扑模型分析 | 第38页 |
·实验材料 | 第38-39页 |
·水稻总DNA的提取 | 第39页 |
·Southern印迹杂交 | 第39-41页 |
·植物总RNA的提取及反转录合成cDNA | 第41页 |
·半定量RT-PCR检测 | 第41-42页 |
·生理指标的测定 | 第42页 |
3 实验结果 | 第42-45页 |
·OsHAK1氨基酸序列及跨膜区域分析 | 第42-43页 |
·检测超表达材料不同株系以及超表达效果 | 第43页 |
·超表达材料与野生型水稻相比表型上的差异 | 第43-44页 |
·超表达材料和野生型水稻地上部和地下部K和Na含量差异 | 第44-45页 |
4 讨论 | 第45-46页 |
第五章 水稻中OsHAK1的时空表达特点 | 第46-50页 |
1 引言 | 第46-47页 |
2 材料与方法 | 第47-48页 |
·水稻转基因材料的准备 | 第47页 |
·GUS染色鉴定转基因阳性苗 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-49页 |
·部分转基因阳性苗GUS染色结果 | 第48页 |
·微镜下观察OsHAK1的表达部位 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-50页 |
全文总结 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录:缺钾处理对糖、镁转运蛋白基因表达的影响 | 第58-64页 |
附表 | 第64-76页 |
在读期间发表的论文 | 第76-78页 |
致谢 | 第78页 |