| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略语 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-30页 |
| 第一章 DNA甲基化及检测方法 | 第14-27页 |
| 1 DNA甲基化概述 | 第14-16页 |
| ·DNA甲基化 | 第14-15页 |
| ·DNA甲基化动态变化与胚胎发育 | 第15页 |
| ·DNA甲基化异常与肿瘤 | 第15-16页 |
| 2 全基因组DNA甲基化水平检测方法 | 第16-19页 |
| ·高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC) | 第16-17页 |
| ·高效毛细管电泳（high-performance Capillary electrophoretc, HPCE) | 第17-18页 |
| ·薄层色谱(thin layer chromatography,TLC) | 第18页 |
| ·酶或化学分析方法 | 第18-19页 |
| ·免疫化学法 | 第19页 |
| 3 特定位点DNA甲基化检测方法 | 第19-22页 |
| ·基于亚硫酸盐转化的方法 | 第19-21页 |
| ·基于甲基化敏感的限制性内切酶的方法 | 第21页 |
| ·测序技术 | 第21-22页 |
| 4 MBD蛋白与DNA甲基化检测 | 第22-27页 |
| ·MBD与MBD蛋白的发现 | 第22-23页 |
| ·MBD蛋白家族成员简介 | 第23-24页 |
| ·利用MBD蛋白检测DNA甲基化的方法 | 第24-27页 |
| 第二章 FTO研究进展 | 第27-30页 |
| 1 FTO基因与FTO蛋白 | 第27-29页 |
| ·FTO基因的结构与特性 | 第27页 |
| ·FTO蛋白的结构与可能的功能 | 第27-29页 |
| 2 禽类FTO的研究 | 第29页 |
| 3 重组蛋白原核表达系统 | 第29-30页 |
| 第二篇 试验研究 | 第30-62页 |
| 第三章 MBD1重组蛋白检测全基因组DNA甲基化水平方法的建立 | 第30-40页 |
| 1 材料与方法 | 第30-35页 |
| ·载体、菌株 | 第30页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第30-31页 |
| ·主要溶液 | 第31-32页 |
| ·Lambda DNA的甲基化 | 第32页 |
| ·MBD1重组蛋白的表达、复性与纯化 | 第32-34页 |
| ·狭缝转印分析 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-39页 |
| ·MBD1重组蛋白提纯鉴定 | 第35-36页 |
| ·标准曲线 | 第36-37页 |
| ·饱和曲线 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 检测方法的应用与评价 | 第40-45页 |
| 1 材料与方法 | 第40-41页 |
| ·载体、菌株 | 第40页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第40页 |
| ·主要溶液 | 第40页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
| ·MBD1重组蛋白的表达、复性与纯化 | 第41页 |
| ·狭缝转印分析 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-44页 |
| ·猪全基因组DNA甲基化程度的组织、品种差异 | 第41-42页 |
| ·母体蛋白限饲对子代梅山猪肝脏甲基化水平的影响 | 第42页 |
| ·鸡全基因组DNA甲基化程度的组织特异性与发育变化 | 第42页 |
| ·检验方法的准确性验证 | 第42-44页 |
| 3 讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 FTO蛋白原核表达及多克隆抗体制备 | 第45-62页 |
| 1 材料与方法 | 第45-55页 |
| ·载体、菌株及实验动物 | 第45页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第45-48页 |
| ·pColdI-FTO质粒构建 | 第48-52页 |
| ·FTO重组蛋白的表达 | 第52页 |
| ·FTO重组蛋白纯化 | 第52-53页 |
| ·FTO多克隆抗体制备 | 第53-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-60页 |
| ·pColdI-FTO质粒构建 | 第55-56页 |
| ·FTO重组蛋白的表达 | 第56页 |
| ·FTO重组蛋白表达条件的优化与纯化 | 第56-57页 |
| ·抗体效价与特异性检测 | 第57-58页 |
| ·鸡FTO蛋白组织特异性检测 | 第58-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 全文总结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
