摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
引言 | 第12-14页 |
第一部分 文献综述 | 第14-20页 |
1 土壤重金属污染 | 第14页 |
2 镉的毒害作用 | 第14-16页 |
·镉对植物生长发育的影响 | 第14页 |
·镉对植物光合和呼吸作用的影响 | 第14-15页 |
·镉对细胞结构影响 | 第15-16页 |
·镉对酶系统的影响 | 第16页 |
3 植物对Cd的胁迫响应机制 | 第16-18页 |
·抗氧化系统 | 第16页 |
·细胞壁的沉淀作用 | 第16-17页 |
·液泡区室化 | 第17页 |
·络合作用 | 第17-18页 |
4 植物镉胁迫的分子遗传机制 | 第18-19页 |
5 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二部分 研究报告 | 第20-66页 |
第一章 萝卜根部镉吸收积累的细胞学机制研究 | 第20-30页 |
摘要 | 第20-21页 |
1 材料与方法 | 第21-22页 |
·植物材料与生长状况 | 第21页 |
·显微研究取样 | 第21页 |
·光学显微镜样品处理与观察 | 第21页 |
·透射电镜样品处理与观察 | 第21-22页 |
2 结果与分析 | 第22-27页 |
·Cd对萝卜生长状况的影响 | 第22页 |
·Cd对萝卜根部结构的影响 | 第22-26页 |
·Cd胁迫对萝卜根部显微结构的影响 | 第23-24页 |
·Cd胁迫对萝卜根部超微结构的影响 | 第24-26页 |
·Cd在根部的分布 | 第26-27页 |
3 讨论 | 第27-30页 |
·Cd胁迫对细胞结构的影响 | 第27-28页 |
·Cd在根部的分布 | 第28-30页 |
第二章 利用DDRT-PCR技术分离萝卜镉胁迫相关基因 | 第30-46页 |
摘要 | 第30-31页 |
1 材料与方法 | 第31-35页 |
·植物材料与Cd胁迫处理 | 第31页 |
·总RNA的提取 | 第31-32页 |
·RNA的纯化与检测 | 第32页 |
·cDNA第一条链的合成与DDRT-RCR | 第32-33页 |
·PCR产物电泳检测 | 第33页 |
·差异条带的回收、二次扩增与克隆测序 | 第33-35页 |
·目的片段的回收 | 第33页 |
·重组质粒的构建 | 第33页 |
·重组质粒的转化 | 第33-35页 |
2 结果与分析 | 第35-43页 |
·萝卜总RNA的提取 | 第35-36页 |
·镉响应mRNA的差异显示分析 | 第36页 |
·差异片段的再扩增 | 第36-37页 |
·Cd响应的差异片段分析 | 第37-39页 |
·Cd胁迫响应差异表达基因片段功能分类 | 第39-42页 |
·差异片段的RT-PCR表达分析 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-46页 |
第三章 萝卜RsZNT2基因克隆与表达特性分析 | 第46-56页 |
摘要 | 第46-47页 |
1 材料与方法 | 第47-48页 |
·试验材料与处理 | 第47页 |
·菌株与质粒 | 第47页 |
·所需试剂 | 第47页 |
·萝卜基因组DNA的提取 | 第47页 |
·萝卜总RNA的提取、纯化与反转录 | 第47页 |
·引物设计与合成 | 第47-48页 |
·萝卜ZNT2基因基因组DNA和cDNA特异扩增 | 第48页 |
·RsZNT2的克隆 | 第48页 |
·序列测序及分析 | 第48页 |
·RsZNT2的表达研究 | 第48页 |
2 结果分析 | 第48-54页 |
·RsZNT2的基因组DNA序列的克隆及分析 | 第48-49页 |
·RsZNT2与ZIP家族其它转运蛋白序列的多重比对 | 第49-51页 |
·RsZNT2编码氨基酸序列同源性及进化树分析 | 第51页 |
·推测RsZNT2的蛋白特征 | 第51-53页 |
·RsZNT2亚细胞定位 | 第51页 |
·RsZNT2结构分析 | 第51-53页 |
·RsZNT2的表达特性分析 | 第53-54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
·RsZNT2蛋白的结构特征 | 第54页 |
·Rs2NT2的RT-PCR表达特性 | 第54-56页 |
第四章 萝卜RsMTP2基因的克隆与表达特征分析 | 第56-66页 |
摘要 | 第56-57页 |
1 材料与方法 | 第57页 |
·试验材料与处理 | 第57页 |
·研究方法 | 第57页 |
·基因组DNA的提取 | 第57页 |
·RNA的提取与反转录 | 第57页 |
·引物设计 | 第57页 |
·萝卜RsMTP2的克隆与测序与表达分析 | 第57页 |
·RsMTP2的表达分析 | 第57页 |
2 结果与分析 | 第57-63页 |
·RsMTP2的克隆及序列分析 | 第57-58页 |
·RsMTP2与家族其它蛋白的多重比对与系统发生分析 | 第58-59页 |
·RsMTP2的二级结构预测 | 第59-60页 |
·RsMTP2的亚细胞定位与跨膜结构分析 | 第60页 |
·RsMTP2的跨膜结构分析 | 第60-63页 |
·RsMTP2的表达特异性分析 | 第63页 |
3 讨论 | 第63-66页 |
全文结论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-78页 |
发表论文情况 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |