致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
目录 | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
·Begomovirus研究进展 | 第11-17页 |
·Begomovirus的基因组结构与功能 | 第11-14页 |
·Begomovirus伴随的DNA卫星 | 第14-16页 |
·Begomovirus的危害及重要性 | 第16-17页 |
·RNA沉默 | 第17-23页 |
·RNA沉默的概念 | 第17-18页 |
·RNA沉默途径的基本机制 | 第18页 |
·植物中的RNA沉默途径 | 第18-20页 |
·RNA沉默在植物中的应用 | 第20-23页 |
·抗双生病毒病基因工程研究进展 | 第23-26页 |
·表达病毒的蛋白或蛋白突变体进行抗双生病毒基因工程 | 第23-24页 |
·表达非病毒蛋白进行抗双生病毒基因工程 | 第24页 |
·表达病毒干扰型DNA进行抗双生病毒基因工程 | 第24-25页 |
·利用RNA干扰机制进行抗双生病毒基因工程 | 第25-26页 |
·研究的目的与意义 | 第26-27页 |
第二章 dsRNA介导的普通烟和番茄抗双生病毒基因工程 | 第27-55页 |
·材料与方法 | 第28-38页 |
·材料 | 第28页 |
·分子实验方法 | 第28-33页 |
·反向重复植物表达载体的构建 | 第33-34页 |
·普通烟转化与卡那霉素抗性植株的再生 | 第34-35页 |
·番茄转化与卡那霉素抗性植株的再生 | 第35-36页 |
·转基因烟草阳性植株检测 | 第36-37页 |
·转Zhhp普通烟对TYLCV-[CN:SH2]的抗性分析 | 第37-38页 |
·结果与分析 | 第38-53页 |
·TYLCV、ToLCTWV和TYLCCNV融合片段的克隆和反向重复植物表达载体的构建 | 第38-41页 |
·TYLCV-SH2部分rep基因片段的克隆和反向重复植物表达载体的构建 | 第41-44页 |
·烟草叶盘的基因转化和植株的形成 | 第44-45页 |
·番茄叶盘的基因转化和植株的形成 | 第45-46页 |
·转ZHhp普通烟植株的PCR检测 | 第46页 |
·转SH2hp-rep普通烟植株的PCR检测 | 第46-47页 |
·转ZHhp普通烟接种TYLCV及抗性分析 | 第47-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
第三章 云南烟草曲叶病毒伴随的缺陷型重组小分子 | 第55-69页 |
·材料与方法 | 第56-60页 |
·材料 | 第56-57页 |
·DNA分子操作常规技术 | 第57页 |
·伴随卫星分子的检测 | 第57-58页 |
·伴随卫星分子侵染性克隆的构建 | 第58页 |
·伴随卫星分子侵染性克隆导入农杆菌 | 第58页 |
·农杆菌接种和致病性测定 | 第58-60页 |
·结果与分析 | 第60-67页 |
·RecsatDNA分子的检测 | 第60-61页 |
·RecsatDNA分子的序列分析 | 第61-62页 |
·RecsatDNA侵染性克隆的获得 | 第62-64页 |
·RecsatDNA侵染性克隆的致病性分析 | 第64-67页 |
·讨论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
附录A:常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第76-77页 |
附录B:常用缓冲液及培养基配方 | 第77-82页 |
在学期间所取得的科研成果 | 第82页 |