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基于dsRNA的烟草和番茄抗双生病毒基因工程研究

致谢第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-9页
目录第9-11页
第一章 文献综述第11-27页
   ·Begomovirus研究进展第11-17页
     ·Begomovirus的基因组结构与功能第11-14页
     ·Begomovirus伴随的DNA卫星第14-16页
     ·Begomovirus的危害及重要性第16-17页
   ·RNA沉默第17-23页
     ·RNA沉默的概念第17-18页
     ·RNA沉默途径的基本机制第18页
     ·植物中的RNA沉默途径第18-20页
     ·RNA沉默在植物中的应用第20-23页
   ·抗双生病毒病基因工程研究进展第23-26页
     ·表达病毒的蛋白或蛋白突变体进行抗双生病毒基因工程第23-24页
     ·表达非病毒蛋白进行抗双生病毒基因工程第24页
     ·表达病毒干扰型DNA进行抗双生病毒基因工程第24-25页
     ·利用RNA干扰机制进行抗双生病毒基因工程第25-26页
   ·研究的目的与意义第26-27页
第二章 dsRNA介导的普通烟和番茄抗双生病毒基因工程第27-55页
   ·材料与方法第28-38页
     ·材料第28页
     ·分子实验方法第28-33页
     ·反向重复植物表达载体的构建第33-34页
     ·普通烟转化与卡那霉素抗性植株的再生第34-35页
     ·番茄转化与卡那霉素抗性植株的再生第35-36页
     ·转基因烟草阳性植株检测第36-37页
     ·转Zhhp普通烟对TYLCV-[CN:SH2]的抗性分析第37-38页
   ·结果与分析第38-53页
     ·TYLCV、ToLCTWV和TYLCCNV融合片段的克隆和反向重复植物表达载体的构建第38-41页
     ·TYLCV-SH2部分rep基因片段的克隆和反向重复植物表达载体的构建第41-44页
     ·烟草叶盘的基因转化和植株的形成第44-45页
     ·番茄叶盘的基因转化和植株的形成第45-46页
     ·转ZHhp普通烟植株的PCR检测第46页
     ·转SH2hp-rep普通烟植株的PCR检测第46-47页
     ·转ZHhp普通烟接种TYLCV及抗性分析第47-53页
   ·讨论第53-55页
第三章 云南烟草曲叶病毒伴随的缺陷型重组小分子第55-69页
   ·材料与方法第56-60页
     ·材料第56-57页
     ·DNA分子操作常规技术第57页
     ·伴随卫星分子的检测第57-58页
     ·伴随卫星分子侵染性克隆的构建第58页
     ·伴随卫星分子侵染性克隆导入农杆菌第58页
     ·农杆菌接种和致病性测定第58-60页
   ·结果与分析第60-67页
     ·RecsatDNA分子的检测第60-61页
     ·RecsatDNA分子的序列分析第61-62页
     ·RecsatDNA侵染性克隆的获得第62-64页
     ·RecsatDNA侵染性克隆的致病性分析第64-67页
   ·讨论第67-69页
参考文献第69-76页
附录A:常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器第76-77页
附录B:常用缓冲液及培养基配方第77-82页
在学期间所取得的科研成果第82页

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